水稻孢子体雄性不育系小孢子发育过程中的蛋白质分析

以孢子体雄性不育系马协Ａ、马协Ｂ、马协６３（Ｆ１）和珍汕９７Ａ、珍汕９７Ｂ、汕优６３（Ｆ１）为材料，对小孢子发育的花粉母细胞时期、四分体时期、单核期、二核期、三核期的花药蛋白质进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析．结果表明：在马协型细胞质雄性不育系中，有１２种多肽的表达具有时序特征，其中９种多肽可能与马协Ａ雄性不育有关；在野败型细胞质雄性不育系中，有１０种多肽的表达具有时序特征，其中６种多肽可能与珍汕９７Ａ雄性不育有关     

水稻红莲型细胞质雄性不育性及其恢复性的遗传

以花粉可育率和自然结实率为指标,对红莲型细胞质雄性不育系丛广４１ Ａ 与其恢复系配制的 Ｆ１ 、 Ｆ２ 、 Ｂ Ｃ１ 和 Ｂ Ｃ２ 等世代的育性表现进行了调查,结果表明,红莲型细胞质雄性不育系丛广４１ Ａ 属配子体不育,其不育性受一对隐性核主基因和不育细胞质共同控制,其核不育基因与珍汕 ９７ Ａ 不等位 其恢复性受显性单基因控制,密阳 ２３ 有一对强恢复基因,珍汕 ９７ 有一对弱恢复基因     

水稻孢子体、配子体雄性不育系小孢子败育时期花药线粒体蛋白质的分析

利用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析了水稻孢子体雄性不育系珍汕９７Ａ、保持系珍汕９７Ｂ、Ｆ１代汕优６３和配子体雄性不育系丛广４１Ａ、保持系丛广４１Ｂ、Ｆ１代广优青在小孢子败育时期的花药线粒体蛋白质．结果表明，在这两种类型的组合中，不育系同保持系、Ｆ１代的带型差异很大，保持系的带型和Ｆ１代的带型差异较小．其中，汕优６３比珍汕９７Ｂ多１条分子量为３１０００的多肽带，广优青比丛广４１Ｂ多１条分子量为４３３００多肽带．     

珍汕97不育系和保持系水稻花粉发育过程中RNA含量变化的研究

采用组织化学方法，对珍汕９７水稻不育系及保持系的花粉发育过程进行分析，结果表明从幼小的单孢花粉到单核边位出现中央大液泡时期，不育系花粉细胞ＲＮＡ含量与保持系无显著差异，单核末期不育系开始败育，双核期ＲＮＡ含量与保持系双核期花粉细胞相比有显著下降，说明ＲＮＡ含量下降是珍汕９７不育系花粉败育的一个重要生理特征，不育系花粉在单核末期以前发育是正常的．     

三种细胞质雄性不育水稻小孢子发育过程的研究

运用ＤＮＡ荧光探针结合显微荧光术，系统地研究了３种水稻细胞质雄性不育系的败育过程、时期和特点．结果表明，珍汕９７不育系不能完成小孢子第一次有丝分裂；马协不育系小孢子可完成第一次有丝分裂，但不能进入第二次有丝分裂；广丛４１不育系部分小孢子可完成第二次有丝分裂，因此可看到许多三核花粉，但因核行为异常而败育．小孢子的败育过程可能是一种程序性细胞死亡（ＰＣＤ）的过程     

水稻抗稻瘟病、绿叶蝉和黄萎病基因BAC克隆的物理定位

植物单拷贝短序列的染色体原位杂交的检出率一直很低．水稻ＢＡＣ克隆作为一种大容量载体的基因组克隆因其独特的优点已被应用于水稻基因组研究．用生物素标记了两个水稻ＢＡＣ克隆，这两个克隆分别含与抗稻瘟病基因Ｐｉ－５（ｔ）、抗稻绿叶蝉基因Ｇｌｈ和抗稻黄萎病基因ＲＴＳＶ在连锁图中等位的ｃＤＮＡ标记ＲＺ５６５和ＲＺ２６２，并用其进行了水稻染色体原位杂交．它们分别被定位在水稻第四染色体长臂距着丝粒百分距离４０％和短臂１００％处．由于供杂交ＢＡＣ克隆含与３种抗病基因等位的标记，因此这些克隆的位置也就是供测抗病基因的位置．杂交检出率由迄今沿用的质粒克隆探针杂交的１０％以下提高到了４６．８％和５９．２％．检出染色体的号数与遗传图确定的染色体相符，证实了用ＢＡＣ克隆进行染色体原位杂交的优越性，为广泛利用水稻ＢＡＣ克隆进行单拷贝小片段基因的定位打下了基础．     

