大孔吸附树脂分离纯化仙人掌中总黄酮的研究

考察了4种大孔吸附树脂对仙人掌总黄酮的吸附分离性能,筛选出效果最佳的树脂为AB-8。以总黄酮的吸附量、总黄酮含量和回收率为考察指标,采用紫外分光光度法测定总黄酮。确定了AB-8树脂吸附分离仙人掌总黄酮的工艺条件:上样浓度为15mg/mL,仙人掌总黄酮最大吸附量为18.6mg/mL,吸附流速为5mL/min,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为6倍柱体积,树脂可重复使用3次。经AB-8树脂分离纯化后,总黄酮含量从29%提高到76%,总黄酮回收率为86%。实验结果表明,AB-8树脂可用于仙人掌总黄酮的分离纯化。     

超声辅助浸提-紫外分光光度法测定酸枣中黄酮

建立超声辅助浸提法提取酸枣中黄酮的方法。以雅安碧峰峡野生酸枣为研究对象,通过单因素实验考察提取条件对黄酮提取率的影响,采用自由基清除(DPPH)法研究果皮粗黄酮提取物的抗氧化活性。在料液比为1∶30(g/m L),乙醇体积数为80%,浸泡时间为4 h,超声温度为80℃,超声时间为30 min时提取黄酮效果最好,果皮中黄酮含量为7.76%。果皮粗黄酮提取物对DPPH具有较好的抗氧化活性,其半数抑制浓度(IC50)为0.517 1 mg/mL。测定结果的相对标准偏差为0.54%(n=6),加标回收率在93.5%～100.6%之间。该方法具有较好的精密度与准确度,适用于酸枣中黄酮的提取。     

高效液相色谱法测定野葱中黄酮类化合物

建立了测定野葱中芦丁、黄酮醇类化合物的高效液相色谱方法。80%乙醇超声提取,高效液相色谱分析野葱中芦丁和黄酮醇类化合物的含量。芦丁检测条件:V(甲醇)∶V(0.2%磷酸水)=45∶55,检测波长:360nm;槲皮素、山奈酚、异鼠李素检测条件:V(甲醇)∶V(0.2%磷酸水)=40∶60,检测波长:360 nm。结果表明,野葱中芦丁含量0.22%,槲皮素、山奈酚、异鼠李素含量依次为0.42%、0、0.23%,总黄酮醇类化合物含量为1.63%。     

食用仙人掌中葡萄糖的测定方法

对食用仙人掌中葡萄糖的测定方法进行了研究,采用单因素和正交实验法测定食用仙人掌中葡萄糖含量,其最佳条件为:水解时加入盐酸20 mL,反应滴定温度60℃,反应液pH 5.0,水解时间30 min.该方法简便、可行.     

原子吸收法间接测定银杏黄酮

提出了间接测定银杏叶精提物中银杏黄酮的原子吸收光谱法。银杏黄酮与乙酸铅发生配合反应,生成难溶的棕黄色沉淀,经离心分离后,用原子吸收法测定上清液中过量的铅离子,可间接测定银杏黄酮。方法线性范围为5.0～30.0μg mL,RSD为1.6%～1.8%,回收率为100.3%～106.0%。     

