高效液相色谱同时测定注射用双黄连(冻干)中六种活性成分含量

建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定注射用双黄连(冻干)中绿原酸、咖啡酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量的方法。采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250×4.6 mm,5mm),以乙腈―0.25%(wt)冰醋酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长350 nm,柱温35℃。结果表明,六种成分基本分离,线性关系良好,平均回收率在99.72%~101.56%之间。本方法准确、简便、重现性好,可以实现注射用双黄连(冻干)多成分质量控制。     

高效液相色谱-电化学阵列检测器检测烟草中的绿原酸等六种次生代谢产物

建立了一种利用反相高效液相色谱-电化学阵列检测器同时检测烟草中主要次生代谢产物的方法。在Hypersil BDS C-18(4.6 mm×200 mm)色谱柱上,以30 mmol/L磷酸二氢钠（pH 3.5）-5%~70%(体积分数)乙腈(含0.25 mmol/L十二烷基磺酸钠)进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为30 ℃。电化学阵列检测器的检测电势依次为:-20,140,210,310,400,450,490,730,800,900 mV时,可以较好地分离和检测烟草中常见的次生代谢产物绿原酸、咖啡酸、对羟基肉桂酸、莨菪葶、芦丁和烟碱。该方法的相对标准偏差为0.71%～15.31%,回收率为52.0%～85.2%,各种次生代谢产物的检测限为0.2~2 ng;进样量在20～500 ng范围内呈现良好的线性关系,线性相关系数为0.9910～0.9998;具有较高的准确度和精确度。方法简便,可应用于烟草中次生代谢产物的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法分离鉴定绿原酸及其相关杂质

建立了高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS)分离和鉴定绿原酸及其相关杂质的方法。采用C18色谱柱(5 μm,4.6 mm×150 mm),乙腈-水（含0.1%甲酸）(体积比为8∶92)为流动相,经HPLC-MS/MS和HPLC-二极管阵列检测器在线检测,对工业绿原酸中的奎尼酸、咖啡酸、绿原酸同分异构体等8个相关杂质的结构进行了鉴定。     

RP-HPLC法测定水母雪莲中木樨草素的含量

采用动态微波提取技术和反相高效液相色谱方法来测定水母雪莲中木樨草素的含量。色谱条件:色谱柱Phenomenex Fusion-Rp column(250mm×4.6mm i.d.,4μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液(50∶50,v/v);流速:1.0mL/min;检测波长:360 nm;柱温:30℃。标准曲线方程为y=2014.93x+83.2(r=0.9997),木樨草素对照品进样量在1.2~6.0μg范围内线性关系良好。木樨草素在水母雪莲中的含量为107.10μg/g。     

高效液相色谱法测定星状凤毛菊中木樨草素的含量

采用动态微波提取技术和反相高效液相色谱法测定了星状凤毛菊中木樨草素的含量。色谱条件:色谱柱Phenomenex Fusion-Rp column(250mm×4.6mm i.d.,4μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液(50∶50,v/v);流速:1.0mL/min;检测波长:360 nm;柱温:30℃。标准曲线方程为y=2014.93x+83.2(r=0.9997),木樨草素对照品进样量在1.2~6.0μg范围内线性关系良好。结果表明,木樨草素在星状凤毛菊中的含量为81.69μg/g。     

枸杞润肤霜中两种酚酸类成分的高效液相色谱检测及质谱确证

建立了自制枸杞润肤霜中绿原酸和咖啡酸的高效液相色谱分析及液相色谱-串联质谱确证方法。枸杞润肤霜样品经甲醇超声提取,提取液离心处理后,取上清液经微孔滤膜过滤后测定。采用Aglient HC-C18色谱柱(250×4.6mm,5μm)分离,以甲醇-0.5%乙酸水溶液(27∶73,V/V)为流动相,等度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长327nm。绿原酸、咖啡酸分别在3.3~250μg/mL、3~225μg/mL间线性关系良好(r=0.9993);平均加标回收率分别为98.28%、99.26%,相对标准偏差(RSD)均为1.93%。自制枸杞润肤霜中绿原酸、咖啡酸含量分别为0.0398 mg/g、0.0323mg/g。该方法快速、准确,适用于同时测定枸杞润肤霜中绿原酸、咖啡酸的含量。     

