离子色谱安培法测定尿液中的胱氨酸

建立离子色谱安培法检测尿液中胱氨酸的分析方法。将尿液稀释处理后,过OnGuardⅡRP前处理柱,去除尿液中的有机物,选用低容量阳离子交换柱IonPac CS17进行分离,以甲烷磺酸梯度淋洗,柱后用300 mmol/L NaOH溶液衍生,离子色谱脉冲安培法检测,外标法定量。胱氨酸的质量浓度在0.1~5.0 mg/L范围内与其色谱峰面积呈良好的线性,线性相关系数r^2=0.999 9,检出限为0.05 mg/L。测定结果的相对标准偏差为0.71%(n=6),样品加标回收率为94%~108%。该方法具有操作简单,专属性强,灵敏度高等优点,可用于临床快速检测尿液中的胱氨酸。     

高效液相色谱-串联质谱法测定生物样品中4,4′-二氨基-3,3′-二氯二苯甲烷残留

通过优化样品前处理方法、色谱及质谱条件,建立了血液和尿液2种生物样品中高关注度化学品4,4′-二氨基-3,3′-二氯二苯甲烷(MOCA)的高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品采用不同比例乙腈提取,经C18柱净化,以乙腈-0.1%HAc溶液作流动相,等度洗脱,经Agilent Eclipse AAA色谱柱分离后,质谱检测。分别以267.3231.0为定量离子对,267.3195.2、267.3140.0为定性离子对进行MOCA的定性定量分析。方法线性范围为:血液1.0~100.0ng/mL(相关系数为0.9998),尿液0.5~50.0ng/mL(相关系数为0.9999);回收率范围为:血液81.0%~89.7%(相对标准偏差为5.76%~8.47%),尿液84.0%~95.0%(相对标准偏差为2.87%~7.54%)。该方法灵敏度高、重复性好、操作简便,可用于高危人群MOCA的健康风险监测。     

超高效液相色谱-三重四极杆/复合线性离子阱质谱法同时快速测定血浆和尿液中84种有毒植物成分

采用超高效液相色谱-三重四极杆/复合线性离子阱的质谱联用技术,建立了同时快速测定血浆和尿液中84种有毒植物成分的方法。血浆样品经乙腈沉淀去蛋白和除磷脂、尿液样品经甲醇稀释后直接进样,以含0.1%（体积分数,下同）甲酸和2 mmol/L甲酸铵的97%乙腈水溶液、含0.1%甲酸的2 mmol/L甲酸铵水溶液作为流动相进行梯度洗脱,在Acquity BEH C₁₈色谱柱上实现分离,在电喷雾正离子多离子监测触发的增强子离子扫描（MRM-IDA-EPI）模式下检测,基质工作曲线内标法定量。血浆和尿液中84种待测物在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于或等于0.9911,血浆和尿液中的检出限（S/N=3）分别为0.01~1和0.03~2 μg/L,准确度（平均加标回收率）为70.6%~124.5%,日内和日间精密度分别为0.7%~18.4%和1.1%~18.5%。该法简单、快速、灵敏、准确,可用于血浆和尿液中84种有毒植物成分的中毒检测。     

离子色谱-三重四极杆质谱法同时测定血浆和尿液中百草枯和敌草快

百草枯和敌草快是广泛使用的非选择性触杀型除草剂,中毒后会造成急性肺损伤,病死率高,同时监测血浆和尿液中百草枯和敌草快的浓度,可以为临床早期诊断和预后提供有价值的信息。血浆和尿液中百草枯和敌草快的主要检测方法为液相色谱-质谱法。百草枯和敌草快为强极性水溶性化合物,在反相色谱柱上难以保留,多采用离子对色谱法或亲水色谱法进行分离。采用离子对色谱法时,加入的离子对试剂有离子抑制作用,降低了质谱检测的灵敏度,还给质谱系统增加了额外的污染;亲水色谱法易受基质成分影响,保留时间不稳定。考虑到百草枯和敌草快在水溶液中以双电荷联吡啶离子状态存在,更适合采用阳离子交换色谱法,建立了离子色谱-三重四极杆质谱测定血浆和尿液中百草枯和敌草快的检测方法。血浆和尿液样品经水稀释后,直接过混合型聚合物反相吸附和弱阳离子交换固相萃取柱（Oasis WCX）净化,经IonPac CS 18型阳离子色谱柱（250 mm×2.0 mm,6.0 μm）分离,以自动在线产生的甲磺酸进行梯度洗脱,色谱柱流出液经阳离子抑制器抑制后进入质谱系统,在ESI⁺ 、多反应监测（MRM）模式下检测,稳定同位素内标法定量。百草枯和敌草快分别在1.0~150 μg/L和0.5~75 μg/L范围内线性关系良好,血浆中的平均基质效应分别为84.2%~89.3%和84.7%~91.1%,尿液中平均基质效应分别为50.3%~58.4%和51.9%~59.4%;血浆中百草枯和敌草快的平均加标回收率分别为93.5%~117%和91.7%~112%,相对标准偏差（RSD）分别为3.4%~16.7%和2.8%~13.2%;尿液中百草枯和敌草快的平均加标回收率分别为90.0%~118%和99.2%~116%,RSD分别为5.6%~14.9%和2.4%~17.3%（n =6）;血浆和尿液中百草枯和敌草快的检出限分别0.3 μg/L和0.2 μg/L,定量限分别为1.0 μg/L和0.5 μg/L。该法灵敏度高,准确性好,可用于血浆和尿液中百草枯和敌草快的中毒检测。     

