MicroRNA-143对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨microRNA-143（miR-143）对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭、迁移和增殖的影响。方法在脂质体介导下将miR-143抑制剂（miR-143 inhibitors）转染入MCF-7细胞，以inhibitor negative control（inhibitor NC）作为阴性对照。通过MTS试剂盒检测细胞增殖能力，以Transwel 侵袭实验和迁移实验分别检测细胞侵袭能力和迁移能力。结果（1）miR-143 inhibitors组与inhibitor NC组间细胞增殖活性无明显差异（P＞0.05）；（2）Transwel 侵袭及迁移实验显示转染miR-143 inhibitors后，MCF-7细胞的侵袭及迁移能力均明显增强（P＜0.05）。结论 miR-143对人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭及迁移能力存在负性调控作用，可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

miR-99a对乳腺癌细胞侵袭和迁移的负向调控机制研究

目的探讨miR-99a对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响,并初步分析其影响乳腺癌细胞侵袭及迁移的可能分子机制。方法利用荧光实时定量PCR检测乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中miR-99a的表达。运用脂质体介导的转染方法分别将miR-99a模拟物（miR-99amimics）、miR-99a抑制物（miR-99ainhibitors）以及相应对照miRNA转染MDA-MB-231和MCF-7细胞,通过Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭力;采用Transwell迁移实验及划痕实验检测细胞的迁移能力;利用生物信息学方法预测miR-99a的靶基因,并对靶基因进行验证。结果（1）高转移潜能的MDA-MB-231细胞中miR-99a表达明显低于低转移潜能的MCF-7细胞,划痕实验中转染miR-99amimics的与转染controlmimics的MDA-MB-231细胞比较迁移能力显著减弱（P＜0.05）,而MCF-7细胞转染miR-99ainhibitors后迁移能力明显增强（P＜0.01）。（2）Transwell的侵袭及迁移实验显示,转染miR-99amimics后MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力明显减弱（P＜0.01）;MCF-7细胞转染miR-99ainhibitors后迁移能力增强（P＜0.01）,而侵袭能力基本不变（P＞0.05）。（3）生物信息学方法预测微管相关蛋白（MTMR3）是miR-99a的靶点,实时定量PCR和3′UTR荧光素酶报告基因实验验证了该靶点。（4）干扰了MTMR3后MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力明显减弱。结论（1）miR-99a对乳腺癌细胞的侵袭及迁移发挥负向调控作用。（2）miR-99a可能通过靶向于MTMR3发挥其对乳腺癌细胞迁移和侵袭的调控作用。     

食管鳞癌组织中miR-129与患者预后的关系分析

目的研究miR-129在食管鳞癌组织与癌旁组织中的表达差异及其与肿瘤大小、淋巴结转移、分期、分化程度及患者无病生存期的关系.方法提取106例患者食管鳞癌组织和癌旁组织标本中的总RNA,应用real-time PCR检测两者miR-129的表达差异.结果106例食管鳞癌标本中,有36例(33.9%)出现了不同程度的miR-129表达上调,另有58例(54.7%)出现了miR-129的表达下调.男性、有饮酒史的患者癌组织中miR-129表达水平明显高于女性、不饮酒者(P<0.05),miR-129相对表达的升高与淋巴结转移、肿瘤分期、分化程度均存在相关性(均P<0.05).miR-129表达升高的患者无病生存期较表达不高的患者缩短(P<0.01),miR-129相对表达水平、肿瘤分化程度和性别是影响食管鳞癌患者生存的因素(P<0.05).结论 miR-129可能参与了食管鳞癌进展,miR-129表达的升高可能提示食管鳞癌患者的不良预后.     

miRNAs在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理意义

目的：探讨甲状腺乳头状癌（PTC）中特征性的miRNA表达谱以及临床病理意义。方法对52例PTC及7例良性甲状腺肿瘤手术切除标本采用基因芯片技术及RNA印迹杂交法检测miRNA的表达,对过表达的miRNA表达水平与PTC临床病理特征之间的关系进行分析。结果（1）用基因芯片技术筛检发现 PTC 组织中5例过表达的 miRNAs（miR-375、miR-34a、miR-146b、miR-222、miR-31）。（2）RNA印迹杂交法验证芯片结果及检测其他miRNAs结果显示：miR-34a、miR-146b、miR-31、miR-21和miR-221在PTC组织中的表达水平较癌旁正常甲状腺组织显著升高（P＜0.05）。MiR-146b和miR-221在PTC组织中的过表达率较良性甲状腺肿瘤组织显著升高（P＜0.01）。PTC患者中包膜侵犯组、淋巴结转移组、TNM分期III- IV期组及AGES系统评分≥5分组miR-221的表达水平均明显高于相应对照组（P＜0.05或0.01）;而男性PTC患者的miR-146b表达水平明显高于女性PTC患者（P＜0.05）。结论 miR-146b、miR-221、miR-21和miR-31的过表达与PTC的发生、发展有关;过表达的miR-221和miR-146b与PTC的预后不良有关。     

