反相液相色谱操作参数最优化及水溶性维生素的分离

用最小二乘法拟合的多项式作为描述保留值或峰宽与流动相组成间关系的数学模型, 以影响水溶性维生素分离的主要因素(流动相中有机调节剂甲醇的浓度)作为主变量, 分析时间最短为目标, 各最难分离物质对的分离度≥1.5为约束条件, 在一定变量范围内对流动相组成进行了优化, 并运用此优化方法选择了维生素C、烟酸、烟酰胺、维生素B1、维生素B2和维生素B6六种水溶性维生素的最佳分离条件.     

离子对反相高效液相色谱法同时测定复合维生素片中4种水溶性维生素

采用离子对反相高效液相色谱法同时测定了复合维生素片中烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6等4种水溶性维生素的含量。样品经水溶解、过滤后,以Hypersil C18化学键合硅胶为固定相,以甲醇-0.5%(体积分数)醋酸水溶液(含2.5 mmol/L己磺酸钠,pH 2.8)(体积比为18∶82)为流动相,等度洗脱,紫外检测器于280 nm波长下检测。当烟酰胺、维生素B1、维生素B2和维生素B6的质量浓度分别在25450 mg/L,590 mg/L,2.590 mg/L,595 mg/L时,其峰面积与质量浓度的线性关系良好;日内测定平均相对标准偏差(n=7)分别为1.0%,2.2%,1.8%和1.3%;日间测定相对标准偏差(n=5)分别为1.5%,3.6%,2.4%和1.7%。该方法已成功应用于复合维生素片中4种水溶性维生素的同时测定。     

HPLC法检测丁二酸发酵液中的有机酸和水溶性维生素

采用高效液相色谱法(HPLC)同时检测丁二酸发酵液中的有机酸和水溶性维生素。以RP-HPLC为分离模式,选用Hedera ODS-2色谱柱(5μm,4.6×250 mm),20 mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(pH2.9)和乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为210 nm,建立了同时测定分析8种水溶性维生素和3种有机酸的方法,15 min内所有组分都洗脱完全。8种水溶性维生素和3种有机酸在线性范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.9989~0.9997;加标回收率在92.5%~100.3%之间;RSD(n=5):0.9%~1.9%。本方法采用同一种流动相既可以测定发酵液中的有机酸又可以测定水溶性维生素的含量。     

微乳液相色谱法同时分离7种水溶性维生素

采用微乳液相色谱法同时分离7种水溶性维生素(V_(B1)、V_(B2)、V_(B6)、VB_(12)、叶酸、烟酰胺和VC)。考察了微乳流动相体系中表面活性剂、油相、助表面活性剂的种类以及流动相的pH值、柱温等对水溶性维生素分离的影响。优化后微乳体系的组成为:十二烷基硫酸钠(SDS)/聚氧乙烯月桂醇醚(Brij35)/正丁醇/乙酸乙酯/水(质量比为2∶60∶66∶8∶864)。色谱柱为Agilent TC C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,检测波长为254 nm,流速为0.5mL/min。7种水溶性维生素在20 min内达到基线分离。在4~36 mg/L范围内,7种水溶性维生素的质量浓度与峰面积的相关系数均大于0.999 1。不同添加水平下,V_(B1)、V_(B2)、V_(B6)、VC和烟酰胺的平均回收率为93.9%~102.9%。该方法可用于食品和药品中的多种水溶性维生素的分离、鉴别及快速测定。     

高效液相色谱法同时测定扁桃仁中的水溶性维生素C,B1,B2和B6

建立了用高效液相色谱同时测定扁桃仁中4种水溶性维生素C,B1,B2和B6的方法。以酸水解法处理样品,在Inertsil ODS-3柱(25 cm×4.6 mm i.d., 5.0 μm)上,以0.05 mol/L KH2PO4 (pH 6.0)-甲醇(体积比为70∶30)为流动相进行等度洗脱,检测波长265 nm条件下,对陕西蒲城扁桃仁中的水溶性维生素C,B1,B2和B6的含量进行了同时测定。4种水溶性维生素在其质量浓度为5.0~50 mg/L时线性良好(r=0.9990~0.9997);添加水平为5.0~20.0 mg/kg时,平均回收率为91.77%～99.30%,相对标准偏差(n=3)为0.31%～1.98%。测得陕西蒲城产扁桃仁中维生素B2的含量为4.27～4.53 mg/kg,维生素B1的含量为0.799～0.838 mg/kg,未检出维生素C和维生素B6。该法简便、快速,准确性和重现性均较好,对果仁中水溶性维生素的测定具有一定的参考价值。     

