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微柱高效液相色谱-质谱/质谱快速鉴定混合蛋白质新方法 总被引:7,自引:0,他引:7
发展了一种混合蛋白质快速鉴定的新方法.将几种蛋白质的混合物于热变性后直接在溶液中酶解,利用微柱高效液相色谱-离子阱串级质谱进行肽谱/氨基酸序列分析,并结合Mascot数据库搜索处理功能,实现了混合蛋白质快速准确的鉴定. 相似文献
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沉积物中痕量多环芳烃湿法与干法提取的比较研究 总被引:2,自引:1,他引:1
以美国环保局(EPA)优先控制的16种多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)为研究对象,建立了湿法超声波辅助萃取技术提取沉积物中痕量PAHs的可靠方法,对萃取剂、萃取功率、萃取次数和萃取时间进行了优化.并与传统干法超声辅助萃取进行了比较,湿法超声波辅助萃取的PAHs回收率为57% ~125%,而干法超声波辅助萃取PAHs的回收率为48% ~113%,对相对分子质量小的PAHs如萘~芴的回收率,湿法明显高于干法.该文建立的湿法超声辅助萃取适用于沉积物和泥土中痕量PAHs的快速测定. 相似文献
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建立了超声微波酶解协同提取油茶壳中原花青素的方法。通过单因素试验,探讨了超声微波协同提取油茶壳中原花青素过程中各主要因素对原花青素提取率的影响规律。实验中发现,往提取液中加入适量纤维素酶,可显著提高原花青素的提取率。在此基础上,通过正交试验,优化并获得了超声微波酶解协同提取原花青素的最适宜条件。最适宜提取条件为:超声波频率40 KHz、微波功率200 W、提取时间60 s、料液比1∶6、提取温度50℃、0.1%纤维素酶0.5 mL、提取次数2次。在最适宜条件下,原花青素的提取率为4.46%,分别是超声提取、微波提取和超声-微波协同提取的4.0、3.3和1.8倍。本文所建立的超声微波酶解协同提取油茶壳中原花青素的方法具有简便、快速、高效和节能等优势,有利于应用推广。 相似文献
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提出了一种一步提取4种重金属离子的新方法。基于双频超声辅助酶解技术,高强度的超声探头、超声波水浴控温技术与组合酶相结合,可从生菜中高效同步提取4种重金属离子。实验结果表明,纤维素酶和风味蛋白酶的组合酶更有利于重金属离子的提取。双频超声模式下,630 W功率和50℃水浴温度显著提高了生物分子的酶解率,只需15 min即可同时从生菜中提取出As3+, Cd2+, Hg2+, Pb2+等4种重金属离子,且回收率达98.3%~106.0%,相对标准偏差小于6%。双频超声辅助酶解与生物传感检测技术相结合,可实现生菜中4种重金属离子的同时提取和检测。 相似文献
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利用响应面分析法对超声波辅助提取银杏叶多酚的工艺进行优化研究。在单因素试验的基础上,选取甲醇体积分数、超声波功率、超声温度、超声时间作为考察因素,应用Box-Behnken中心组合设计,以银杏叶多酚得率为响应值,进行响应面分析。另外对银杏叶多酚抑制脲酶活性进行了研究。结果表明,超声波辅助提取银杏叶多酚的最优提取条件为:甲醇体积分数67%、超声波功率350W、超声温度61℃、超声时间30min。在此工艺条件下,银杏叶多酚的得率为6.34%。当银杏叶多酚含量为46.11mg·mL-1时,银杏叶多酚对土壤脲酶活性的抑制率可达50%。因此,银杏叶多酚是一种较好的土壤脲酶抑制剂,可以用于提高尿素的利用率。 相似文献
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利用原子转移自由基聚合法制备了鳞片状聚合物修饰的硅胶填料,将其作为一种新型的固定化酶载体,实现了蛋白酶的高密度固定,从而明显缩短了复杂蛋白质样品的酶解时间。使用标准蛋白质对固定化酶的酶解效率进行了考察,结果表明: 鳞片状聚合物修饰的新型固定化酶硅胶填料具有较高的酶解效率,酶解标准蛋白质1 min后,鉴定到肽段的氨基酸序列覆盖率可达95%以上。将该固定化酶硅胶填料成功应用于大肠杆菌全蛋白质的酶解,从2 min酶解肽段的混合物中鉴定到的蛋白质数量超过同样条件下溶液酶解12 h的结果。另外,该固定化酶硅胶填料可以重复使用,其酶解效率具有良好的稳定性和重现性;该固定化酶具有较好的样品回收率,因而可以应用于蛋白质组学研究中。 相似文献