在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱法同时检测生物样品中18种氨基甲酸酯类农药

建立了同时测定全血、尿液和肝组织等生物样品中18种氨基甲酸酯类农药的在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱(On-line SPE/LC-LIT/MS)分析方法。样品经乙腈处理,稀释和离心后直接进样。经Waters OasisHLB在线SPE柱富集纯化,以BETASIL C18柱为分析柱,甲醇-水(均含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱;使用电喷雾电离(ESI)正离子模式测定,扫描方式为选择反应监测(SRM)和连续反应监测(CRM)。18种农药在考察的质量浓度范围内线性关系良好(权重因子1/X),相关系数为0.994 3~0.999 4;在全血和尿液中的检出限为0.1~5 ng/m L,在肝组织中的检出限为0.1~5 ng/g;3个加标水平的回收率为90.2%~114.5%,相对标准偏差(n=4)为0.5%~7.5%。该方法简单准确,灵敏度高,能够满足生物样品中18种氨基甲酸酯类农药的快速分析要求。     

同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法检测烟道气中的低氯代二恶英

建立了同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱检测烟道气中痕量低氯代二恶英的分析方法。采用索氏提取富集烟道气样品中的目标物,提取液经过复合硅胶柱和碱性氧化铝柱净化后,进行高分辨气相色谱-高分辨质谱检测。采用DB-5MS毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）分离,以保留时间和同位素特征离子丰度比定性,以与同位素的峰面积比值定量。实验结果表明,方法的回收率为66.6%~112.5%,相对标准偏差（RSD）的范围为19.9%~40.5%（n=5）,方法的检出限（LOD）为0.027~0.485 μg/L。应用该方法检测了3个焚烧炉烟道气样品,回收率在85.7%~137.0%范围内,样品中目标物含量分布在11.4~9183 pg/Nm³之间。结果表明该方法适合用于烟道气中痕量低氯代二恶英的检测。     

在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱法同时定性定量检测全血和尿液中7种抗凝血杀鼠药

建立了同时测定全血和尿液样品中7种抗凝血杀鼠药的在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱(on-line SPE/LC-LIT/MS)分析方法。用乙腈沉淀样品中的蛋白质,于稀释、离心、过滤后直接进样。经在线固相萃取柱富集纯化;以C18柱为分析柱,甲醇-乙酸铵水溶液(0.02 mol/L)为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾电离(ESI)负离子模式下,记录目标母离子在锁定保留时间窗口内的二级全扫描信号,通过自建数据库进行定性确证,挑选高灵敏度与专属性的二级子离子进行定量,从而实现7种杀鼠药的同时定性和定量分析。7种杀鼠药在各自质量浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.9946~0.9997,检出限和定量限分别为0.02~1.00 ng/mL和0.10~4.00 ng/mL, 3个添加水平的回收率为81.0%~113.9%,相对标准偏差为0.1%~6.2% (n=6)。该方法简单方便,灵敏度高,能够满足全血和尿液样品中7种抗凝血杀鼠药的快速筛查和准确定量。     

