基于适配体识别-可视化检测棒曲霉毒素的方法

棒曲霉毒素是由青霉属、曲霉属、丝衣霉属产生的真菌代谢毒素,对人体有一系列急性毒性和致畸致癌等慢性毒性.本文以新筛选的棒曲霉毒素特异性适配体为分子识别元件,利用纳米金的变色效应,构建了一种基于适配体识别-可视化检测棒曲霉毒素的方法.在优化的检测条件下,棒曲霉毒素浓度与A_(650)/A_(521)的比值具有良好的线性关系,其回归方程为y=0.3021x+0.0713(R~2=0.9910),线性范围为0.1~10 ng/m L,最低检测限为0.1 ng/m L.将本方法用于苹果汁样品的加标回收,加标回收率为95.87%~106.20%,证明本方法可用于实际样品的检测.     

Ce(Ⅳ)-罗丹明6G化学发光体系与毛细管电泳联用同时测定氯丙嗪和异丙嗪

提出了一种毛细管电泳化学发光联用技术同时测定氯丙嗪和异丙嗪。在酸性条件下,氯丙嗪和异丙嗪能被Ce(Ⅳ)氧化,然后将能量转移给荧光发射体-罗丹明6G,并以化学发光形式释放能量。基于此,结合流动注射技术,以10 mmol/L KH2PO4/H3PO4(pH3.5)为运行缓冲液,实现了两种药物的分离。方法的线性范围分别为4.0×10-8~2.0×10-6g/mL和2.0×10-8~2.0×10-6g/mL,检出限分别为5.6 ng/mL和3.4 ng/mL,对2.0×10-6g/mL异丙嗪平行测定了9次,相对标准偏差为2.8%。方法可用于同时测定人血清中的氯丙嗪和异丙嗪。     

毛细管电泳-化学发光法测定人血清中的异烟肼

基于碱性介质中异烟肼对laminol-K3Fe(CN)6化学发光体系的增敏作用,设计了一个经毛细管电泳(CE)分离,在线化学发光检测异烟肼的新方法.研究并优化了毛细管电泳分离及化学发光检测的条件.在优化的实验条件下,该方法测定异烟肼的线性范围为4.0×10-7～1.0×10-5g/mL(R2=0.9984),检出限(3σ)为1×10-8g/mL,对6.0×10-6g/mL的异烟肼进行6次平行测定,其相对标准偏差为4.0%.方法已用于血清中异烟肼的测定.     

OT-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系

本文首次提出了邻联甲苯胺(OT)-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系。本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H2O2氧化OT的产物, 用于游离HRP和各种HRP标记物测定, 灵敏度比经典的ELISA光度法分别高两个至四个数量级。测定游离HRP的检测限达到1.8×10^-^1^2 g/mL, 线性范围为5.0×10^-^1^2-1.0×10^-^8 g/mL。对此伏安酶联免疫分析新体系的偶合反应机理及电极还原过程也进行了详细的研究。     

改进通过式固相萃取柱-超高效液相色谱-串联质谱法测定谷物及制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及衍生物的含量北大核心CSCD

开发、设计一种改进通过式固相萃取柱,用于谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其4种衍生物的前处理。称取固体样品2.00 g(液体样品5.00 g),加入400μL 1.0 mg·L^(-1)内标混合溶液,振荡混匀,静置30 min,再加入20.0 mL 84%(体积分数)乙腈溶液(液体样品加入15.0 mL乙腈),涡旋振荡20 min,离心5 min。移取约8 mL上清液,用改进通过式固相萃取柱[填料为160 mg C_(18)、300 mg石墨化碳黑、100 mg氨丙基净化剂(NH_(2))和300 mg硅藻土的混合物]处理,取5.0 mL滤液,于40℃氮吹至干后,加入1.0 mL水,超声30 s,涡旋30 s,过0.22μm微孔滤膜。采用超高效液相色谱-串联质谱法测定其中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其4种衍生物的含量,内标法定量。结果表明:经改进通过式固相萃取柱处理后,样品溶液澄清透明,并且5种目标物的基质效应减少;5种目标物标准曲线的线性范围为10~2 000μg·L^(-1),检出限为(3S/N)为5.0μg·kg^(-1);对小麦粉、大米、玉米、啤酒、白酒等基质进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为74.6%~106%,测定值的相对标准偏差(n=6)均不大于9.1%;方法用于162份样品分析,小麦粉、玉米、大米、啤酒中均检出脱氧雪腐镰刀菌烯醇,衍生物中仅检出3-乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇和雪腐镰刀菌烯醇。     

