时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇

以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮（CTTA）为铕（Eu)的螯合剂,羊抗鼠（SAM）的IgG为二抗,用SAM－IgG-CTTA-Eu作标记二抗,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定离雌二醇（E2）的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高,测定雌二醇（E2）的线性范围为2．5－200pg/mL,检测限为2.5pg/mL。这一方法可望用于E2的临床检测。     

基于适配体胶体金侧向层析试纸快速检测卡那霉素的方法研究

该文基于适配体以及非巯基化核酸修饰的胶体金纳米探针（AuNPs@polyA－DNA）,建立了一种新型的卡那霉素胶体金侧向层析试纸条。分析了试纸条各组装元件,包括适配体浓度、链霉亲和素（SA）与Biotin－DNAT的比例、SA－生物素（Biotin）－DNAT偶联物浓度以及孵育时间与温度等,对显色反应的影响。最佳实验条件为：缓冲液为4xSSC（0.5% Tween 20）,SA与Biotin－DNAT的最佳摩尔比为1∶6,检测区喷涂偶联物SA－Biotin－DNAT浓度为4 μmol/L,适配体浓度为10 nmol/L,室温孵育时间为20 min。在优化条件下,该试纸条对卡那霉素的肉眼分辨浓度为25 ng/mL,线性范围为5.0～125 ng/mL,检出限为1.5 ng/mL。用于蜂蜜中卡那霉素的检测,其回收率为95.1%～105%,相对标准偏差（RSD）为3.4%～8.5%。该试纸条具有灵敏度高、特异性好、架构简单、重复性高等优点,可用于实际样品中卡那霉素的检测。     

时间分辨荧光免疫分析高灵敏检测嗜水气单胞菌

建立了生物素-链霉亲和素时间分辨荧光免疫分析（BAS-TRFIA）高灵敏检测嗜水气单胞菌的新方法.以兔抗IgG包被微孔板,加入嗜水气单胞菌菌株B18和生物素化IgG,生成的夹心复合物用Eu³⁺-链霉亲和素作为示踪物,Eu³⁺可与离解增强液形成时间分辨荧光（TRF）,通过TRF值对病原菌定量.方法的检测限为1.0×10² cfu/mL,在1.0×10~1.0×10⁶ cfu/mL范围内线性良好,相关系数0.9716.用该法检测时,不同来源的嗜水气单胞菌以及其它气单胞菌均呈阴性.板内和板间的变异系数分别小于5.00%和9.00%.所有相关检测试剂37℃恒温放置6 d后,检测性能无明显改变.对60份人工感染的美洲鳗鲡组织样品,包括肝、肾、肠、鳃和肌肉等组织进行检测,阳性检测率为98.33%.结果表明,BAS-TRFIA法检测嗜水气单胞菌,灵敏度高、特异性好、操作简便,该方法为水产养殖病原菌检测提供了新的思路.     

荧光标记聚苯乙烯微球的激光捕获及其原位稳态和时间分辨荧光光谱研究

本工作设计研制了一套激光捕获与原位稳态及时间分辨荧光光谱检测系统,该系统将激光捕获技术与稳态及时间分辨荧光光谱检测技术相结合,实现了对亚微米级微粒的原位稳态及时间分辨发光性质研究.利用研制的仪器研究了荧光标记聚苯乙烯微球的激光捕获过程、以及捕获微粒的原位稳态及时间分辨荧光光谱.本工作为单个纳米粒子发光性质的研究开辟了一条新的途径.     

流动注射停流荧光动力学分析法测定痕量铁的研究

利用自行组装的流动注射停流荧光动力学分析装置，研究了铁（Ⅲ）与３，５－二溴水杨基荧光酮的荧光动力学反应性质，提出了一种快速，简便，精确地测定痕量铁的新方法，其线性范围为０．０２０－０．２５０μｇ／ｍＬ，线性相关系数为０．９９９，检测限为１０ｎｇ／ｍＬ，以０．２００μｇ／ｍＬ的铁（Ⅲ）作精度试验，Ｒ．Ｓ．Ｄ％＝２．１％（ｎ＝１１）。该方法已成功地用于铝合金及桃树叶中痕量铁的测定，结果分别与ＩＣＰ法和     

时间分辨荧光(TRF)测量及其应用

荧光寿命和时间分辨荧光光谱是荧光光谱学的两个重要参量,随着探测技术的发展而得到更多的应用.本文简述TRF测量技术及其在化学、物理、生化和医学方面的应用,以期促进TRF在国内的广泛利用.     