miR-130a和miR-125b在川崎病外周血细胞中的表达及意义

目的 通过检测miR-130a 和miR-125b 在伴或不伴冠脉扩张（CAD）川崎病（KD）患儿与正常健康儿童外周血单核细胞（PBMC）中的表达差异,探讨两者可否作为KD 和CAD诊断及预后评估的全新血清生物标志物。方法 利用基因芯片技术筛选出KD 患儿与正常健康儿童之前具有差异表达的miRNAs,通过生物信息学分析,确定候选基因。进一步选取KD 患儿30 例（伴或不伴CAD 各15 例）、正常健康儿童15 例,采用茎环RT-PCR 的方法,验证候选基因miR-130a 和miR-125b 在PBMC 中的表达情况。结果 （1）通过基因芯片技术,分析KD 患儿与正常健康儿童PBMC 中存在明显差异表达的miRNA 共63 条,经过生物信息学分析,确定候选基因;（2）通过茎环RT-PCR 验证发现miR-130a 和miR-125b 在患儿IVIG 治疗前表达明显下调,而IVIG治疗后表达明显上调（P＜0.05）;（3）伴CAD 的KD 患儿miR-130a 及miR-125b 表达较不伴CAD 明显升高,且呈正相关性（R2 =0.734,mir-130a;R2 =0.709,miR-125b）;（4）ROC 曲线分析表明miR-130a（特异度87.5%和敏感度77.5%）和miR-125b（特异度83.3%和敏感度76.6%）对KD 及CAD 的判断有较高的特异度和敏感度。结论 PBMC 中的miR-130a 和miR-125b 参与了KD的发生与发展,可作为KD 及CAD诊断及预后评估的一项全新血清生物标志物,并为KD冠脉扩张的防治提供新的思路。     

早期肠内营养在胃癌根治术后的应用分析

目的 探讨术后早期肠内营养（EN）在胃癌患者中应用的安全性和可行性。方法 将78 例接受胃癌根治术的患者 随机分为两组,其中EN 组40 例,全肠外营养（TPN）组38例。比较两组患者营养状况变化、肠功能恢复情况、术后并发症发生情况、营养费用和住院时间等。结果 术后第7天,EN 组患者总淋巴细胞计数（TLC）为（1.74±0.25）×109/L,明显高于TPN 组的TLC（1.59±0.28）×109/L（P＜0.05）,其他营养指标两组间比较均无统计学差异（均P＞0.05）;EN 组患者肠功能恢复较TPN 组快,营养费用和住院时间较TPN 组少,均有统计学差异（均P＜0.05）;EN 组与TPN 组术后并发症的发生率分别为12.50%和18.42%,比较无统计学差异（P＞0.05）。结论 术后早期EN 可促进肠道功能的恢复,有效改善患者营养状态,降低住院费用。     

肛周脓肿局部组织及外周血中IL-22 的表达及临床意义

目的 探讨细胞因子IL-22 在肛周脓肿局部组织及外周血中的表达和意义。方法 选取50例肛周脓肿患者（肛周 脓肿组）和50例无感染的混合痔患者（对照组）,两组患者均行手术治疗,并术中留取病变组织标本。术后观察患者转归,免疫组织化学法检测IL-22 表达、RT-PCR 法检测外周血单核细胞中IL-22 mRNA 的表达,观察IL-22 表达的变化及其与患者临床病理特征之间的关系。结果 IL-22在肛周脓肿组的表达阳性率高于对照组（P＜0.01）;肛周脓肿组根据不同转归分为治愈组、脓肿复发组、肛痿组,3 组患者IL-22 表达阳性率比较,治愈组显著降低,而肛瘘组最高（P＜0.01）。肛周脓肿组外周血单核细胞中IL-22 mRNA表达水平显著高于对照组（P＜0.01）;在肛周脓肿组中随着疾病的进展,肛瘘组患者外周血单核细胞中IL-22 mRNA表达水平显著高于治愈组（P＜0.01）。肛周脓肿组中IL-22的表达与患者性别、年龄均无关（均P ＞0.05）,而与脓肿直径（P＜0.01）、创面愈合时间（P＜0.05） 及进展为肛瘘有关（P＜0.05）。结论 IL-22在肛周脓肿局部组织及外周血中表达增强,在其发病机制中起了重要作用。     