填充柱气相色谱法快速测定发酵废水提取物中丙/乙酸含量

建立了一种快速测定发酵废水及其提取物中丙/乙酸含量的气相色谱方法.采用GC9790气相色谱仪,不锈钢填充柱,FID检测器,外标法定量,色谱条件为:载气(氮气) 55 mL/min,氢气30 mL/min,空气300 mL/min,柱箱温度140 ℃,汽化室温度170 ℃,检测器温度200 ℃,进样量1 μL.丙酸保留时间4.86 min,标准曲线ρ=6.487×10-6A-8.718×10-2,线性相关系数r=0.9990,精密度RSD=2.5%,回收率92.7%～107.2%,检测限4.4×10-3 g/L.乙酸保留时间3.49 min,标准曲线ρ=1.118×10-5A+4.042×10-2,线性相关系数r=0.9997,RSD=2.1%,回收率95.3%～106.3%,检出限7.6×10-3 g/L.此方法为从发酵废水中提取丙/乙酸和发酵控制研究提供了检测手段.     

气相色谱-质谱法测定药用丁基橡胶塞中18种多环芳烃的含量

建立了气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术测定药用丁基橡胶塞中18种多环芳烃(PAHs)。用正己烷-丙酮(体积比1∶1)对样品进行超声极限浸提,浸提液经固相萃取柱净化后,用DB-EUPAH柱(60 m×0.25 mm×0.25μm)分离,质谱以选择离子监测(SIM)模式检测,内标法定量。对浸提溶剂、浸提比例和极限浸提进行考察后,在优化条件下,PAHs的峰面积与质量浓度在低浓度范围1～10 ng/mL和高浓度范围10～200 ng/mL均呈现良好的线性关系,线性相关系数r均大于0.9992。方法检出限(LOD)为0.2～10 ng/g,定量限(LOQ)为1～10 ng/g。在1、10和100 ng/g加标水平下的平均回收率为76.63%～113.93%,相对标准偏差(RSD,n=3)为0.11%～6.86%。该方法灵敏度高、准确性好,适用于药用丁基橡胶塞中18种PAHs含量的同时测定。     

杂交链式反应介导赭曲霉毒素A的比色/荧光双模检测

以赭曲霉毒素A(OTA)为目标物,以二氧化硅纳米颗粒作为载体,负载赭曲霉毒素适配体和HCR引发链(cDNA)杂交的DNA双链,构建了一种比色/荧光双模信号输出的高灵敏检测平台。在最优条件下,荧光信号回归方程为ΔF=1033.78lgc+13652.89,检出限为6.11×10^-14 g/mL;比色信号回归方程为A=0.02587lgc+0.7537,检出限为1.33×10^-13 g/mL。该方法成功应用于实际样品中OTA的检测,为食品安全监测提供了一种新策略。     

基于Strecker反应的含氰基多取代吡唑的合成及生物活性研究

为探索多取代吡唑胺的Strecker反应及含氰基吡唑化合物的生物活性,首次实现了ZnI2催化下多取代吡唑胺、三甲基硅腈(TMSCN)和醛的Strecker反应,初步探索了反应条件及醛底物的范围.共获得20个全新含氰基多取代吡唑目标物,最高收率为93.5%,并通过核磁共振氢谱(~1H NMR)、碳谱(~(13)C NMR)和高分辨质谱(HRMS)确证了其结构.活性测试表明, 10×10~(-3)g/L浓度下,13个化合物对蚊幼虫活性为100%,5×10~(-3)g/L浓度下4个化合物活性高于40%;在500×10~(-3) g/L浓度下10个化合物对黏虫体现一定活性.在500×10~(-3) g/L浓度下5个化合物对烟草花叶病毒具有一定钝化活性,最高活性为31.8%, 4个化合物则具有保护活性,最高活性为28.3%.在50×10~(-3) mg/mL浓度下, 3个化合物对瓜果腐霉菌、芦笋茎枯菌、辣椒疫霉菌、水稻纹枯菌等显示一定抑制活性,其中4-[(1-氰基十二烷基)氨基]-5-乙基-N-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(3t)对辣椒疫霉活性达62.3%.这表明氨基邻位具有大位阻基团的吡唑胺底物能顺利发生Strecker反应,含氰基吡唑类目标物显示多样的生物活性,具有一定的研究价值.     

流动注射-化学发光法测定非洛地平

基于非洛地平在碱性条件下对鲁米诺-K3Fe(CN)6化学发光体系具有很强的增敏作用,结合流动注射技术,建立了直接测定非洛地平的流动注射-化学发光新方法.方法的线性范围为6.0×10(-9)～3.0×10(-6)g/mL,检出限为2.1×10(-9)g/mL,对浓度为1.0×10(-7)g/mL非洛地平平行测定11次,其...     