基于激发态分子内质子转移的新型聚集诱导荧光探针用于硫化氢的检测及细胞成像

该文使用4-乙酰氨基苯甲醛和碳酸肼一步法合成了一种具有聚集诱导荧光（AIE）特性的高效新型荧光探针1。通过荧光发射光谱、紫外光谱、粒度粒径分析、扫描电子显微镜和DFT理论计算讨论了探针1的AIE特性,证明了探针的发光机理是激发态分子内质子转移（ESIPT）效应。探针1在DMSO－H2O（1∶9,体积比）,pH 7.4（PBS,0.2 mol/L）体系中可定量检测0～25 μmol/L范围内的H2S,检出限为0.27 μmol/L。此外,探针1不仅成功用于实际样品中H2S的检测,还可应用于活HeLa细胞中外源性H2S的荧光成像。并将其用于构建超灵敏逻辑门。利用探针1制备的简单便携经济的检测试纸,能够实时有效地视觉检测H2S。该研究有望为各种生理过程和食品样品中H2S的检测提供可靠有效的新思路与新方法。     

用四磺基铝酞菁直接测定血清中白蛋白

以红区荧光染料四磺基铝酞菁（ＡｌＳ４Ｐｃ）为探针建立了荧光猝灭法测定白蛋白的新方法。考察了各种影响因素。厚佳实验条件下,该方法的线性区间０．１０－４．５ｍｇ／Ｌ,检测限为４０μｇ／Ｌ。将该方法用于人血清样品中白蛋白的直接测定并与临床方法（溴甲酚绿法）比较,二者符合良好。     

基于上转换荧光共振能量转移的Hg~(2+)侧流检测模型的设计和应用

本工作利用荧光共振能量转移(FRET)过程,以上转换荧光纳米材料(UCNPs)作为能量供体,以金纳米粒子(AuNPs)作为能量受体,通过适配体识别Hg~(2+),在硝化纤维素膜(NC)上制备侧流检测试纸条。Hg2+的参与会拉近能量供受体距离,引起检测区UCNPs的荧光猝灭。通过检测区的荧光猝灭效率,可判断样品中的Hg~(2+)浓度。该传感器在缓冲溶液中的检测线性范围为0.1~100nmol/L;检出限为0.1nmol/L。本研究成功证实了上转换荧光共振能量转移体系在侧流模型应用的可行性。     

微流控芯片-激光诱导荧光检测器的研制及核酸片段分离检测中应用

采用自行设计的共焦式激光诱导荧光检测器（激发波长635nm，发射波长670nm），以cy5染料对检测器的空间分辨能力和灵敏度进行了测试，检出限达到10^-9mol／L。建立了一种微流控芯片快速分离检测DNA片段的方法。以0．8％羟丙基甲基纤维素（HPMC）为筛分介质，以（噻唑橙单体）To-pro-3为荧光标记染料，在玻璃微流控芯片中实现了dsDNA片段的无胶筛分和激光诱导荧光检测，12条DNA片段在75s内得到分离。     

魔幻尺寸ＣｄＳｅ纳米簇的连续生长与室温光学性质

以镉的脂肪酸盐和分散在三辛基膦中的硒单质分别作为镉和硒的前体,采用十二烷基硫醇做“成核剂”,十二烷基胺为活化剂,在非配位溶剂十八碳烯中,实现了连续尺寸高质量魔幻尺寸半导体纳米簇（ＣｄＳｅ）的合成。所得ＣｄＳｅ纳米簇的形态和光学性质分别通过透射电子显微镜、紫外可见吸收光谱、荧光激发光谱、荧光发射光谱及时间分辨的荧光光谱测试技术进行了表征和测定。该系列ＣｄＳｅ纳米簇具有良好的室温荧光性质,能够得到较强的以往只有低温（５～２００Ｋ）下才能探测到的荧光光谱。所得发射光谱大部分为表面缺陷导致的黄光发射。部分尺寸的纳米簇能够实现白光发射,其ＣＩＥ坐标为（０.３３９,０.３４０）,为白光光源的开发提供了备选材料。     