用反相离子对色谱分离和检测水溶性维生素——十二烷基磺酸钠作离子对试剂

本文使用十二烷基磺酸钠(SDS)作离子对试剂,研究了用反相离子对色谱法对混合水溶性维生素的检测和分离,确定了最佳实验条件,包括SDS浓度,pH值,甲醇与水的配比,三乙胺浓度及柱温等。用本方法对九种混合水溶性维生素〔B_1,B_2,B_5(烟酰胺和烟酸),B_6(吡哆醛和吡哆醇),B_(11),B_(12)和C〕的标样和西瓜汁的分离表明,在所选定的实验条件下,可于10min内一次分离。     

液相色谱-质谱法测定运动饮料中9种水溶性维生素

建立液相色谱–质谱法快速测定运动饮料中维生素B_1、维生素B_2、泛酸、维生素B_6、生物素、叶酸、维生素B_(12)、烟酸、烟酰胺9种水溶性维生素的方法。样品用水超声提取后,采用ACQUITY HSS T3液相色谱柱分离,以0.1%甲酸甲醇–0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,采用质谱多反应监测扫描模式的选择性和特异性定量。9种水溶性维生素的质量浓度与色谱峰面积分别在各自范围内具有良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999。当称样量为2.00 g,定容体积为50 mL时,方法检出限为0.025 0～0.062 5μg/g,测定下限为0.10～0.25μg/g。样品的加标回收率为90.0%～102.3%,测定结果的相对标准偏差为0.9%～3.2%(n=7)。该方法简便、快速、准确、灵敏,适用于运动饮料中水溶性维生素的测定。     

毛细管电泳法高压快速分离分析菠菜中的水溶性维生素

在毛细管电泳法中,通过双模对接高压电源可以获得0～40 kV甚至40 kV以上的超高电压。本研究在40 kV的超高电压下,以纯电解质水溶液为缓冲液,实现了蔬菜中通常含有的8种水溶性维生素(VB1、VB2、VB6、VC、D-泛酸钙、D-生物素、烟酸和叶酸)的快速分离及菠菜样品的定量分析。通过考察电压、缓冲溶液浓度、pH值等因素对分离的影响,确定了优化的实验条件。结果表明,在40 kV高压下,采用25 mmol/L硼砂-硼酸溶液缓冲液(pH 8.8),菠菜中上述8种水溶性维生素在2.2 min内获得了较好的基线分离。用此方法对菠菜中的水溶性维生素进行定量分析,得到了令人满意的结果。水溶性维生素的线性相关系数范围为0.9981～0.9999,检出限为0.2～0.3 mg/L,在菠菜中的平均加标回收率为88.0%～100.6%,峰面积的相对标准偏差(RSD)为1.15%～4.13%。     

离子对试剂用于4种水溶性维生素的液相色谱分离

1　引　　言在进行复合维生素药物分析、饲料添加剂维生素混料及饲料复合维生素制剂的分析时 ,通常会遇到几种高浓度水溶性维生素的分离问题 ,而这些水溶性的维生素则是有酸性、中性、碱性化合物混合的 ,例如Ｖｃ、ＶＢｌ、ＶＢ2 、ＶＢ6等。常规的反相色谱法通过改变流动相的ｐＨ值 ,离子强度 ,有机相浓度 ,及分离湿度等条件来优化这类复杂物质的分离 ,但其适应范围往往很窄。本文则将简述离子对试剂戊烷磷酸钠 (ＰＩＣＢ5)、己烷磷酸钠 (ＰＩＣＢ6)和庚烷磷酸钠 (ＰＩＣＢ7)用于水溶液性维生素Ｖｃ、ＶＢ1 、ＶＢ2 、ＶＢ6的分离 ,结果令…     

高效液相色谱法同时测定多维元素片中9种水溶性维生素

采用更简便的流动相体系,建立了高效液相色谱法同时测定多维元素片中9种水溶性维生素的快速分析方法。以酸水解与离心的方法处理样品,用C8柱分离,流动相A为0.1%三氟乙酸的水溶液,B为甲醇,梯度洗脱,二极管阵列检测器(DAD)检测。28min内实现了9种水溶性维生素的同时分离测定。各维生素线性关系、精密度、回收率均良好。并使用美国国家标准技术研究院(NIST)的SRM3280多维元素片标准物质对方法进行了确认,运用此法测定了市售多维元素片中的水溶性维生素含量。该法可作为维生素片剂中水溶性维生素分离测定的质控方法。     

Analysis of three effective components in Fructus corni and its preparations by micellar electrokinetic capillary chromatography

An efficient micellar electrokinetic capillary chromatography method was developed to analyze three major active components including morroniside, loganin and gallic acid in Fructus corni and its six preparations for the first time. The factors that could affect the separation were studied, such as the pH of the buffer, concentrations of SDS, organic modifier and beta-CD, and the applied voltage. The optimum analysis conditions were 10 mmol/L NaH(2)PO(4)-5 mmol/L Na(2)B(4)O(7) (pH 6.8) buffer containing 140 mmol/L SDS, 1 mmol/L beta-CD, 5% (v/v) methanol and 12.5 kV applied voltage. The linearity between the peak-areas and the concentrations of the analytes were investigated, and they exhibit excellent linear behavior over the concentration ranges (correlation coefficients 0.9953-0.9995). In addition, the pK(a) of gallic acid was determined using capillary zone electrophoresis. The result was consistent with that reported by the literature.     