稳定同位素稀释离子色谱-三重四极杆质谱法测定血浆和尿液中的氟乙酸

建立了离子色谱-三重四极杆质谱测定血浆和尿液样品中氟乙酸（MFA）的方法。血浆样品经高氯酸超声提取,尿液样品经高氯酸酸化,血浆和尿液提取液在pH 0.5~1.0条件下用叔丁基甲醚（MTBE）萃取,萃取液经氮吹浓缩后溶于0.1%（v/v）氨水溶液。以Ionpac AS 19型阴离子色谱柱为分析柱,在线自动产生的氢氧化钾作为淋洗液进行梯度分离,柱流出液经阴离子抑制器抑制后进入质谱系统。采用电喷雾电离源,在负离子、多离子监测（MRM）模式下检测,¹³C₂-氟乙酸稳定同位素内标法定量。血浆和尿液样品中氟乙酸的平均加标回收率为96.2%~120%,相对标准偏差为1.1%~13.1%（n=6）,方法的检出限（S/N=3）分别为0.03 μg/L和0.1 μg/L。该法简单、灵敏、准确,可用于生物样品中氟乙酸的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法同时检测血液中3种季铵盐类肌松剂

维库溴铵、罗库溴铵和泮库溴铵是一类广泛使用的非去极化肌松剂,使用过程中引起过敏反应甚至死亡的情况时有发生,快速检测血液中该类肌松剂的浓度,可为临床早期诊断提供有价值的信息。该类肌松剂为强极性的季铵盐类化合物,在反相色谱柱上难以保留,主要采用离子对色谱法进行分离。采用离子对色谱法时,加入的离子对试剂有离子抑制作用,可降低质谱灵敏度,还会污染质谱系统。该文建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测血液中3种季铵盐类肌松剂的检测方法。血液样品经稀释、高速离心后,上清液过Bond Elut AL-N固相萃取柱净化,用0.45 μm的微孔滤膜过滤后检测。采用ZIC-cHILIC色谱柱(50 mm×2.1 mm, 3.0 μm)分离,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,在ESI⁺、多反应检测(MRM)模式下检测。3种季铵盐类肌松剂在血液中的基质效应为88.1%~95.4%,在各自范围内线性关系良好,相关系数(R²)均大于0.996,检出限为0.2~0.8 ng/mL,定量限为0.5~2.0 ng/mL,加标回收率为92.8%~110.6%,相对标准偏差(RSD)为3.2%~9.4%。该方法灵敏度高,准确性好,操作简便,可用于血液样品中维库溴铵、罗库溴铵和泮库溴铵的快速检测。     

超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用方法测定血浆和尿液中的α-龙葵碱、α-卡茄碱和茄啶

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用方法,检测血浆和尿液中的α-龙葵碱、α-卡茄碱和茄啶。样品经2%(v/v,下同)甲酸水溶液等量稀释,再经混合型阳离子交换固相萃取柱(MCX SPE)净化,以0.1%甲酸乙腈溶液和含0.05%甲酸的5 mmol/L乙酸铵水溶液作为流动相进行梯度洗脱,在UPLC BEH C18色谱柱上实现分离,正离子电喷雾串联质谱多反应监测(ESI-MS/MS MRM)方式检测,基质匹配外标法定量。一次进样分析时间为5.5min。血浆和尿液中3种待测物的线性范围均为0.3~100 ng/mL,相关系数为0.997~0.999;样品的检出限为0.1 ng/mL,定量限为0.3 ng/mL;血浆和尿液中的平均加标回收率分别为82%~112%和96%~114%,相对标准偏差为4.0%~16%和2.7%~17%(n=6)。方法简单、准确、灵敏,适用于马铃薯中毒检测。     

Comparison of LC Columns Packed with 2.6?��m Core-Shell and Sub-2?��m Porous Particles for Gradient Separation of Antibiotics

The recently introduced Kinetex C18 column packed with core-shell 2.6 ??m particles is declared to provide similar efficiency and short analysis as Acquity BEH C18 column with 1.7 ??m porous particles. Unlike Acquity BEH C18 column, Kinetex C18 column exhibited lower column backpressure making this column compatible to conventional LC systems. The performance of Kinetex C18 column (2.1 × 50 mm) and Acquity BEH C18 column (2.1 × 50 mm) for gradient separation of tetracyclines under acidic conditions (oxytetracycline, tetracycline, chlortetracycline, and doxycycline) and macrolides under alkaline conditions (tylosin, clarithromycin, roxithromycin, and carbomycin) was studied. The columns were compared by evaluation of their experimental peak capacity and its dependence on linear velocity and gradient slope. The maximal experimental peak capacities for analysis of tetracyclines were 51.8 (Acquity BEH C18 column) and 48.4 (Kinetex C18 column). This indicated that Kinetex C18 was a suitable alternative to Acquity BEH C18 column for the analysis of tetracyclines under acidic conditions. On the contrary, the maximal experimental peak capacities for analysis of macrolides on Acquity BEH C18 column was higher (46.7) than that on Kinetex C18 column (36.9). Moreover, application of Kinetex C18 column for the analysis of macrolides under alkaline conditions was limited with respect to its decreasing performance with growing number of injections on the column.     