水稻细胞质雄性不育的分子机制研究——不育系、保持系苗期基因表达差异初步探讨

应用ｍＲＮＡ差异显示技术研究了珍汕９７、马协和丛广４１等３套水稻细胞质雄性不育系（Ａ）及保持系（Ｂ）在二叶苗期基因表达情况，发现这３套材料的不育系和保持系在苗期都存在着基因表达的差异，且基因表达的差异情况各有特点．     

马协型杂交稻不育系和保持系花粉发育的细胞学比较

对湖北马协型杂交稻不育系Ａ和保持系Ｂ从花粉母细胞至花粉发育过程各时期进行了细胞学的比较观察．醋酸洋红染色结果表明马协Ａ和马协Ｂ都能顺利地通过花粉母细胞减数分裂的各个时期．采用改进的快速银染法对花粉粒发育的细胞学观察，表明马协Ａ的败育主要发生在二核期末至三核期初之间，先是营养核解体，生殖核后解体．说明马协Ａ是一种新型的细胞质雄性不育系．对快速银染法的优越性和马协Ａ的败育途径进行了讨论．     

野生稻抗白叶枯病遗传分析及转育效应研究

研究了不同类型的野生稻对江陵６９１，ＰＸＯ６１和Ｔ７１７４三个白叶枯致病菌系的抗性遗传及转育效应．普通野生稻２号与四个栽培稻杂交组合Ｆ２群体的抗性遗传分析表明：普遍野生稻２号带有三对相互独立遗传的显性抗病基因；其中一对同时支配对供试三菌系的抗性，并且与显性基因Ｘａ－４和Ｘａ－７非等位，与隐性基因ｘａ－５及ｘａ－ｃ独立遗传；另两对则分别只控制对江陵６９１和Ｔ７１７４之一的抗性．利用杂种胚和Ｆ１幼穗培养，可有效地将非ＡＡ型野生稻抗病性转育至栽培稻之中．     

热分析法研究马协水稻花药的发育及败育过程

用热分析法研究了花粉不同育期马协保持系与不育系水稻花药的热分解过程，获得了花粉不同育期马协保持系与不育系水稻花药的ＴＧ／ＤＴＡ曲线，初步探讨了马协水稻花药的热分解规律及发育过程中花药干物质含量与发育期的关系．计算了马协保持系水稻花药发育的表观动力学参数，建立了相应的动力学经验式，并讨论了马协不育系水稻花药的败育过程．     

rbcL基因在水稻叶绿体DNA基因库克隆中的定位

由水稻品系珍汕９７不育系为材料制得的叶绿体ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）基因库中，筛选到屯含核酮糖１，５－二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基基因（ｒｂｃＬ）的重组质粒，对该重组质粒用ＰｖｕⅡ，Ｐｓｔ１ｔ和ＳａｌＩ限制性内切酶进行了分析并制得了限制图谱，ｒｂｃＬ基因在该图谱上进行了定位。     

用原位杂交技术检测二价染色体上黄鳝rRNA基因多态性的研究

用地戈辛标记的原位杂交技术研究黄鳝二价体上ｒＲＮＡ基因的多态性．共检测到：数目和位置多态；杂交信号形态多态；ｒＲＮＡ基因的联合现象；７号二价体上可移动的ｒＲＮＡ基因位点；ｒＲＮＡ基因的串联重复；ｒＲＮＡ基因杂交信号周围的微信号密集等６种多态现象．还对本研究结果进行了详细地讨论．     

菜茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）cbn1和cao突变基因的对比分析及CAO基因的分子定位