电化学发光法测定人尿中的磷酸苯丙哌林

基于磷酸苯丙哌林对联吡啶钌(Ru(bpy)32 )的电化学发光信号有较强的增敏作用,建立了一种检测磷酸苯丙哌林的电化学发光方法,并且应用于人尿中磷酸苯丙哌林的测定。结果表明,在0.02 mol/L Na2CO3-NaHCO3介质中,以方波为电解方式,联吡啶钌的质量浓度为1.0×10-5g/mL时,磷酸苯丙哌林对联吡啶钌电化学发光信号的增敏效果最好。在此条件下,测定磷酸苯丙哌林的线性范围为10~600 ng/mL,检出限为7.2 ng/mL,相对标准偏差RSD为1.6%(n=11,ρ=300 ng/mL)。     

喷射式电化学发光猝灭法快速测定莱克多巴胺

基于莱克多巴胺对Ru(bpy)2+3/N-丁基二乙醇胺电化学发光体系的强烈猝灭效应,结合喷射式分析技术,建立了一种能够快速、灵敏地用于检测莱克多巴胺残留的新方法。在优化后的实验条件下,体系的相对发光强度与莱克多巴胺的浓度在1.0×10-9~1.0×10-5 g/mL范围内呈良好的线性关系,检测限(S/N=3)为5.0×10-10 g/mL。对含1.0×10-8 g/mL莱克多巴胺的发光体系进行11次重复测定,所得相对标准偏差为1.23%。该方法可用于猪尿中莱克多巴胺残留的测定。     

萃取色层分离同位素稀释ICP-MS测定空气中费克 量钚

ICP-MS测定环境样品中超痕量^2^3^9Pu时,^2^3^8UH^+会对m/z239的测量带来干扰。测得UH^+的产生几率为4.6×10^-^5,通过三正辛胺色层分离后,对铀的去除率为10^4,可以有效地去除^2^3^8UH^+离子峰对^2^3^9Pu测定的干扰。钚的回收率为75%。同位素稀释法对^2^3^9Pu的检出限为4.5×10^-^1^5g/mL,方法的定量测定限为16×10^-^1^5g/mL。用所建立的方法测得我国某地区空气中^2^3^9Pu的浓度为4.8×10^-^1^7g/m^3。     

纳米金催化鲁米诺化学发光体系测定甲巯咪唑

在碱性介质中,甲巯咪唑能强烈增敏纳米金-鲁米诺-硝酸银化学发光体系产生较强的化学发光信号,据此建立了一种流动注射化学发光测定甲巯咪唑的新方法。在优化实验条件下,该方法对甲巯咪唑的检测线性范围为1.0×10-9~1.0×10-8、1.0×10-8~1.0×10-7、1.0×10-7~1.0×10-6g/mL,检出限(S/N=3)为3.0×10-10g/mL,相对标准偏差为1.2%(n=11,ρ=1.0×10-8g/mL)。将该法用于药物中甲巯咪唑含量的测定,结果满意。同时,采用化学发光光谱表征技术对该体系的化学发光反应机理进行了初步探讨。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测麦粒中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物

建立了同时检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-AcDON)、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-AcDON)、雪腐镰刀菌烯醇(NIV)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇-3-葡萄糖苷(D3G) 5种毒素的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的方法。通过质谱特征扫描,各化合物均获得较高离子化效应离子对,在电喷雾电离(ESI)模式下正、负离子同时扫描,外标法定量;样品采用WondaSep石墨化碳-氨基柱净化,以乙腈-水(含有5 mmol/L乙酸铵和0. 01%氨水)为流动相梯度洗脱,在6. 25～400μg/L浓度范围内,5种毒素的相关系数(r~2)均大于0. 998,检出限(S/N=3)为2. 06～13. 33μg/L。在16,125,250μg/L 3个水平下加标回收率为68. 0%～105. 7%,相对标准偏差为2. 0%～13. 5%。方法可用于麦粒中5种镰刀菌毒素的同时分析。     