高效液相色谱法测定番泻甙及其代谢产物番泻素

采用高效液相色谱法分离测定番泻甙A和B及其代谢产物番泻素A和B,其色谱条件为：色谱柱Spherisorb C 18 不锈钢柱(250 mm×4.6 mm i.d., 10 μ m),柱温40 ℃;检测波长 360 nm;流动相A为1.25%(体积分数)乙酸水溶液,流动相B为甲醇,线性梯度程序为100%A20 min100%B。该方法快速、准确,能够对番泻甙的整个代谢过程进行实时分析。     

在线固相萃取/高效液相色谱法快速测定双黄连口服液及其胶囊中绿原酸与连翘苷的含量

建立了在线样品前处理/HPLC测定双黄连口服液中连翘苷和绿原酸含量的方法。右泵为在线纯化泵,采用Acclaim Polar AdvantageⅡC18(4.6 mm×50 mm×3μm)为在线一维净化柱,以甲醇-1%醋酸-水为流动相;左泵为分析泵,采用Acclaim C18(4.6 mm×150 mm×5μm)为二维分析柱,以乙腈-1%醋酸-水为流动相,柱温30℃,流速1.0 mL/min;UV检测波长为278 nm。绿原酸和连翘苷的相关系数分别为0.999 5、0.999 7,口服液中连翘苷与绿原酸的平均回收率分别为100%和99%。方法快速、简便,专属性、重现性好,测定结果与药典方法基本一致。     

复方丹参片中四种成分的高效液相色谱-电化学检测-紫外检测法分析

建立了电化学检测器与二极管阵列检测器联用的液相色谱(HPLC-ECD-DAD)同时分离和测定复方丹参片中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA 等4种成分的分析方法。采用Zorbax SB-C18柱(150 mm×4.6 mm i.d.,5.0 μm),以甲醇和0.4%磷酸为流动相(流速1.0 mL/min)进行梯度洗脱;ECD检测电压0.7 V,DAD检测波长270 nm,柱温30 ℃。实验结果表明,原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA质量浓度分别为0.3～9.0 mg/L,1.1～54.0 mg/L,1.1～11.1 mg/L和5.2～52.0 mg/L时与其峰面积呈良好的线性关系(线性相关系数均高于0.999),原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA的平均回收率(n=6)分别为97.8%(相对标准偏差(RSD)为2.15%),98.2%(RSD为2.07%),97.6%(RSD为2.18%)和97.2%(RSD为2.07%)。该法同时利用了ECD和DAD的优点,是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为复方丹参片的质量控制提供科学依据。     

葡萄酒中7种酚酸的色谱电化学分析

建立了同时测定葡萄酒中没食子酸、原儿茶酸、丁香酸、p-香豆酸、咖啡酸、绿原酸和阿魏酸等7种生物活性酚酸的反相高效液相色谱电化学分析新方法,并测定了5种国产不同品牌的葡萄酒.采用HypersilODS色谱柱(250mm×4.0mm,5.0μm),流动相为甲醇-4%醋酸,梯度洗脱,流速为0.8mL/min,工作电压为0.7V,柱温为30℃.实验结果表明,电化学法的检出限比紫外法的检出限低4～600倍.     

高效液相色谱法分离和测定小麦中的5种内源激素

建立了高效液相色谱法(HPLC)用于分离和测定小麦中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA₃)、玉米素(ZT)和水杨酸(SA)5种植物内源激素。经过条件优化,选用甲醇作为样品提取溶剂。然后,经石油醚和乙酸乙酯萃取,经Sep-Pak C18小柱纯化。液相色谱的分离采用Eclipse XDB-C₁₈ (250 mm×4.6 mm, 5 μm)反相色谱柱;流速为1 mL/min;进样量10 μL。检测器波长设置为254 nm; 14.5 min时切换到240 nm; SA洗脱后即18 min时切换回254 nm。流动相A为甲醇,B为乙酸溶液(pH 3.6)。梯度条件为0~7 min, 20%A; 7~10 min, 20%A~28%A; 10~17 min, 28%A; 17~19 min, 28%A~40%A; 19~35 min, 40%A。结果表明,小麦中各激素的分离效果理想,加标回收率达96.9%~98%,相对标准偏差在1.54%~2.29%之间。因此,该方法的建立为快速、准确地分离和测定小麦内源激素提供了可靠的方法。     