用于抗结核药物异烟肼检测的碳点/二氧化锰纳米探针的构建

采用微波法快速合成了一种生物相容性好、稳定性高的荧光碳点（CDs）,并将该碳点与二氧化锰纳米片（MnO2）混合形成纳米荧光探针用于抗结核药物异烟肼（INH）的检测。采用透射电子显微镜（TEM）、X射线光电子能谱（XPS）、X射线衍射（XRD）、傅里叶变换红外光谱（FT－IR）、紫外可见光谱（UV－Vis）和荧光光谱等手段对碳点和二氧化锰纳米片的形貌、成分、表面基团进行了表征。实验发现,MnO2纳米片通过荧光共振能量转移（FRET）猝灭CDs的荧光,而加入的INH可与MnO2纳米片发生氧化还原反应使后者降解,进而使CDs的荧光得以恢复,基于此构建了一种定量检测INH的纳米荧光探针。该探针对INH表现出良好的灵敏度和选择性,对INH检测的线性范围为0.5 ~ 60 μmol/L,检出限为0.02 μmol/L,并成功地应用于血样、尿样以及片剂中INH的测定,回收率分别为94.8% ~ 116%,99.0% ~ 105%和96.8% ~ 102%,相对标准偏差均小于5%,结果令人满意。该探针为INH的检测提供了新的思路,在生物样品检测方面具有广阔的应用前景。     

溶胶-凝胶分子印迹CsPbBr3量子点的构建及其在胆固醇荧光检测中的应用

该文研究了CsPbBr3量子点（QDs）作为一种新型荧光（FL）探针对胆固醇（CHO）的检测。以3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）为功能单体,CHO为模板分子,采用溶胶－凝胶技术,将CHO引入到SiO2网络中,制备了CHO分子印迹膜保护的CsPbBr3@SiO2 QDs。该分子印迹膜既可降低空气、湿度等与CsPbBr3 QDs的接触,提高CsPbBr3 QDs的稳定性,又赋予CsPbBr3 QDs对CHO的选择性。检测过程中,CHO被捕获到CsPbBr3@SiO2QDs的印迹位点上,形成空间位阻,导致CsPbBr3 QDs荧光强度下降。在最优条件下,CsPbBr3 QDs的荧光猝灭效率和CHO浓度对数在1.00 × 10－11 ~ 5.00 × 10-8 mol·L－1范围内呈现良好的线性关系,检出限为2.48 × 10－12 mol·L－1。结果表明,该方法灵敏度高、选择性好。该工作为CHO检测提供了一种新的策略,拓宽了CsPbBr3 QDs的应用范围。     

镥铕共发光时间分辨荧光免疫法检测嗜水气单胞菌

建立了共发光时间分辨荧光免疫检测嗜水气单胞菌的新方法,以嗜水气单胞菌菌株B11包被微孔板,与Eu3+标记的兔抗IgG免疫反应后,加入含有共发光离子Lu3+的解离增强剂,由于Eu3+和Lu3+络合物的共发光效应,时间分辨荧光大大增强,有效放大了检测信号,提高了检测灵敏度。优化了共发光体系的条件,方法的检出限为1.0×10³cfu/mL,在1×10³~5×10⁶cfu/mL范围内线性关系良好,相关系数0.994,不同血清型的嗜水气单胞菌以及其它菌株均呈阴性。板内和板间的相对标准偏差分别为2.9%和3.0%。用该法检测了35份人工感染的日本鳗鲡组织样品,阳性检出率为100%,高于直接时间分辨荧光免疫法和ELISA法。共发光时间分辨荧光免疫法检测嗜水气单胞菌,快速灵敏,具有良好的应用前景。     

导数—同步荧光光谱法同时测定三种B族维生素的研究

研究了维生素Ｂ１的氧化产物（硫色素）、维生素Ｂ２和Ｂ６混合物体系的导数－同步荧光光度谱，提出了混合物体系荧光光谱被分辨开的同时测定方法，该法可不经分离直接测定复合维生素片剂中维生素Ｂ１，Ｂ２及Ｂ６，其线性范围均为０－１．０μｇ／ｍＬ，检出限分别为０．５、１．５及４．０ｎｇ／ｍＬ。     