植物生长激素的毛细管胶束电动色谱法分离

以高效毛细管胶束电动色谱法对赤霉素（ＧＡ）、脱落酸（ＡＢＡ）、吲哚丁酸（ＩＢＡ）、吲哚乙酸（ＩＡＡ）、萘乙酸（ＮＡＡ）等植物生长激素的分离和测定进行了研究。考察了各种操作参数及有机添加剂对分离的影响,得到良好的分离结果。对各组分进行了定量测定研究,ＡＢＡ、ＧＡ、ＩＢＡ、ＩＡＡ及ＮＡＡ的最低检测浓度依次为５．０,３．０,０．５８,０．１５,０．１４ｍｇ／Ｌ。     

电堆积大体积进样-在线扫集-胶束毛细管电动色谱法测定胡黄连中的4种有机酸

建立了以电堆积大体积进样-在线扫集-胶束毛细管电动色谱法测定胡黄连中的异阿魏酸、肉桂酸、阿魏酸和香草酸的新方法.考察了pH值、四硼酸钠浓度、SDS浓度、电压、有机溶剂和进样时间对分离效果的影响.以40mmol/L四硼酸钠-80mmol/L十二烷基磺酸钠(SDS)为缓冲液(含10%(V/V)甲醇,pH 9.4),在进样电...     

高效毛细管电泳安培法测定肉苁蓉中松果菊苷的含量

采用毛细管电泳安培法建立了肉苁蓉中松果菊苷含量的检测方法,探讨了缓冲溶液种类、工作电位、分离电压、进样时间等对分离和检测的影响.在15 mmol/L硼砂缓冲溶液(pH 9.5),25 kV电压,0.6 V工作电位的条件下,松果菊苷的质量浓度在0.5～50.0 mg/L范围内与峰面积呈良好线性,相关系数为0.9994,检...     

On-line coupling of pressurized capillary electrochromatography with end-column amperometric detection for analysis of estrogens

An improved technique, pressurized capillary electrochromatography (pCEC) coupling with end-column amperometric detection (AD), was developed and used for the separation and determination of estrogens. The effects of pH value, composition of mobile phase, concentration of the surfactant sodium dodecyl sulfate (SDS) and applied voltage on separation were investigated. The electrochemical oxidation of diethylstilbestrol (DES), dienestrol (DE), and hexestrol (HEX) could be reliably monitored with a carbon electrode at 0.9 V (vs. Ag/AgCl). The pCEC analyses were performed on a capillary separation column packed with 3 microm C18 particles with an acetonitrile/water (31%: 69%) mobile phase containing Tris buffer (5 mmol/L, pH 4.5) and 4 mmol/L SDS. High voltage up to 12 kV reduced the retention time dramatically and still provided a baseline resolution. In addition, supplementary pressure prevented bubble formation and provided reliability and reproducibility of the pCEC performance. The detection limits for the three estrogens ranged from 1.2 to 2.2x10(-7) mol/L, about 10 20-fold lower than those obtained with pCEC-UV detection. To evaluate the feasibility and reliability of this system, the proposed pCEC-AD method was further demonstrated with fish muscle samples spiked with estrogens.     

Separation of sulphonamides and determination of the active ingredients in tablets by micellar electrokinetic capillary chromatography.

The separation and determination of seven sulphonamides and trimethoprim by micellar electrokinetic capillary chromatography were successfully achieved, employing sodium dodecyl sulphate (SDS) as a micellar phase and tetrabutylammonium bromide as additive. The effects of surfactant and modifier concentrations, pH and applied voltage on the retention behaviour of the solutes and the column efficiency were studied. The migration time of sulponamides increase with increasing SDS concentration and decreasing the applied voltage, but varies only slightly with pH. There is an optimum applied voltage at which a higher theoretical plate number is achieved, in contrast to the sulphonamides, the retention behaviour of trimethoprim gave a more obvious response to changes in the experimental conditions. The determination of three active ingredients in tablets was performed using sulphathiazole as an internal standard with good results. The theoretical plate number ranged between 2.0 x 10(5) and 2.8 x 10(5) with a 50-cm capillary.     