基质固相分散萃取-高效液相色谱法检测鸡组织中均三嗪类药物残留

本研究建立了基于基质固相分散萃取(MSPD)-高效液相色谱紫外检测法(HPLC/UVD)的同步检测鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的快速、高效和经济的新方法。正交试验优化后的基质固相分散萃取的最佳条件如下,预混有地克珠利和妥曲珠利混合标准溶液的0.5g鸡组织匀浆在研钵中与2gCl8填料研匀,静置2~5min后装萃取柱;萃取柱自底层到上层依次装入玻璃棉、1.5g无水Na2SO4、样品混合物、0.5g无水Na2SO4;压紧后依次用8mL正己烷、8mL甲醇水溶液(1∶4,V/V)淋洗,8mL甲醇洗脱,收集洗脱液,50℃旋转蒸发,0.5mL流动相溶解,过0.22μm滤膜后进样检测。最佳色谱条件为C18分析柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm);流动相:0.05mol/LH3PO4-三乙胺(pH3.0)-乙腈(40 60);流速:1.0mL/min;检测波长:240nm,AUFS=0.05;进样体积:20μL;柱温:20℃。该检测方法的定量线性范围为50~1000μg/L。在50、500和1000ng/g的添加水平,地克珠利和妥曲珠利从鸡组织中的回收率范围为71.1%~84.0%,相对标准偏差的范围为3.8%~12.1%;同时方法的日内和日间相对标准偏差范围为3.70%~6.77%。地克珠利的检出限为8ng/g(肌肉)和10ng/g(肝、肾),妥曲珠利的检出限为7ng/g(肌肉)和10ng/g(肝、肾);地克珠利的定量限为12ng/g(肌肉)和15ng/g(肝、肾),妥曲珠利的定量限为10ng/g(肌肉)和15ng/g(肝、肾)。     

基于CdS:Mn敏化TiO_2纳米管的光电化学传感器用于硫酸盐还原菌的检测

本文以钛片为原料,采用阳极氧化法制备二氧化钛纳米管(TiO_2-NTs)材料,以壳聚糖(CS)作为交联剂,通过连续离子层吸附与反应(SILAR)法制备了TiO_2-NTs/CdS∶Mn光电化学(PEC)传感器,用于检测硫酸盐还原菌(SRB)。传感器中的Cd~(2+)和Mn~(2+)与SRB的代谢产物H_2S结合产生的CdS∶Mn纳米晶掺杂结构,有效降低了电子-空穴复合率,导致光电流明显增强,可实现对SRB的实时检测。在1.0×10~2～1.0×10~8 CFU/mL范围内,SRB浓度的对数与传感器检测的电流值呈良好的线性关系,检出限为28 CFU/mL。该传感器为SRB的快速检测提供新策略。     

偶合反应化学发光法测定过氧化苯甲酰

基于过氧化苯甲酰可以氧化K4Fe(CN)6生成K3Fe(CN)6,生成的K3Fe(CN)6在碱性溶液氧化鲁米诺可产生强的化学发光的特性,建立了测定过氧化苯甲酰的偶合反应化学发光新方法.该方法测定过氧化苯甲酰的线性范围为1.0×10-8～4.0×10-6 g/mL, 检出限为5×10-9 g/mL,相对标准偏差为3.0% (1.0×10-7 g/mL过氧化苯甲酰溶液,n=11).该方法已用于市售面粉中过氧化苯甲酰的测定.     

OAP-H~2O~2-HRP伏安酶联免疫分析新体系测定人血清铁蛋白

首次提出邻氨基酚(OAP)-H~2O~2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系并用于人血清中铁蛋白的测定.本方法以线性扫描二阶导数伏安法栓测HRP催化H~2O~2氧化OAP的产物,用于游离HRP和各种HRP标记物的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.测定游HPR的线性范围为1.0x10^-^1^2-4.0x10^-^9g/mL,检测限达6.0x10^-^1^3g/mL.本法对铁蛋白测定的线性范围为0.2-320ng/mL,用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA显色光度法进行对照,二者相关性很好.对此伏安酶联免疫分析新体系的电极还原过程也进行了详细的研究.     

Ru(bpy)_3~(2+)体系电化学发光法测定盐酸左氧氟沙星

基于盐酸左氧氟沙星对联吡啶钌(Ru(bpy)2+3)的电化学发光信号有较强的增敏作用,建立了一种检测盐酸左氧氟沙星的电化学发光分析新方法。结果表明,在0.1mol/L NaHPO4-KH2PO4介质中,以恒电位电解,Ru(bpy)2+3的浓度为1.0×10-5g/mL时,盐酸左氧氟沙星对Ru(bpy)2+3电化学发光信号的增敏效果最好。在此条件下,测定盐酸左氧氟沙星的线性范围为6~400×10-9g/mL,检出限为5.0×10-9g/mL,对8.0×10-9 g/mL盐酸左氟沙星平行测次11次,相对标准偏差(RSD)为1.9%。该方法已应用于人体尿样中盐酸左氧氟沙星的测定,并且用此方法对盐酸左氧氟沙星的国产及进口片剂进行了体外溶出度的测定。