基因芯片用于组分中药新双龙方的配伍机制研究

采用基因芯片技术研究了中药新双龙方及其有效组分人参总皂苷和丹参总酚酸治疗急性心肌梗塞(AMI)大鼠的作用机制. 以结扎大鼠冠脉左前降支的方法制备急性心梗模型, 采用大鼠全基因组表达谱芯片分别筛选出AMI大鼠给药前及新双龙方与组分给药后的差异表达基因(Ratio>2或<0.5), 通过对4组差异基因的综合分析, 比较了新双龙方与组分作用方式的异同, 从分子调控水平上探讨复方配伍后的增效作用, 同时对与药效作用机理直接相关的钙离子转运相关的Cacna1d基因和血管修复相关的Flnb基因进行了实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)定量. 结果表明, 新双龙方与2种有效组分对心梗大鼠基因表达的影响不同. 对差异基因的聚类分析以及药物的调控作用比较结果均表明复方比组分的疗效更好; 通路分析结果表明, 新双龙方与组分均主要通过调控钙信号转导通路、 丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(MAPK)信号等通路发挥药效作用, 且复方涉及更多通路; 筛选出了复方与组分共同调控的靶点基因, 其在3组中具有不完全相同的表达趋势, 但复方具有更积极的调控作用. 本研究结果从分子调控角度证实了复方新双龙方的配伍优势.     

叶酸及其相关代谢物在神经管畸形风险评估和预测中的作用比较研究

以叶酸及其相关代谢物为研究对象,结合定量分析方法以及多种统计学方法,比较它们在神经管畸形发病风险评估和预测中的作用。采用前期建立的HPLC-MS/MS方法测定了121例病例和118例对照母体血清中的代谢物水平,通过双样本成对t检验筛选差异代谢物(p<0.05),然后利用Logistic回归和ROC分析计算这些代谢物的优势比以及预测灵敏度及特异性、阳性和阴性预测率。结果表明,4种差异代谢物中,5-甲基四氢叶酸和同型半胱氨酸的优势比、阳性和阴性预测率均高于叶酸。本方法适用于疾病标志物的筛选和评价。     

丹皮药材的高效液相色谱-质谱/质谱研究

采用高效液相色谱．质谱／质谱建立了丹皮药材的指纹图谱方法。丹皮药材中的主要成分得到较好分离,指纹峰重现性好,通过多维联用技术获得各指纹峰的保留时间、分子量及结构信息,推测出15个指纹峰的可能组成。结果表明：所建立的丹皮指纹图谱信息量丰富,对丹皮药材的化学表征及质量评价有重要的参考价值。     

微流控芯片中微液滴的操控及其应用

微流控芯片中微液滴的操控方法主要有多相流法、电润湿法、热毛细管法、介电电泳法和气动法;应用范围包括乳化、混合、包埋、萃取、微反应器以及生物鉴定等。论文展望了微液滴的发展前景。     

脂组学及其研究进展

脂质的生物功能具有多样性,其代谢与多种疾病的发生、发展密切相关.脂质的分析量化对研究疾病发生机理和诊断治疗,以及医药研发有非常重要的生物学意义.分析技术的快速发展,特别是质谱及其联用技术的运用,促使脂质分析不断完善.脂组学就是对生物样本中脂质的整体分析,是代谢组学的重要组成部分,能够促进代谢组学的发展.本文就脂质的生物功能、脂质分析以及脂组学的研究现状作简要评述.     

牛血清白蛋白在修饰氯离子金纳米通道中的迁移研究

采用化学镀的方法在聚碳酸酯模板上沉积金,制成金纳米通道膜,并对它进行Cl-修饰得到带负电荷的通道。再采用电化学方法(i-t法)对牛血清白蛋白(BSA)在修饰通道中的迁移进行研究。在pH7.4PBS中,对通道两端施加1.0V电压,溶液中离子迁移通过纳米通道时产生电流响应。当溶液中加入BSA后,电流响应减小,且响应变化量与浓度在1.50×10-10~1.35×10-9mol/L范围内呈线性关系,其线性回归方程为|Δi|(μA)=0.0069 0.125c(×10-9mol/L),相关系数为0.9980,检出限为9.46×10-11mol/L(S/N=3)。     

质谱差谱方法及其在中药复方研究中的应用

采用HPLC-ESI-MSn分析得到了复方合煎液中有效部分提取物的指纹图谱数据, 通过比对找出对复方指纹谱有贡献的有效成分峰. 再用质谱差谱方法处理多级质谱数据, 提取不同类型的中性丢失, 实现了对复方有效成分化合物的快速分类鉴定. 用该法研究了复方柴苓汤有效部分黄芩总黄酮和柴胡总皂苷.     

细胞图案化技术及其在胚胎干细胞研究中的应用

图案化技术的不断创新及在细胞领域研究中的应用使细胞图案化技术成为研究和控制细胞行为的有效实验工具.该技术结合微纳米制备、电化学、表面化学和光化学等手段与方法塑造和细胞相关的物理化学参量,如形貌、粗糙度、亲疏水性等,动态地控制细胞的粘附、脱附、迁移、分化及细胞间相互作用,为细胞生物学研究提供一个崭新的技术平台.本文从细胞...     

脂质体类药物载体的微流控制备

脂质体在药物输送、人造细胞等许多领域有着巨大的应用前景。作为药物载体,脂质体可以保护药物、提高药效、减小药物对机体的毒性、使药物具有靶向性,因此发展或改进脂质体制备方法有着重要的意义。然而,传统的脂质体制备存在耗时长、设备贵、制备条件易变、前后处理步骤多、粒径不均一以及难重复等问题,基于此,脂质体的微流控制备技术逐渐发展起来。研究表明微流控技术在脂质体制备方面有着独特的优势,包括精确地控制脂质体的大小和尺寸分布。本文综述了近年来基于微流控技术的几种脂质体制备方法的研究进展,并对比了几种方法制备的脂质体的性质;进一步分析和探讨了当前微流控技术制备脂质体存在的问题,并展望了其发展趋势和方向。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定烟草中5种Amadori化合物

建立了高效液相色谱-三重四极杆质谱（HPLC-QqQ MS）联用定量分析烟草中5种Amadori前香物质的方法。样品经含5%（v/v）甲醇的水提取后,采用Waters XBridge^TM Amide色谱柱（250 mm×4.6 mm,3.5 μm）、以甲醇-水为流动相进行分离,采用多反应监测（MRM）模式测定烟草样品中5种Amadori化合物的含量。结果表明,5种Amadori化合物的峰面积与质量浓度的线性关系良好,相关系数r为0.9895~0.9989;定量限（S/N=10）在10.18~44.58 μg/L,检出限（S/N=3）在3.51~14.86 μg/L;平均加标回收率为92.6%~123.6%,相对标准偏差（RSD）小于9.4%。本方法操作简便、灵敏度高、分析速度快,可以用于烟叶及卷烟中5种主要Amadori类物质的含量测定。