基于液相色谱-串联质谱的结肠癌血清氧固醇标志物筛选

结肠癌(CC)是全球常见恶性肿瘤之一,发病率呈逐年上升趋势,目前没有有效的标志物用于疾病早期诊断和干预跟踪。胆固醇及其氧化衍生物氧固醇在众多恶性肿瘤发生发展中发挥关键作用。该研究采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术,对CC临床血清样本中胆固醇及相关10种氧固醇代谢物进行了定性定量分析,并采用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行多元统计分析,发现上述目标代谢物能够较好地区分CC组与健康对照组。为防止数据过拟合,该研究在PLS-DA模型各代谢物变量投影重要性(VIP)基础上,结合最优组分数及K-均值聚类结果,筛选得到3种代谢标志物。通过受试者操作特征曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)分析,发现筛选得到的3种潜在标志物联合预测CC达到0.998,说明模型性能优良。GO(基因本体论)富集分析显示3种潜在标志物主要分布在内质网和包被囊泡上,参与胆固醇代谢、运输、低密度脂蛋白重塑等生物进程,发挥胆固醇运输活性和低密度脂蛋白颗粒受体结合的分子功能。KEGG(京都基因与基因组百科全书)通路分析显示3种潜在标志物富集于类固醇生物合成、PPAR(过氧化物酶体增殖物激活受体)信号通路及ABC(ATP结合盒)转运等通路上。该研究为寻找CC标志物及进一步阐明胆固醇及氧固醇在CC发病过程中的作用奠定了一定的基础。     

育龄期妇女血清EFAs和NEFAs轮廓谱及其用于NTDs预防性营养干预研究

本文借助GC/MS代谢组学方法, 测定了育龄期妇女血清中酯化和非酯化脂肪酸轮廓谱, 并对营养干预前后育龄期妇女血清脂肪酸含量变化进行了研究. 按营养干预组(48例)和对照组(48例)分组, 测定了育龄期妇女血清中酯化脂肪酸(EFAs)和非酯化脂肪酸(NEFAs)的平均含量; 利用SIMCA-P软件对定量结果进行PLS-DA分析, 聚类结果良好. 基于定量结果, 指认了6种潜在营养生物标志物, 并由此初步探讨了这些潜在生物标志物的生理意义以及营养素干预对育龄期妇女血清脂肪酸含量的影响, 以及脂肪酸代谢变化可能对胚胎神经发育造成的影响.     

基于MALDI-TOF-MS的脂质组学研究——鲫鱼受镉暴露的潜在生物标志物

以含镉(Cd)500 μg/L水体中养殖0, 10, 20 d的3组鲫鱼为研究对象, 测定鱼肉中Cd含量, 借助HPLC与MALDI-TOF-MS离线联用技术得到鱼肉磷脂图谱, 并采用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)针对图谱数据开展模式识别分析. 结果表明, 在20 d暴露期内, 鱼肉中Cd含量呈持续上升趋势, 而磷脂酰胆碱(PC)含量在暴露10 d后显著低于正常水平(未受镉暴露)(p<0.05), 暴露20 d后基本恢复到正常水平. PLS-DA分析实现了3组样本的组间判别, 说明磷脂指纹图谱能更好的反映外源Cd对鲫鱼的代谢影响. PC可以作为指示水体Cd对鲫鱼毒害作用的生物标志物. HPLC与MALDI-TOF-MS离线联用技术不仅能定量分析鱼肉中PC总量, 也分离纯化了PC组分, 从而使MALDI-TOF-MS成功用于复杂鱼肉样品的磷脂分析, 适用于脂质组学研究.     

