利用高效液相色谱鉴定化学合成的 δ-睡眠诱导肽及其类似物

用高效液相色谱对化学方法合成的δ-睡眠诱导肽(DSIP)及其类似物(Tyr~1-DSIP,Phe~5-DSIP以及Tyr~1Phe~5-DSIP)的主要成份进行了分离,应用在线的紫外光谱和萤光光谱检测,并将分离出的色谱峰收集后进行氨基酸分析。     

我国产绿臭蛙的皮肤中一个新的速激肽——绿臭蛙激肽的分离和结构

本文利用Sep—Pak C_(13)和HPLC,从我国产绿臭蛙的皮肤甲醇提取物中分离到一个新的14肽——绿臭蛙激肽。此肽结构经分析定为:Asp—Asp—Ala—Ser—Asp—Arg—Ala—Lys—Lys—Phe—Tyr—Gly—Leu—Met—NH_2,且为化学合成所证明。此肽是两栖动物速激肽中最长的一个,其N-端氨基酸与速激肽类其它肽的相应部分有很大区别。此外,简要讨论了纯化过程中绿臭蛙激呔亚砜的形成及其色谱峰的分裂。     

内吗啡肽-1及其类似物的合成及与阿片受体结合作用

内吗啡肽－1和内吗啡肽－2（Endomorphin-1,EM-1;Endomorphin-2,EM-2)是阿片肽类化合物中近期发现的两种,被认为是μ型阿片受体（μ-opiate receptor,MOR)的高亲和性、高选择性的内源性配基^[1]。这一发现是阿片肽研究领域的又一次重大突破,尤其是EM－1与阿片受体相结合的作用^[2]、镇痛效应和降血压活性引起了广泛关注。Fiori等^[3]进而指出了EM－1的生物活性构象,当其处于膜模拟环境中时,认为主链采取伸展构象,2－Pro等^[3]进而指出了EM－1的生物活性构象,当其处于膜模拟环境中时,认为主链采取伸展构,2－Pro采取顺式构型;1－Tyr的侧链与3－Trp的侧链距离较近,而结合EM－1构象研究成果,合理替换了EM－1的2－／3－位氨基酸（Amino acid,Aa),用液相多肽合成法得到了EM－1及其6个类似物,并利用离体生物检定法研究了它们的阿片受体结合作用,以期有助于内吗啡肽进一步的基础及应用研究。     

修饰核糖核酸酶A的酶促合成模型研究

为研究Leu¹²¹-核糖核酸酶A(Leu¹²¹-RNaseA)的半合成制备了C-端去HAsp Ala SerValOH四肽核糖核酸酶A即RNase A(1—120),用固相合成法合成了C-端四肽的类似物HLeu Ala Ser Val OH及C¹⁴标记Leu(记为Leu^*)的四肽HLeu^* Ala Ser Val OH。在设计的小肤模型中,以Boc Val Phe OH和HLeu Ala OMe为底物,在含50%乙二醇,pH 4.50的醋酸缓冲溶液中,在胃蛋白酶的作用下成功地得到了四肤Boc Val Phe Leu Ala OMe,并研究了温度对宵蛋白酶酶促反应的影响。在RNase A(1-120)与H Leu Ala Ser Val OH四肤的胃蛋白酶酶促反应的初步研究中,用HPL C检测反应出现一个新峰。此峰的保留时间与预期产物的保留时间相一致。同位素标记酶促合成试验在高压纸电泳上出现一个新的同位素点,估计为预期的产物。本文还对酶促合成的一些问题进行了讨论。     

促黄体生成素释放激素及类似物的固相法合成及其在家鱼催产中的应用

促黄体生成素释放激素(LRH)以极微量存在于动物的下丘脑,通过神经和毛细血管的输送,进入垂体前叶,促使垂体前叶分泌促黄体生成激素(LH)和促滤泡成熟激素(FSH)。LRH 的天然来源极为困难,结构的阐明和化学合成的成功为其广泛的应用创造了条件。LRH 是一个包含了六个多功能基团氨基酸的十肽,分子中没有自由的氨基和羧基,它的结构是 PGlu·His·Trp·Ser·Tyr·Gly·Leu·Arg·Pro-GlyNH_2。通过改变 LRH 的结构可获得一些高活性的 LRH 类似物,如[DAla~6][去 Gly~(10)NH_2]LRH 乙基酰胺,即 PGlu·His·Trp·Ser·Tyr·DAla·Leu·Arg·Pro·NHC_2_5,在大白鼠垂体离体培养时,它释放 LH 的能力约较 LRH     

