基于UHPLC－Q－Exactive－MS技术的短序蒲桃叶岩白菜素新衍生物的快速发现

基于课题组前期对短序蒲桃叶的研究,该文建立了快速鉴定短序蒲桃叶中未知岩白菜素类化学成分的超高效液相色谱－串联四极杆轨道阱质谱（UHPLC－Q－Exactive－MS）分析方法。采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（1.8 μm,2.1 mm × 100 mm）,乙腈－0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,Orbitrap MS负离子模式下检测。总结了模式成分的质谱裂解规律和特征碎片离子,并采集高分辨质谱数据对短序蒲桃叶中的岩白菜素衍生物等酚酸类成分进行鉴定。从短序蒲桃叶中鉴定出54种酚酸类成分,包含34种岩白菜素衍生物,均为在蒲桃属植物中首次报道,其中发现潜在的新岩白菜素类化合物10个。所得结果为进一步研究和利用民族中草药短序蒲桃提供了参考。     

基于超高效液相色谱-八端口转子阀的微升级预分级系统的建立

复杂生物系统蛋白质组的深度覆盖鉴定得益于近年来快速发展的高效色谱分离和串联质谱分析技术。二维高效液相色谱（2-D HPLC）是实现复杂肽混合物正交分离的有效手段，但其缺点是运行时间长，通常要求肽上样量在毫克级别，且收集时的组分体积大，后续合并流程复杂，而有望替代其的StageTip技术，则由于有限的色谱分离梯度，难以达到充分的正交分离。该文探索了超高效液相色谱（UPLC）和八端口转子阀联用，作为高效、便捷肽段预分离和收集系统的可行性。研究结果显示，将UPLC的高pH反相色谱分馏与在线LC-MS/MS相结合，可以实现高pH和低pH条件下基于肽段不同色谱保留行为的正交互补分离，在蛋白质鉴定方面表现出优越的性能。应用该方法对人肝癌细胞系HepG2进行3次技术重复试验，重复试验间具有非常高的定量重现性（决定系数R²>0.95）。与传统StageTip方法相比，肽段鉴定数提高了23.52%。该分级方法灵活、稳定，能够针对较少的样品开展蛋白质组深度覆盖分析。     

二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶类衍生物作为集落刺激因子-1受体激酶抑制剂的分子对接和定量构效关系研究

集落刺激因子-1受体激酶(CSF-1R)属于Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族成员,其在调控单核巨噬细胞系中发挥重要作用。CSF-1R及其配体异常表达与肿瘤发展过程密切相关。因此,CSF-1R信号传导可成为抗肿瘤治疗的有吸引力的靶标。本文用比较分子场分析法(Co MFA)和比较分子相似性指数分析法(Co MSIA)研究了54个二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶类CSF-1R激酶抑制剂的三维定量构效关系(3D-QSAR)。基于配体叠合,Co MFA和Co MSIA模型的交叉验证系数(q~2)分别为0. 725和0. 636,拟合验证系数(r~2)分别为0. 960和0. 958,结果表明这两种模型均具有较好的预测能力。所建模型的等势图能直观反映分子不同取代基对活性的影响,其中立体场和疏水场对活性的贡献较大。通过分子对接研究显示,氨基酸残基Cys666、Asp796在配体和受体结合过程中产生作用,分子对接的结合模式与3D-QSAR得到的结果一致。这些信息为进一步优化CSF-1R激酶抑制剂提供了理论基础。     

电聚合L-半胱氨酸修饰电极的研制及其对L-酪氨酸的分析

研制了电聚合L-半胱氨酸修饰玻碳电极,采用循环伏安法研究了L-酪氨酸在此修饰电极上的电化学行为。利用线性扫描循环伏安法对L-酪氨酸进行定量分析,L-酪氨酸的线性范围为2.0×10^-8~2.0×10^-5 mol·L^-1,检出限为7.9×10^-10 mol·L^-1。结果表明,此修饰电极具有良好的选择性、重现性和稳定性,对L-酪氨酸的电催化性能良好,可用于人尿中L-酪氨酸的测定,回收率为98.3%~109.8%。     

抗氧化肽SHW作用于Keap1-Nrf2通路的分子动力学模拟

采用分子对接和分子动力学模拟的方法,研究了抗氧化三肽SHW与Keap1蛋白的相互作用,揭示了非竞争性结合的分子机制.分别位于Keap1的P1和P5活性口袋的Keap1蛋白关键残基ARG-415和TYR-525通过与SHW形成氢键来增强结合强度且对结合能有突出贡献. SHW的吲哚基团是与TYR-334、TYR-525和TYR-572形成疏水作用的关键,促进与P5口袋的结合.研究结果揭示了SHW通过Keap1-Nrf2信号通路作用于活性口袋的分子机制,为抗氧化剂的开发提供理论依据.     

不同年份老香黄定量分析及其化学模式识别研究

建立了一种联合化学标志物定量分析和化学模式识别技术快速判别不同年份老香黄的方法,并筛选其差异性化学标志物.采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)建立了对21种与老香黄相关的化学标志物及其内标物山柰酚-3-O-芸香糖苷的检测方法,该方法的线性关系良好,灵敏度高,专属性强,可用于对不同年份老香黄的区别分析.根...