超高效液相色谱-串联质谱双内标法同时测定复方杏香兔耳风胶囊中的10种有效成分

建立了同时测定复方杏香兔耳风胶囊中原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯Ⅲ和白术内酯I等10种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）双内标分析方法。以咖啡酸和淫羊藿苷为内标（IS）,在ZORBAX RRHD Eclipse Plus C₁₈色谱柱上,以甲醇和含0.3%甲酸的水为流动相进行梯度洗脱分离,流速为0.3 mL/min。在电喷雾电离（ESI）正、负离子切换模式下,采用多重反应监测模式进行检测。结果表明,原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯Ⅲ、白术内酯I的线性范围分别为0.00300~24.0 mg/L、0.0170~2.00 mg/L、0.0150~30.0 mg/L、0.00400~30.0 mg/L、0.0105~24.0 mg/L、0.00300~30.0 mg/L、0.00300~5.00 mg/L、0.00600~5.00 mg/L、0.00150~4.00 mg/L、0.000600~0.900 mg/L;检出限分别为1.0、11、5.0、1.5、3.5、1.0、1.0、2.0、0.50、0.20 μg/L。10种成分的加样回收率为92.5%~106%,相对标准偏差均不大于3.2%。该方法快速简便、灵敏度高、重复性好,已成功用于实际样品的分析。     

高效液相色谱法同时测定反应物中的单氯代苯酐及单氯代邻苯二甲酸

采用高效液相色谱法同时测定了化学反应物中的3-氯代苯酐、4-氯代苯酐、3-氯代邻苯二甲酸、4-氯代邻苯二甲酸。样品在80～100 ℃下用无水乙醇酯化。色谱分析条件:色谱柱为Luna-C18柱,流动相为甲醇-0.15 mol/L磷酸二氢铵溶液（体积比为42∶58）,检测波长为240 nm,外标法定量。方法简便、快速,具有良好的精密度、回收率和线性关系。     

银黄口服液的质量控制及其高效液相色谱指纹图谱的研究

利用高效液相色谱方法,建立了复方银黄口服液及其原料药材黄芩和金银花的指纹图谱,测定了银黄口服液中黄芩苷 和绿原酸的含量。以Lichrospher C18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm)为分离柱,以甲醇和0.1%磷酸水溶液为流动 相进行二元梯度洗脱,流速0. 6 mL/min,在254 nm波长下检测。采用夹角余弦和相关系数的方法,计算6批银黄口服液指 纹图谱的相似度均在0.99以上,表明银黄口服液的质量未见显著差异。将银黄口服液指纹图谱中的共有峰与原料药材黄芩 和金银花的指纹图谱中的共有峰相比较,对其归属进行确认,大部分共有峰可以匹配。     

柱前衍生高效液相色谱法测定二乙醇胺脱氢产物亚氨基二乙酸和甘氨酸

以对甲苯磺酰氯(PTSC)为衍生剂,建立了柱前衍生高效液相色谱(HPLC)测定二乙醇胺脱氢产物中亚氨基二乙酸(IDA)和甘氨酸(Gly)含量的分析方法。IDA和Gly与衍生剂在碱性(pH 11)条件下于45℃反应15 min,进行柱前衍生,并利用高效液相色谱-质谱对衍生产物进行定性分析。衍生化产物采用VP-ODS色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.03 mol/L醋酸铵溶液(pH 5.5)为流动相A、乙腈为流动相B(体积比为87∶13),进行等度洗脱,流速为1 mL/min,并采用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定,检测波长为235 nm。该法在IDA质量浓度为900~2 100 mg/L、Gly质量浓度为20~100 mg/L的范围内线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.999。IDA和Gly的检出限(LOD)分别为0.089 7 mg/L和0.026 2 mg/L,加标回收率分别为98.7%~99.3%和98.0%~99.5%,相对标准偏差(RSD)分别为0.89%~1.23%和0.95%~1.11%(n=3)。该法具有反应条件温和、准确性高的特点,可用于工艺生产中IDA和Gly含量的测定。     