放线菌素D新类似物的设计、合成与体外抗肿瘤活性

为了提高临床抗肿瘤药物放线菌素D(AMD)的抗肿瘤效果和治疗指数,在AMD构效关系研究基础上,设计全合成了包括9个新类似物在内的两类共13个AMD类似物.保持环肽2位D-Val不变,环肽5位分别用Sar,D-Me-Leu和Me-Ile等氨基酸替换以改变侧链基团长度,合成了类似物8b～8e;以环肽2位D-Phe替换的低毒性类似物[D-Phe2]2AMD为基础,在环肽5位进行氨基酸替换,改变侧链基团长度和空间指向,并引入芳香族氨基酸等,合成了类似物8f～8m.优化了类似物的合成中的反应条件,提高了五肽环化产率,避免了消旋产物的生成.所有类似物经[α]D,1HNMR和高分辨质谱表征后,采用MTT法进行了体外抗肿瘤活性筛选,结果表明,保留环肽2位D-Val及延长5位氨基酸侧链基团能显著提高类似物的抗肿瘤活性,而2位D-Phe替换后类似物的抗肿瘤活性普遍下降.     

酶促合成肽的研究I.亮-脑啡肽色氨酸类似物的酶促合成

在先后以α-胰凝乳蛋白酶和和木瓜酶作催化剂的作用下,从C端的LeuNH2的氨基开始,逐个与N保护的氨基酸或其衍射生物缩合,合成了亮-脑啡肽色氨酸类似物-TyrGlyGly Trp LeuNH2.对酶的专一性、有机溶剂的选择和合成条件等进行了研究,在Z-TyrOMe和GlyGlyTrp LeuNH2的缩合反应中,比较了相转移法和均相法。上述两种酶的酶促接肽的供体以N-酰基氨基酸酯为好,比相相应的游离酸反应速度快,副反应少,如用嗜热菌蛋白酶,则以N-酰基氨基酸为好,酶促合成与从有机合成所得的产物相同。初步的体外实验表明合成的TyrGlyGlyTrpLeuNH2和天然的亮-脑啡肽对豚鼠回肠的收缩显示相同程度的鸦片样的抑制作用。     

LC/MS/MS方法筛查新生儿苯丙酮尿症

苯丙酮尿症 [1～ 4 ] ( PKU )发病原因是患者基因缺陷使肝脏不能合成苯丙氨酸羟化酶而导致体内苯丙氨酸 ( Phe)不能正常代谢为酪氨酸 ( Tyr) ,前者在体内大量堆积并氧化为对人体有害的苯丙酮酸 . PKU是目前筛查范围最广的氨基酸代谢遗传疾病 ,在全世界每年 [5]约有一千万婴儿接受 PKU筛查 ;在我国 ,PKU也是卫生部要求重点筛查的病种 .Chace[5]等在 1 993年报道了 MS/ MS方法筛查新生儿PKU:直接使用 MS/ MS的中性碎片丢失扫描方式检测 Phe和 Tyr,通过氘代内标与待测氨基酸的质谱峰高比来定量 .MS/ MS方法速度快、准确性好、可以…     

血管紧张素转换酶与抑制肽结合模式的分子动力学研究

应用分子模拟方法研究了血管紧张素转换酶(Angiotensin-converting enzyme,ACE)C端结构域(C-domain)与两种抑制肽(RIGLF/AHEPVK)的结合机制,预测了两个体系的结合模式,提出在C-domain-RIGLF中His353,Asp377,Asp453,Phe457,His513,Tyr523和Phe527为RIGLF主要结合残基,而在C-domainAHEPVK中Gln281,His353,Ser355,Glu384,Lys511,His513和Tyr523等残基起关键作用.应用结合自由能计算比较了两个体系的结合能力,结果表明,RIGLF和AHEPVK均与C-domain活性位点残基存在较强作用,且AHEPVK对C-domain的结合能力较强,与实验结果一致.     