基于非接触式拉曼光谱分析人血与犬血的PCA-LDA鉴别方法

将拉曼光谱分析法与数理统计方法有机结合,构建人血与犬血种属判别模型,实现了不同种属血液样本的高效无损鉴别.采用拉曼光谱的无损测试模式对血液样本进行测试,考察了抗凝管管材、聚焦位置及曝光时间等对血液样本拉曼光谱的影响,在激发波长为632.8 nm,光谱扫描范围为200~1800 cm-1,功率衰减率50%,曝光时间5 s及累加次数为2次的优化条件下,获得了无损检测条件下的血液样本拉曼光谱图.针对血液样本组分复杂、拉曼光谱信号基底背景高等问题,提出了基于小波变换去噪,进行分段多项式基线校正的预处理方法,有效解决了血液样本拉曼光谱谱图的高噪音和基线漂移问题.实验选择30例正常人血和33例比格犬血为样本训练集,5例正常人血和5例比格犬血为测试集,基于主成分分析法(PCA)联合线性判别法(LDA)模型,训练集分类正确率达到95.23%,盲测集分类正确率达90.00%.这种基于非接触式血液样本拉曼光谱和PCA-LDA判断模型的测试方法在进出口检验检疫等涉及血液无损鉴别的领域具有广泛的应用价值和前景.     

HPLC-MS结合多元统计分析区分人参产地及筛选皂苷类标志物

利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术结合多元统计分析方法, 区分中国人参主产区5个不同产地的45个人参样本, 筛选出差异性皂苷类标志物. 根据人参总皂苷在反相C₁₈色谱柱中的洗脱顺序, 结合串联质谱分析和标准品比对, 在提取的人参总皂苷中鉴定出15种原人参三醇型、 24种原人参二醇型和2种齐墩果酸型共41种皂苷. 对人参总皂苷的HPLC-MS全扫描数据进行了多元统计分析. 正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)结果表明, 所建立的分析模型具有良好的数据描述能力和预测能力. 所有人参样本能够根据产地被区分, 并筛选得到同时区分5个产地的差异性皂苷类组分18种; 能够区分任意2个产地人参样本的差异性组分主要为在人参中含量较高的人参皂苷Rb1, Rg1, Re, Rc, Rd, Ro和m-Rb1等. 分层聚类分析(HCA)结果显示, 黑龙江和吉林两省的样本能够独自聚类, 但是绥化市的样本更接近于吉林省. 初步推断原因为绥化市地理位置较接近吉林省, 两地人参生长环境相似并可能存在种质资源交换.     

复方乌头汤配伍贝母化学成分变化研究

将超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS) 及UPLC-MSⁿ技术与偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)结合, 对乌头汤分别与川贝、 浙贝按照制川乌与贝母生药质量比1: 1配伍前后化学成分的变化情况进行了研究. 在PLS-DA模型中, 乌头汤与川贝、 浙贝配伍前后的煎煮液均可明显区分. 乌头汤与川贝共煎后获得8个化学标志物, 可鉴定出7个化合物, 其中尼奥灵、 附子灵及苯甲酰基新乌头原碱在共煎后含量上升, 塔拉定、 10-OH苯甲酰基乌头原碱、 10-OH苯甲酰基新乌头原碱和苯甲酰基去氧乌头原碱在配伍后含量下降. 乌头汤与浙贝共煎后获得7个化学标志物, 分别为Chuanfumine、 Songorine、 塔拉定、 尼奥灵、 附子灵、 苯甲酰基新乌头原碱和10-OH苯甲酰基新乌头原碱, 所有化学标志物的含量在共煎后均降低.     

藏红花挥发油共有组分的气相色谱-质谱分析

本文采用气相色谱-质谱(GC-MS)法分析不同批次的藏红花挥发性成分,探讨同一产地不同批次藏红花挥发组分的成分与含量,并用峰面积归一化法确定各成分的相对含量,以其中的主要挥发组分作为考察指标,观察不同批次藏红花挥发组分的变化情况.初步鉴定出42种成分,且同一产地不同批次藏红花挥发性成分具有一定相似性.     

微流控芯片系统在循环肿瘤细胞分离检测中的应用进展

循环肿瘤细胞(CTCs)的分离分析一直是肿瘤相关研究中的热点方向,作为液体活检的重要标志物之一,其在外周血中的含量与癌症病发状况密切相关.然而人体血液中CTCs的含量非常低,通常来说仅有0～10个/mL,因此在开展临床血液样本中CTCs的检测前,往往需要对样本进行前处理,以实现CTCs的分离和富集.微流控芯片技术凭借样...     