通过式固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中地西泮

建立了通过式固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中地西泮残留量的分析方法。样品用乙腈直接提取，经Prime HLB通过式固相萃取柱（60 mg/3 mL）净化，以Acquity UPLC BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）为色谱柱，甲醇-0.1%（v/v）甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。在多反应监测（MRM）、正离子电离模式下检测，采用基质匹配标准曲线外标法进行定量分析。结果显示：在0.1~10 ng/mL范围内，地西泮线性关系良好（r²>0.99）。在1.5、3.0和15.0 μg/kg 3个加标水平下，地西泮的加标回收率为88.2%~101.1%，日间和日内精密度（RSD）均在10%以下。该法简便快速，灵敏度高，可用于水产品中地西泮的准确测定。     

亲水作用色谱-串联质谱测定尿液中尼古丁和可替宁

建立了测定人尿液中尼古丁和可替宁含量的亲水作用色谱-串联质谱(HILIC-MS/MS)方法。尿样加入尼古丁-d4和可替宁-d3同位素内标后,用水稀释10倍,经过滤后的滤液由超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)进行分离分析。采用ACQUITY UPLC~BEH HILIC色谱柱(50 mm×3.0 mm,1.7μm),以甲醇和体积分数为0.1%的氨水为流动相,流速为0.2 mL/min,在电喷雾电离源正离子模式下测定尿液中尼古丁和可替宁的含量,用标准曲线法定量。尼古丁和可替宁在1.0~1 000μg/L范围内线性关系良好,相关系数分别为0.994 9和0.995 8;检出限分别为0.082μg/L和0.077μg/L;定量限分别为0.27μg/L和0.26μg/L;加标回收率分别为90.4%~103.5%和93.0%~104.6%;相对标准偏差分别为4.80%~6.21%和4.22%~7.15%。应用所建立的方法测定了200份尿样,结果表明,吸烟人群尿中尼古丁含量为26.68~854.30μg/L,可替宁含量为36.66~1 191.18μg/L(n=86,M_(nicotine)=76.00μg/L,M_(nicotine)=83.52μg/L,M为中位数);非吸烟人群尿中尼古丁含量为5.08~69.66μg/L,可替宁含量为3.16~28.21μg/L(n=114,Mnicotine=7.53μg/L,M_(nicotine)=3.79μg/L)。该方法快速灵敏,操作简单,适用于尿样中尼古丁和可替宁的批量测定,能满足烟草暴露评价的需要。     

超高效液相色谱-大气压化学电离-三重四极杆质谱法同时测定血浆、尿液和瓜果类蔬菜中葫芦素B、E和I

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱测定血浆、尿液和瓜果类蔬菜中葫芦素B、E和I的检测方法。血浆和尿液样品经固相支持液液萃取法（SLE）提取净化,瓜果类蔬菜样品经乙腈提取后用水稀释。以XBridge BEH C₁₈色谱柱（100 mm×3.0 mm,2.5 μm）为分析柱进行分离,以甲醇-0.025%（v/v）氨水溶液为流动相进行梯度洗脱。采用大气压化学电离源,在负离子、多反应监测（MRM）模式下检测,以夹竹桃甙作为内标物,基质工作曲线内标法定量血浆和尿液中3种葫芦素;以溶剂标准曲线外标法定量瓜果类蔬菜中的待测物。血浆和尿液中3种葫芦素的检出限均为0.03 μg/L,平均加标回收率为89.0%~113%,相对标准偏差为1.7%~12.2%（n=6）;瓜果类蔬菜中3种葫芦素的检出限为5~10 μg/kg,平均加标回收率为87.6%~114%,相对标准偏差为4.1%~11.1%（n=6）。该法简单、灵敏、准确,已应用于食用苦葫芦瓜引起中毒的病人血浆和尿液,以及葫芦瓜的检测,并检出了葫芦素B。     

高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定面粉中7种荧光增白剂

建立了高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)测定面粉中7种荧光增白剂(FWAs)的分析方法。在样品中加入30 mL乙酸乙酯,超声提取10 min,离心后在40℃下氮吹浓缩,用乙腈定容后,上机检测。选用Phenomenex Kinetex C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)分离,以0.1%(v/v)甲酸-乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子(ESI)源,在正离子、多反应监测(MRM)模式下进行扫描,外标法定量。7种荧光增白剂在各自范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限(S/N=3)为0.50~2.65μg/kg,定量限(S/N=10)为1.60~8.80μg/kg;在3个添加水平下的平均加标回收率为64.8%~117.5%,相对标准偏差(n=6)为0.9%~14.4%。该方法操作简单、回收率高、精密度好,适于面粉中7种荧光增白剂的测定。     