色氨酸胰岛素类似物的荧光研究

本文通过测定[L-Trp]~(A1)胰岛素、[D-Trp]~(A1)胰岛素、[L-Trp]~(B1)胰岛素以及去Phe~(B1)[L-Trp]~(B2)胰岛素的荧光随pH的变化等性质,探讨分子氨基末端的微环境及其侧链取向.3种L型色氨酸胰岛素类似物在pH2—13 的范围内的荧光行为类似,只显示一个在pH9的荧光强度峰,但[D-Trp]~(A1)胰岛素却有在pH9.8和pH5.5 两个荧光强度峰.从两种A1色氨酸胰岛素类似物的荧光特性推测到它们溶液构象的差别,很可能是造成它们生物活力不同的原因之一。     

高效毛细管区带电泳分离亲水性(Gly)~n小肽

对毛细管区带电泳与反相液相色谱分离一组亲水性(Gly)~n 小肽选择性的差异作了对比,同时考察了小肽分子结构以及温度变化对小肽迁移行为的影响     

全保护RGD三肽的合成方法研究

以两条路线、多种偶联试剂(DCC，EDCI，CDI，EEDQ)合成了全保护三肽Arg- Gly-Asp(RGD)．Boc-Arg(Tos)-OH经上述偶联剂短时活化，于合适条件下与Ts0H- G1y-OBzl缩合，均获得良好收率(43％-97％)．经Pd(OH)2／H2还原得到的Boc-Arg (Tos)-G1y-0H于22-27℃与HCl·Asp(OcHex)-OBzl偶联得到全保护三肽Boc-Arg (Tos)-Gly-Asp(OcHex)-OBzl(TM)，反应收率分别为76．4％(DCC／HOSu)，64．7％ -78．3％(DCC／HOBt)，66．7％-77．9％(EDCI／HOBt)．Boc-Gly-OH和HCl·Asp- (OcHex)-OBzl经DCC／HOBt或CDI活化，可得到碳端二肽Boc-Gly-Asp(OcHex)-OBzl (收率分别为81．2％，89．5％)，该二肽脱Boc后与Boc-Asp(Tos)-OH反应，经DCC ／HOBt，EDCI／HOBt，CDI，DCC／HOSu活化，均可生成目标分子TM，其反应收率分 别为40．4％，73．8％，67．8％，84．4％．     

花粉蛋白和多糖的研究

从葡萄和罂粟花粉中分别纯化得RP3I和PSPP1-4肽, 测定了它们的生理活性,并合成了PSPP1以外的肽, 从Typha Angustifilia和codonopsis pilosula花粉获得了TA-C和CPA-E多糖, 并研究了它们的部份特征和结构。     

质谱在生命有机磷化学中的一些应用

讨论了质谱在生命有机磷化学中的应用,包括N-磷酰氨基酸、肽、五配位磷化合物、核苷-氨基酸磷酰胺的质谱裂解途径,有机磷试剂辅助下氨基酸的自组装成肽产物和机理。     

羟基磺酸、氨基磺酸和磺酰肽的合成

具有四面体结构的磺酸衍生物可用于模拟酯键和酰胺键水解的过渡态，特别是 含有四面体结构磺酰胺键的磺酰肽作为天然肽的硫类似物，广泛用于作为酶抑制剂 以及用来诱导抗体酶的半抗原。综述了羟基磺酸、氨基磺酸和磺酰肽的合成。重点 介绍了消旋的和手性的α－和β－取代的β－氨基磺酸及其酰氯和亚磺酰氯，γ－ 氨基－α，β－不饱和磺酸及其酰氯的合成，以及由它们作为基元分子通过液相和 固相方法来合成α－和β－取代的β－磺酰肽、亚磺酰肽及乙烯磺酰肽。     

酶促合成肽的研究 II: 含羧基侧链氨基酸的肽的酶促合成

用嗜热菌酶酶促合成了一系列含门冬氨酸、谷氨酸的肽. 实验证明, 缩合反应中羧基组份中的门冬氨酸β-羧基或谷氨酸γ-羧基毋需保护. 同时也研究了邻近氨基酸残基对缩合反应的影响.     

HCN-H2O气体混合物放电化学: 研究放电能作用下生物分子生成

本文以HCN-H2O气体混物为起始反应物质, 模拟研究大气放电转变HCN为生命分子的可能性.     

(9-叔丁氧羰氨酰基氧甲基)芴-2-乙酰二苯甲胺树脂的制备及其在固相合成保护肽段中的应用

以芴为原料经羟甲基化, 乙酰化. 付氏反应和改良的Clemmensen还原等一系列反应合成了(9-叔丁氧羰氨酰基氧甲基)芴-2-乙酰二苯甲胺树脂. 它可作为固相合成保护肽段时的载体. 用这一新载体, 合成了大鼠转化生长因子α(γ-TGF-α)中的1至7的保护七肽片断段. 总收率可达50%.     

有机合成中的C=C键形成新方法: 原子经济的金属复 分解闭环反应

综述了金属复分解闭环反应最新进展。金属复分解闭环反应已成为有机合成中的非常重要的方法,广泛应用于碳环、杂环化合物及天然产物的合成。原子经济的、绿色化学的优点展示出更加诱人的前景。