乙醇含量对黄酒挥发性组分检测的影响

黄酒是风味独特的发酵酒,酒中组分复杂,且不同种类黄酒中乙醇含量差异较大。通过顶空-气相色谱法(HS-GC)测量不同乙醇含量的黄酒中挥发性组分色谱峰面积的变化,分析了乙醇引起的基质效应对不同挥发性组分定量检测的影响。在乙醇含量为10%～19%vol(酒精度)的黄酒中,16种挥发性组分(仲丁醇、正丙醇、异丁醇、正丁醇、异戊醇、β-苯乙醇、乙醛、异戊醛、苯甲醛、甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸异丁酯、乙酸异戊酯、己酸乙酯、乳酸乙酯、丁二酸二乙酯)的峰面积与乙醇含量呈线性负相关。酒中乙醇含量的升高改变了其他大部分微量挥发性组分的气液平衡。乙缩醛的峰面积与乙醇含量呈线性正相关,两者在乙醇浓度变化过程中发生化学反应。甲醇、糠醛和乙酸的峰面积受乙醇含量的影响较小。色谱峰面积受乙醇含量的影响系数为-12.4%～4.9%,不同挥发性组分的蒸汽压及气液平衡受到乙醇基质效应的影响程度不同。将不同黄酒样品调整至同一酒精度后,不同样品中挥发性组分在溶液中的含量与色谱峰总面积成正比,乙醇引起的基质效应对检测结果的干扰得到有效降低。研究人员在使用基于气液平衡等原理的前处理方法开展风味组分定量检测时,应将不同黄酒样品调整至相...     

气相色谱-质谱联用技术分析大气细颗粒物对小鼠肺组织代谢轮廓的影响

建立了基于气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析大气细颗粒物(PM2.5)滴注对小鼠肺组织代谢轮廓的影响的研究方法.通过分析肺组织细胞内代谢物的变化,研究不同浓度PM2.5对小鼠肺组织代谢的毒性机制.鼻腔分别滴注0、7.5、20.0和37.5 g/L的PM2.5悬液,提取肺组织胞内物质,预处理后进行GC-MS分析,结合主成分分析法(PCA)、偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)进行数据解析,通过PLS-DA得分图可将不同PM2.5染毒浓度下的肺组织胞内物质明显区分.运用PLS-DA载荷图及模型的变量重要性因子(VIP)值,发现了7种代谢物可作为区别不同浓度PM2.5下代谢组的潜在生物标志物,分别为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、鸟氨酸、延胡索酸、柠檬酸、嘌呤(p<0.01).代谢途径分析结果表明,PM2.5滴注使小鼠肺组织受到氧化损伤,氧化应激反应增强,抑制了三羧酸循环(TCA循环)及嘌呤代谢.本研究为深入解析PM2.5致毒机理提供了新的方法及理论依据.     

Effect of Mode of Blood Collection Procedures on Blood Glucose

Abstract

The effect of various routes of blood collection on blood glucose concentrations have been examined. It was observed that in normal rats the blood collection from heart immediately after cervical dislocation showed 50% higher values as compared to tail-vein of live animals, while the blood collection by tail-vein and neck-cutting did not produce a difference in normal rats. The blood glucose values of diabetic rats were higher by 15 to 18% when blood was collected from heart or by neck-cutting in comparison to tail-vein.     