超高效液相色谱-质谱法快速测定塑料包装饮料中双酚A

建立了超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱联用测定塑料包装饮料中双酚A残留量的检测方法. 以SEP-PAR C₁₈小柱富集饮料样品,甲醇淋洗. 采用Acquity UPLCTM BEH C₁₈液相柱分离,流动相为水和甲醇,采用梯度洗脱方式,电喷雾离子源,以负离子扫描,多反应监测(MRM)模式进行质谱分析. 在试验选定的最佳条件下,方法的检出限为0.5 μg/L,样品加标回收率为92.4%~98.4%,相对标准偏差小于8.4%.     

高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定血清中胆固醇及其6种代谢标志物

利用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（HPLC-Q/Orbitrap HRMS）测定血清中的胆固醇及其6种代谢标志物（2,4-脱氢胆甾醇、7-烯胆甾醇、菜油固醇、豆固醇、β-谷固醇和角鲨烯）。以乙腈作为提取溶剂,超声提取,采用Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以95%（v/v）的甲醇-乙腈（2：8,v/v）-5%（v/v）水做流动相,等度洗脱15 min,流速0.4 mL/min。在大气压化学电离源（APCI）正离子扫描模式下,质谱采用全扫描/数据依赖二级扫描（Full MS/dd MS²）监测模式,同时获得定性和定量结果,一级分辨率为70000 FWHM,二级分辨率为17500 FWHM。7种目标物质在其线性范围内的线性相关系数（r²）均不小于0.992,检出限为0.8~62.1 μg/L,3个加标水平下的回收率为82.1%~97.5%,相对标准偏差（RSD）为1.6%~7.4%。方法准确、简单、快捷,可以作为血清中胆固醇及其6种代谢标志物的检测方法。     

免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法高灵敏测定尿液和血浆中3种鹅膏毒肽

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱高灵敏测定尿液和血浆中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽和γ-鹅膏毒肽的方法。经过免疫亲和柱净化,尿液样品浓缩20倍、血浆样品浓缩10倍,以Kinetex Biphenyl色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7 μm)作为分析柱,甲醇-0.005%(v/v)甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱分离,电喷雾电离、负离子、多反应监测模式下检测,外标法定量。3种鹅膏毒肽的线性范围为0.1~200 ng/mL,相关系数(r)>0.999。尿液和血浆中3种鹅膏毒肽的基质效应和提取回收率分别为92%~108%和90%~103%,变异系数均小于13%。尿液中3种鹅膏毒肽的准确度为-9.4%~8.0%,重复性和中间精度分别为3.0%~14%和3.5%~18%,当取样量为2.00 mL时,方法的检出限均为0.002 ng/mL;血浆中3种鹅膏毒肽的准确度为-13%~8.0%,重复性和中间精度分别为3.9%~9.7%和5.5%~12%,当取样量为1.00 mL时,方法的检出限均为0.004 ng/mL。该法操作简单、灵敏、准确,已在中毒患者摄入野生蘑菇后138 h的尿液中检出0.0067 ng/mL α-鹅膏毒肽和0.0059 ng/mL β-鹅膏毒肽。该法已成功解决中毒患者尿液和血浆中超痕量鹅膏毒肽的检测难题,对于疑似中毒病人的早诊断、早治疗、降低死亡率都具有非常重要意义,也为今后开展此类毒素毒理作用及机体代谢规律的研究提供了可靠的技术支撑。     

超高效液相色谱-大气压化学电离-三重四极杆质谱联用法快速测定食品中苯并[a]芘

建立了快速检测食品中苯并[a]芘的超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用(UPLC-MS/MS)分析方法。样品用正己烷提取后,经分子印迹固相萃取柱净化,以甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱,在XBridge BEH C18柱上实现分离,大气压化学电离(APCI)-三重四极杆质谱正离子MRM方式检测,以苯并[a]芘-d12作为内标的稳定同位素稀释法定量。方法的线性范围为0.07~50μg/kg,定量限为0.07μg/kg。平均加标回收率为86%~104%,相对标准偏差为2.3%~14%。该方法灵敏、准确,适用于食品中苯并[a]芘的测定,已应用于实际样品的检查。