二溴羟基苯基荧光酮荧光猝灭法测定Br^—

本文报道了以二溴羟基苯基荧光酮（ＤＢＨ－ＰＦ）为指示剂，在阳离子表活性剂ＣＰＣ存在下荧光猝灭间接测定Ｂｒ＾－的新方法。在０．６ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４介质中，Ｂｒ＾－和ＢｒＯ３＾－反应生成Ｂｒ２，Ｂｒ２与ＤＢＨ－ＰＦ（λｅｍ＝５２０ｎｍ）生成红色化合物，使体荧光猝灭。Ｂｒ＾－含量在０．２５－６．２５μｇ／２５ｍＬ范围内有良好的线性关系，检测限为０．２５μｇ／２５ｍＬ。该法灵敏度高，选择性好，用于合成海     

荧光能量转移体系在生化分析中的应用-吖啶橙(AO)-中性红(NR)荧光探针测定DNA研究

本文简述了以荧光能量转移体系测定ＤＮＡ方法的发展过程,对近几年这一领域的新成果作了介绍;同时对吖啶橙（ＡＯ）－中性红ＮＲ为荧光探针测定ＤＮＡ的条件进行分析,证明了该法具有灵敏度高、线性范围宽、检出限低、选择性好、抗干扰能力强等,该法为微量ＤＮＡ定量分析提供了一个新的途径。     

一种新的橙红色长余辉荧光材料Y2O2S∶Sm3+

铜激活的硫化锌(ZnS∶Cu)和铕激活的硫化钙(CaS∶Eu)是最早获得应用的蓝色和红色长余辉材料. 随后, 相继发现了铝酸盐体系和硅酸盐体系两大类长余辉荧光材料[1～3]. 这两类长余辉荧光材料在发光亮度、余辉时间、稳定性方面都较前述硫化物系列长余辉荧光材料有很大提高, 从而具有非常广阔的应用前景和应用范围[4～6]. 但这两类长余辉荧光材料的发光颜色一般为蓝紫、蓝或黄绿, 没有红色发光现象. 随着研究的深入, 人们发现了稀土元素激活的碱土钛酸盐红色长余辉荧光材料, 这种荧光材料在发光亮度及余辉上都有明显的提高[7,8], 而且解决了硫化物不稳定的缺点. 近年来才发展起来的以碱土金属氧化物为发光基质, 以Eu3+为激活剂的红色长余辉荧光材料进一步提高了余辉亮度及时间[9].     

氯嘧磺隆胶体金免疫检测试纸条的制备与应用

利用胶体金标记的经亲和层析纯化的氯嘧磺隆单克隆抗体,氯嘧磺隆-牛血清白蛋白,羊抗鼠IgG制备了氯嘧磺隆胶体金免疫检测试纸条。该试纸条的最低检测极限为100μg/L,检测时间10 m in。8个土壤样品分别添加0~2000μg/L的氯嘧磺隆标样,用0.15 mol/L NaHCO3提取2 h后用气相色谱和试纸条进行检测,如果以100μg/L作为阳性与阴性样品的区分标准,气相色谱和试纸条检测结果完全一致。所制备的胶体金免疫检测试纸条可以用于土壤中氯嘧磺隆残留的筛选。     

截短新型冠状病毒N蛋白在荧光层析法上的应用

基于截短新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)N蛋白和全长N蛋白,采用荧光免疫层析技术,建立了一种高灵敏度快速评价新型冠状病毒肺炎患者体内SARS-CoV-2抗体水平的方法。以荧光微球为标记物制备试纸条,进行阴性和阳性检测并选出较优抗原配对组合。初步评价了其精密度与稳定性,并与已上市的检测方法进行对比。根据阴性和阳性检测结果优选截短N蛋白标记,全长N蛋白包被组合,所建立的方法可以在 15 min内完成SARS-CoV-2抗体水平的检测,能够有效区分阴阳性,批内精密度CV为3.48%~10.05%,批间精密度CV为4.77%~11.73%。试纸条在37 ℃条件下能够稳定保存21 d,与胶体金检测法一致性较好,总符合率为96.13%,阳性符合率为90.63%,阴性符合率为97.56%。该研究基于截短N蛋白初步建立的荧光免疫层析检测方法能有效评价患者体内的SARS-CoV-2抗体水平,具有良好的精密度和稳定性,便于在基层医疗单位推广,有较好的应用前景。