血液化学

血液是人和动物体内不可缺少的重要组成部分,通过化学方法改变血型和合成人造血液是改善血液供求不足现状的一个重要途径。这是我们化学家、生物学家和医学家共同努力的方向。     

血细胞的光谱特性研究

首次研究了血液、红细胞、白细胞和血清的共振散射光谱,因和红细胞均在３１０ｎｍ、４７０ｎｍ、５６０ｎｍ、６００ｎｍ处产生四个共振散射峰,白细胞在３１０ｎｍ、４７０ｎｍ处产生二个共振散射峰;血清在３１０ｎｍ、４７０ｎｍ、６８０ｎｍ处产生三个较弱共振散射峰,全血和红细胞在４１７６ｎｍ处有最大吸收峰,白细胞在３７６．３ｎｍ处有最大吸收峰,血细胞浓度与共振散射光强度成正比。     

Effect of Dielectric Barrier Discharge Treatment of Blood Plasma to Improve Rheological Properties of Blood

The whole blood viscosity (WBV) is one of the major independent indicators for the risk of cardiovascular disease, stroke, and peripheral arterial diseases. Furthermore, oxidized LDL molecules are known to cause atherosclerotic plaques in arteries, and it is one of the key components that increase WBV. The present study attempted to reduce WBV by coagulating plasma proteins and lipid molecules from blood plasma using non-thermal dielectric barrier discharge (DBD) and removing them through filtration. The DBD treatment was found to produce coagulated particles in blood plasma. After filtration of the coagulated particles, WBV decreased by 9.1 and 17.7% for both systolic and diastolic blood viscosities, respectively. The present results suggest that the removal of excess plasma proteins and lipid molecules might be feasible using DBD treatment.     

Blood coagulation and fibrinolysis

As a result of advances in protein chemistry it is now widely accepted that blood coagulation proceeds via a series of reaction steps of the nature of enzyme-substrate reactions catalyzed by phospholipids. This also applies to the compensatory process of fibrinolysis. The factors taking part in both mechanisms as well as the inhibitors regulating the equilibrium have been shown to be proteins, some of them with a high carbohydrate content. Modern diagnostic methods and therapy are based on this knowledge.     

Determination of Amygdalin in Blood Serum

Abstract

A rapid, simple and sensitive method for the repetitive determination of amygdalin in human serum has been developed. The method is based on the β-gluco-sidase-catalyzed hydrolysis of amygdalin to glucose, which subsequently is oxidized in the presence of glucose-oxidase. The sample is injected into a continuously circulated reagent mixture and the oxygen depletion is monitored with a three-electrode amperometric system. Amygdalin in the range 0.02 to 2 mg/ml has been determined with relative errors and relative standard deviation of about 2%. The maximum determination rate is 700 injections/h. Recovery studies are also reported for amygdalin in serum calibration and controls.     

血液中的缓冲系教学探讨

以长沙医学院临床医学专业大一学生为教学对象,在血液中的缓冲系的教学过程中采用"4个问题为中心"的教学方法,问题有医学知识延伸,层次分明。结果表明,学生更主动参与课堂的问题回答和讨论,提高了学习效果,为他们医学后续课程中酸碱平衡紊乱及诊断的学习打下了坚实基础。     

儿童血铅与其它微量元素水平的关系

为探讨儿童血铅与血锌、铁、铜、钙、锰含量的相互消长关系 ,利用多元线性回归分析对 2 1 72名儿童的血微量元素及血铅进行了分析。结果显示 ,被调查儿童中 47 5 6%的儿童血铅升高 ,全部呈轻 中度升高 ( 0 1 0～ 0 44μg/mL) ;钙、铁、锰对血铅值的倒数 (PB1)的作用显著 (P<0 0 1 ) ,但相关并不密切 ,偏相关系数分别为 -0 0 79,0 0 7,0 0 6;血钙与血锌、铜之间有明显的交互作用 ,儿童体内血钙对血铅的影响依赖于血铜、锌的含量 ;血铁和锰含量与PB1呈正相关 ,即与血铅水平呈负相关 ,两者的部分作用又被它们之间的交互作用所减弱。结果提示 ,轻 中度铅中毒仍是城市儿童中普遍存在的一个重要问题 ,除了控制铅污染源外 ,还要注意适当补充铁剂 ,合理饮食以保持机体内钙锰等各种微量元素间的平衡也是重要的防治措施。     

初产妇血铅的初步研究

采用火焰分光光度法对昆明地区110名初产妇血Pb进行了检测,其结果平均值为1.257μmol/L,高出国际上血Pb的安全阈。