用电击法将带有CAO基因片段的Psp109-E8质粒转入到莱茵衣藻cbnl-48mt^＋基因突变株中后．转化子中出现了叶绿素b的恢复性表达，初步验证了丧失合成叶绿素b能力的cbn1和cao突变基因具有等位性的属性；将1641-1b（cbn1-43mt^＋）和CC-1354（cbn1-48mt^＋）突变株分别与CBS5（cao5mt^-）突变株的分离子CBS5-c1和CBS5-c5进行杂交．并通过随机分析方法分离获得1842个减数分裂后代分离子．经检测其中均没有发现有野生性表型的分离子．初步证明cbn1和cao4突变基因问有着非常紧密的连锁性；从上述杂交系分离获得的50多个四分子中也没有检测发现显示野生性表型的分离子．进一步证明了cbn1和cao突变基因具有等位性的属性；根据CAO基因的DNA序列，从5＇-端和3’-端设计两个探针，分别与莱茵衣藻核基因组I号染色体上GBP1和RB47分子标记之间的21个BAC克隆进行的点杂交实验结果显示．该两个探针序列与21号BAC克隆（莱茵衣藻BAC文库序列号33e2）片段均有同源区的特性，此项DNA杂交实验初步证明．CAO基因的位点是在cbml突 变基因左右两侧的GBP1和RB47两个分子标记之间的33e2 BAC克隆片段区．     

玉米大斑病抗性基因ht2的原位杂交物理定位

通过对与玉米大斑病（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍｔｕｒｃｉｃｕｍ）抗性基因ｈｔ２紧密连锁的２个玉米ＲＦＬＰ分子标记ｂｎｌ１２．３０和ｕｍｃ９３的染色体原位杂交定位，推断了大斑病抗性基因ｈｔ２的物理位置．ｂｎｌ１２．３０和ｕｍｃ９３在遗传图中位于第八连锁群上，它们的探针分别同时与第三和八染色体进行了杂交，平均信号检出率为１２．１３％；它们在第八号染色体长臂上杂交信号与着丝粒的百分距离分别是３３．３０±１．４１和３４．４７±２．７５，在第三号染色体长臂上杂交信号与着丝粒的百分距离分别是５１．４１±２．７５和５６．５４±２．９４．基因ｈｔ２在遗传图上位于第八连锁群的ｂｎｌ１２．３０和ｕｍｃ９３之间，因此，ｈｔ２在染色体上的物理位置应为第八号染色体长臂，百分距离为３３．３０和３４．４７之间．在第三号染色体长臂上两个供试ＲＦＬＰ标记的分布区之间也可能有ｈｔ２的同源顺序．     

杆状病毒基因前导小顺反子的序列特征及其翻译衰减调控模型

在杆状病毒许多基因的ｍＲＮＡ前导序列中存在一类小顺反子（Ｍｉｎｉｃｉｓｔｒｏｎ）结构．发现某些昆虫基因和苜蓿尺蠖核型多角体病毒的基因在密码子的使用偏向上各不相同．而小顺反子一般偏向于使用少数密码子，具有重复密码子．小顺反子与大顺反子同框；多数小顺反子的ＡＴＧ上下游符合Ｋｏｚａｋ序列；有的小顺反子起始密码子后紧跟着就是终止密码子．这些特征暗示小顺反子可能是一类独特的有别于其它杆状病毒基因而具有特殊功能的“基因”．小顺反子的作用可能与原核生物氨基酸衰减调控子Ａｔｅｎｕａｔｏｒ有相似之处，但它不是在转录水平，而在翻译水平上减弱其后大顺反子的表达．称之为翻译衰减调控模型     

eglinC基因的化学合成与克隆

采用固相亚磷酰胺法合成了ｅｇｌｉｎＣ全基因，该基因全长２２１ｂｐ，包括其结构基因，５＇－端起始密码子ＡＴＧ和３＇－端终止密码子ＴＡＧ，并在基因的５＇－和３＇－分别装上ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ位点．共分１２个片段，采取分段合成，酶促连接成完整的ｅｇｌｉｎＣ基因．合成的基因克隆于Ｍ１３载体，经杂交、检测，筛选出含ｅｇｌｉｎＣ基因的克隆．用双脱氧链终止法测其序列，结果与设计的一致．     