Determination of hydrolyzable tannins in the fruit of Terminalia chebula Retz. by high-performance liquid chromatography and capillary electrophoresis

A RP-HPLC method for determining fourteen components (gallic acid, chebulic acid, 1,6-di-O-galloyl-D-glucose, punicalagin, 3,4,6-tri-O-galloyl-D-glucose, casuarinin, chebulanin, corilagin, neochebulinic acid, terchebulin, ellagic acid, chebulagic acid, chebulinic acid, and 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-D-glucose) in the fruit of Terminalia chebula Retz. is described. The separation was achieved within 80 min using a binary gradient with mobile phases consisting of a pH 2.7 phosphoric acid solution and an 80% CH3CN solution. Capillary electrophoretic analyses were also attempted, and it was found that CZE (25 mM Na2B4O7, 5 mM NaH2PO4, pH 7.0) was an efficient method for the separation of gallotannins, while an MEKC method (25 mM Na2B4O7, 5 mM NaH2PO4, 20 mM SDS, pH 7.0, and 10% acetonitrile) provided a better separation for most of the tannins examined. The HPLC and CE methods developed were both successfully applied to the assay of tannins in commercial samples of Chebulae Fructus.     

胶束电动毛细管色谱法同时测定复方化学消毒剂及日化产品中邻苯二甲醛、对氯间二甲基苯酚及三氯生

建立了邻苯二甲醛(OPA)、对氯间二甲基苯酚(PCMX)和三氯生3种杀菌剂同时分离测定的胶束电动毛细管色谱(MEKC)新方法。详细研究了影响上述3种杀菌剂同时分离与准确定量的因素: 如分离缓冲溶液的浓度及pH,十二烷基硫酸钠(SDS)浓度、样品缓冲溶液等。以40.2 cm (有效长度: 30 cm)×50 μm未涂层熔融石英毛细管为分离柱,20 mmol/L硼砂-80 mmol/L SDS(无需调pH)为分离缓冲溶液,2 mmol/L硼砂-8 mmol/L SDS (含体积分数为10%甲醇)为样品缓冲溶液,检测波长为214 nm。3种杀菌剂的校正峰面积的相对标准偏差(RSD)在1.1%～ 3.8%范围内,迁移时间的RSD均小于0.9%, OPA、PCMX和三氯生的检出限(LOD,信噪比为3)分别为4.0、0.4、0.4 mg/L,定量限(LOQ,信噪比为10)分别为12、1.2、1.2 mg/L,校正峰面积与相应的质量浓度分别在12～2 000 mg/L、1.2～200 mg/L和1.2～200 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数分别为0.9994、0.9993和0.9995。该法前处理简单,可快速、准确地同时测定3种组分,非常适合常规实验室分析。     

胶束电动毛细管色谱法分析头孢哌酮与其S-异构体等杂质

以十二烷基硫酸钠(SDS)胶束为准固定相,考察了头孢哌酮、头孢哌酮S-异构体、头孢哌酮杂质A及其他未知杂质在胶束电动毛细管色谱(MECC)分离模式下的分离行为。研究了运行缓冲液的pH值、磷酸盐浓度、SDS浓度、甲醇体积分数、分离电压、分离温度等因素对头孢哌酮、S-异构体、头孢哌酮杂质A及其他杂质的迁移时间、分离度以及可分离出的杂质个数的影响。结果发现,这些因素对头孢哌酮与诸杂质间的分离及检测有显著的影响,尤以pH值为最。它不仅影响它们的迁移时间和分离效率,还直接影响头孢哌酮及其杂质峰的检测。优化后的分离条件:运行缓冲液为70 mmol/L磷酸盐-100 mmol/L SDS (pH 6.5),分离电压为15 kV,分离温度为25 ℃。在此条件下,用非涂渍石英毛细管51.0 cm×75 μm(有效长度42.5 cm),压力进样5 kPa×5 s,在254 nm波长下进行检测,可分离出28个杂质,诸杂质彼此间及与头孢哌酮间可得到有效分离。并将该方法成功地用于测定注射用头孢哌酮钠的含量和有关物质,结果令人满意。     

胶束在线扫集毛细管电泳法测定三聚氰胺

研究胶束在线扫集毛细管电泳法测定三聚氰胺的可行性,结果表明,与区带毛细管电泳相比,胶束在线扫集毛细管电泳法富集倍数提高约60倍。缓冲体系为140 mmol/L SDS+20 mmol/L NaH2PO4(pH 2.20)+10%(体积分数)甲醇,分离电压-18 kV,进样时间30 s,测量波长214 nm。考察了SDS浓度、pH、进样时间、运行电压等因素对分离测定的影响情况。在优化条件下,三聚氰胺在9 min时出峰,峰面积RSD≤3.7%。方法检出限、线性范围、相关系数分别为:0.13μg/mL、0.50~32.0μg/mL、0.9997。方法可用于奶粉中三聚氰胺的分离测定。