固相萃取/液相色谱-质谱/质谱法测定山银花中5种主要黄酮苷元的含量

该文通过含有盐酸的乙醇溶液回流水解并提取,HLB固相萃取柱净化,液相色谱-质谱/质谱法检测,建立了山银花中槲皮素、木犀草素、山萘酚、芹菜素和黄芩素5种黄酮苷元含量的测定方法。实验以芦丁、木犀草苷、紫云英苷、野漆树苷和黄芩苷5种黄酮苷为代表开展研究,山银花样品经50%的乙醇溶液(含10%浓盐酸)回流2 h水解黄酮苷,同时对黄酮苷元进行提取,HLB固相萃取柱净化,采用Mightysil RP-18色谱柱分离,液相色谱-质谱/质谱法检测(电喷雾离子源、多反应监测模式、负离子扫描),外标法定量测定水解后的5种黄酮苷元含量。方法的定量下限(S/N=10)为0.005 g/kg(槲皮素),0.01 g/kg(木犀草素和芹菜素)和0.05 g/kg(山萘酚和黄芩素)。在0~1.0 g/kg范围内,5种黄酮苷元的线性相关系数均大于0.995;在山银花样品中对待测物进行3种加标水平的回收实验(加标水平相当于水解后槲皮素和木犀草素含量为:0.10、0.20、0.40 g/kg,山萘酚、芹菜素和黄芩素含量为:0.05、0.10、0.20 g/kg),方法的平均回收率70.4%~104%;相对标准偏差为4.0%~12%。该方法实现了山银花中多种主要黄酮苷元含量的同时测定,且对研究山银花药效及与黄酮类化合物的关系具有重要意义。     

ABTS自由基显色分光光度法测定酵素中的黄酮

2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)在酸性条件下产生绿色稳定存在的ABTS~+·,加入黄酮类物质后,ABTS~+·在415 nm处的吸收峰降低,在337 nm处吸收峰显著增加.对测定条件进行优化后,建立了测定黄酮的工作曲线,对酵素样品中的黄酮进行测定.研究表明酵素中的黄酮类物质含量与337 nm处吸光度的增加量呈正比.当黄酮质量浓度(用芦丁表示)在0～2.00 mg/L范围内线性关系良好(R~2=0.999 98),最低检测限为0.04 mg/L.精密度、重复性试验结果的相对标准偏差(RSD)均低于2%,平均加标回收率为98.2%,RSD值为1.10%.研究表明该方法可靠、准确、重现性好,可快速测定酵素中的黄酮类含量.     

分光光度测定总黄酮法的适用性

为建立测定天南星总黄酮含量的方法,通过比较黄酮及苷、黄酮醇及3位苷共12个化合物的NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法和AlCl3-KAc法的紫外和可见光谱,分析了分光光度测定总黄酮法的适用性.结果显示,与相应方法的有关原理相矛盾,尤其是芹菜素及苷在两方法中均未有相应现象产生.为此,进行了新方法研究,比较了各黄酮在三乙胺介质中的紫外可见光谱,结果显示, 黄酮及苷和3-黄酮醇苷最大吸收均红移;将三乙胺法应用于天南星,方法验证结果符合含量测定要求,对照品夏佛托苷在1.54～21.5 mg/L范围内与吸光度有良好线性关系(r=0.9997),平均回收率为99.3%(RSD=1.1%, n=9).方法重现性好,可操作性强.适用性研究表明, 3种方法均只适用于部分黄酮类成分分析.     

H2O2-Luminol流动注射-抑制化学发光法测定银杏黄酮

基于在碱性条件下,银杏黄酮对H2O2 Luminol体系有显著的抑制作用,结合反相流动注射技术,首次建立了流动注射 抑制化学发光测定银杏提取物中的银杏黄酮。银杏黄酮质量浓度在0.2～20.0μg mL范围与相对发光强度呈线性关系,检出限为0.1μg mL,采样频率为140次 h,对10.0μg mL的银杏黄酮平行测定11次,其RSD为1.5%,回收率为100.0%～100.2%。该方法可用于银杏黄酮制剂的测定。     

ClO--鲁米诺流动注射-抑制化学发光法测定银杏黄酮

基于在碱性条件下,银杏黄酮对ClO--鲁米诺体系有显著的抑制作用,结合反相流动注射技术,建立了流动注射-抑制化学发光测定银杏提取物中的银杏黄酮.银杏黄酮质量浓度在0.4～14.0 μg/mL范围与相对发光强度呈线性关系,检出限为0.06 μg/mL,采样频率为120次/h,对10.0 μg/mL的银杏黄酮平行测定11次,其RSD为1.2%,回收率为98.0%～104%.该方法可用于银杏黄酮制剂的测定.