在大肠杆菌中利用反义RNA抑制乙肝病毒（HBV）X基因的表达

将乙肝病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ株完整的Ｘ基因正向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２１的ＰＬ启动子下游，得到能表达Ｘ蛋白的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＶ（＋）；同时将Ｘ基因反向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２０的ＰＬ启动子下游，得到能转录Ｘ基因反义ＲＮＡ的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＸ（－）．利用这两个质粒，构建出能同时转录Ｘ基因ｍＲＮＡ和反义ＲＮＡ的重组质粒ＰＥＸ．ＡＮ－ＨＢＸ，并在原核水平上，证实了反义ＲＮＡ对Ｘ基因的表达具有明显的抑制作用，从而为在真核水平上利用反义ＲＮＡ对Ｘ基因进行调控的研究提供了有利的基础．     

不同光周期反应的等基因系与农垦58s杂交后代的育性遗传

农垦５８ｓ与一对感光性不同的等基因系杂交，观察了Ｆ１～Ｆ５代的生育期和育性的变化．生育期从Ｆ２代起出现连续变异，并有超亲类型．Ｆ１代结实率为５４．８％～７５．１％，可以认为不育性是隐性性状，Ｆ１～Ｆ５代的育性呈连续分离，在Ｆ２代没有３：１或１５：１的分离比例，到Ｆ５代不育性还不能稳定．不育株（结实率＜１０％）的抽穗期连续分布于整个杂种群体的抽穗期间，而不局限于某一抽穗期间，表明感光性和光敏性是基本独立遗传的，但不同组合又有差异，与感光性弱的Ｌｍｃ杂交的偏早，与感光性强的Ｌｍｕ杂交的偏晚，表明感光性与光敏性又有一定的联系．     

中国西藏与中东地区近缘野生大麦遗传多样性的SSR标记分析

应用简单重复序列（SSR）标记方法对90个近缘野生大麦样本进行了遗传多样性分析，其中包括45份中国西藏近缘野生大麦样本和45份中东地区近缘野生大麦样本．从大麦的7个连锁群中选取27对引物用于PCR扩增，结果有11对引物扩增出有效多态性片段．11对引物共检测到126个等位变异位点，每对引物检测到5～22个SSR等位变异位点，平均每对引物检测到11．45个等位变异位点．中国西藏近缘野生大麦比中东地区近缘野生大麦平均每对引物多检测出2个位点．SSR结果采用NTSYS软件进行相似性系数计算，POPGNEN32软件进行遗传多样性系数计算，算术平均的非加权成对分组法（UPGMA法）构建聚类树状图，结果表明中国西藏近缘野生大麦样本比中东地区近缘野生大麦样本具有更高的遗传多样性，这为大麦的东方起源学说提供了新的佐证．     

南美白对虾两养殖群体遗传多样性的比较分析

采用同工酶电泳技术和随机扩增DNA多态技术对浙江省养殖的普通南美白对虾（简称P群体，下同）和SPF南美白对虾子一代（简称S群体，下同）两个群体的遗传多样性进行比较分析．结果表明，编码南美白对虾肌肉7种同工酶的18个基因位点中，EST-1、EST-2、EST-3和MDH-1位点具有多态现象；P群体和S群体的多态位点比例均为22．22％，平均杂合度分别为0．0666和0．0542；两群体间的遗传相似系数为0．9968，Nei遗传距离为0．0032．而利用随机扩增多态DNA（RAPD）技术，共检测出110个RAPD位点，其中P群体的多态位点数56个，多态位点比例为50．91％，S群体的多态位点数52个，多态位点比例为47．27％；P群体和S群体内个体间平均遗传相似度分别为0．8623和0．8742；两群体间的遗传相似度为0．9815，遗传距离为0．0185．无论是同工酶电泳结果还是RAPD分析结果都表明浙江省养殖的SPF南美白对虾子一代的遗传多样性水平比普通南关白对虾要低．