宫颈癌中EGFR蛋白表达及其临床病理意义

目的探讨表皮生长因子受体1（EGFR）蛋白表达在宫颈癌发生、发展中的临床病理意义。方法采用免疫组化EnVision法检测120例宫颈癌组织、49例高级别上皮内瘤变（CIN2~3）、40例低级别上皮内瘤变（CIN1）、37例正常宫颈组织中EGFR蛋白的表达,并进行比较分析。结果（1）正常宫颈、CIN1、CIN2~3、宫颈癌组织中EGFR蛋白表达阳性率分别为10.8%（4/37）、12.5%（5/40）、42.9%（21/49）、89.2%（107/120）。宫颈癌组织中EGFR蛋白表达阳性率显著高于CIN2~3、CIN1及正常宫颈组织（均P＜0.01）;EGFR蛋白在CIN2~3中表达显著高于CIN1和正常宫颈组织（均P＜0.01）;CIN1和正常宫颈组织之间EGFR蛋白表达阳性率无统计学差异（P＞0.05）。（2）肿瘤浸润深度更深的宫颈癌患者宫颈癌组织中EGFR蛋白表达阳性率高于浸润深度较浅的患者（P＜0.01）。结论EGFR在宫颈癌进展过程中起了重要作用,有望成为抗宫颈癌治疗的一个潜在生物学标志。     

VEGF、EGFR 及Parkin 蛋白在 鼻咽癌中的表达及三者间的相关性研究

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子受体（EGFR）及Parkin 蛋白在鼻咽癌（NPC）中的表达情况以 及三者间的相关性。方法 应用免疫组化SP 法检测48 例NPC 组织和34例正常鼻咽部上皮组织中VEGF、EGFR 及Parkin蛋白的表达,并探讨三者间的相关性。结果 NPC组织中VEGF和EGFR蛋白表达阳性率明显高于正常鼻咽部上皮组织,Parkin蛋白表达阳性率则明显下降,且均有统计学差异（均P＜0.05）。NPC组织中VEGF蛋白表达与NPC患者有无淋巴结转移及临床TNM 分期密切相关（均P＜0.05）,而与患者的年龄、性别、病理类型、T 分期均无关（均P ＞0.05）;EGFR 和Parkin 蛋白表达与NPC 患者有无淋巴结转移密切相关（均P＜0.05）,而与患者的年龄、性别、病理类型、T分期、临床TNM分期均无关（均P ＞0.05）。NPC组织中VEGF和EGFR 蛋白的表达呈正相关（P＜0.05）,Parkin和VEGF、EGFR蛋白的表达无相关性（均P＞0.05）。结论 VEGF、EGFR 及Parkin 蛋白与NPC发生、发展有关,VEGF、EGFR 及Parkin蛋白表达可作为NPC 的预后判断指标,NPC 中VEGF 和EGFR可能起协同作用,而Parkin 则可能单独发挥作用。     

CXCR4、VEGF-C 和MMP-9在胃癌淋巴结转移中的作用及意义

目的 探讨趋化性细胞受体因子4（CXCR4）、血管内皮生长因子-C（VEGF-C）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在 胃癌淋巴结转移中的作用及意义。方法 应用免疫组化法检测76例人胃癌组织中CXCR4、VEGF-C 和MMP-9 的表达水平,并分析其与胃癌淋巴结转移的关系。结果 CXCR4、VEGF-C 或MMP-9 任一指标表达水平与胃癌淋巴结转移均有显著关系（均P＜0.01）,且这3 项指标两两相关,CXCR4/VEGF-C 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为84.8%（28/33）,高于仅1 项指标阳性表达（11/22,50.0%）及两者联合阴性表达（7/21,33.3%）的患者,差异有统计学意义（均P＜0.01）;VEGF-C/MMP-9 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为80.0%（32/40）,高于仅1 项指标阳性表达（9/19,47.4%）及两者联合阴性表达（5/17,29.4%）的患者,差异均有统计学意义（P＜0.05 或0.01）;CXCR4/MMP-9 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为83.3%（30/36）,高于仅1 项指标阳性表达（11/22,50.0%）及两者联合阴性表达（5/18,27.8%）的患者,差异均具有统计学意义（均P＜0.01）。3 项指标共同表达的患者淋巴结转移率高达90.0%。结论 CXCR4、VEGF-C 和MMP-9 在胃癌组织中的表达与淋巴结转移关系密切,如果3项指标均为阳性者淋巴结转移的可能性最大。     

miR-212 在乳腺浸润性导管癌 组织中的表达及效应分析

本文建立随机环境中具有随机控制函数的两性分枝过程,得到该模型概率母函数之间的关系式.当控制函数上可加时,证明配对单元平均增长率的极限是存在的,同时得到配对单元平均增长率一系列的极限性质,进而推进了前人的研究.