高效液相色谱法测定聚合物水处理剂中残留的单体

建立了采用高效液相色谱测定聚环氧琥珀酸钠盐(PESA)、丙烯酸/马来酸酐二元共聚物(AA/MA)、聚丙烯酸盐(PAA)、水解聚马来酸钠盐(HPMA)、马来酸酐/丙烯酸/丙烯酸甲酯三元共聚物(MA/AA/MAc)5类聚合物水处理剂中残留单体的方法。以Agilent ZORBAX 300SB-C18柱(5 μm,150 mm×4.6 mm)为分析柱,柱温为30 ℃,流动相为0.01 mol/L KH2PO4溶液(用5%H3PO4调节pH为2.3)-甲醇(体积比为95∶5)进行等度洗脱,检测波长为210 nm,流速为0.6 mL/min,样品用流动相稀释过滤后直接进样分析,10 min内马来酸、富马酸及丙烯酸残留单体获得分离和定量。上述3种残留单体的检出限分别为0.5,0.5和0.2 mg/L,回收率为98.9%～103.7%,相对标准偏差为1.09%～1.69%,相关系数为0.9996～0.9999。实验结果表明,该法简便快速、灵敏可靠,适用于5类聚合物水处理剂中残留单体的测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定蛋黄卵磷脂的含量

建立了蛋黄磷脂中卵磷脂（即磷脂酰胆碱,PC)的高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）的测定方法。以Nov a-Pak Silica 60A硅胶柱(3.9 mm i.d.×150 mm,4 μm)为分离柱,正己烷-异丙醇-3%冰醋酸水溶液(体积比为35∶65 ∶8)为流动相，等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30 ℃。蒸发光散射检测器漂移管温度50 ℃,雾化气(空气)压力350 kPa。在上述条件下测得PC在0.16~1.61 g/L范围内线性关系良好(r2=0.9979),检测限为0.64 μg,方法的精密度为3.2%(n=5),回收率为98.2%~128.2%。将该方法用于实际样品的测定,获得了令人满意的结果。该方 法预处理简单,分析速度快,可用于蛋黄磷脂中卵磷脂的测定。     

高效液相色谱法测定尿中苯的代谢物反，反-粘糠酸

建立了高效液相色谱测定职业苯接触者尿中苯的代谢物反,反-粘糠酸(tt-MA)的方法。该方法采用C18柱进行分离,以冰乙酸-四氢呋喃-甲醇-水(体积比为1∶2∶10∶87)为流动相,以香草酸为内标,于264 nm处进行紫外检测。尿样经2 mol/L盐酸酸化后用乙酸乙酯进行萃取。结果表明,所建立的标准曲线在tt-MA的质量浓度为0.10~10.00 mg/L时线性关系良好(r＝0.9999),加标回收率为95.1%~100.5%,日内和日间测定的相对标准偏差分别为4.0%~9.0%和6.2%~8.8%。应用该法测定职业苯接触者56人和非职业苯接触者24人尿中的tt-MA,结果显示职业苯接触者的尿中tt-MA含量明显高于非职业苯接触者,并与接触的苯的浓度呈线性相关(P＜0.01)。该方法灵敏、快速、经济、简便,可用于职业苯接触者的生物监测和毒物动力学研究。     

反相高效液相色谱法测定川芎饮片、实验大鼠血清和脑匀浆中的阿魏酸

 用反相高效液相色谱法测定了川芎饮片、实验大鼠血清和脑匀浆中的阿魏酸。分离柱为Nova Pak C18(3 9mmi.d .× 15 0mm) ,流动相为甲醇 水 乙酸 (体积比为 35∶6 5∶0 5 ) ,在 32 0nm波长下检测 ,用外标法定量。阿魏酸在 0 85mg/L～ 4 0 0mg/L范围内有良好的线性关系 ,线性相关系数为0 9990 4。阿魏酸的加标回收率为 95 %～ 10 2 %。