链酚胺型配体锌(Ⅱ)配合物模拟碳酸酐酶研究

合成了酚胺型链状配体,N,N'-二(2-羟基苄基)丙二胺(H~2L)及其Zn(Ⅱ)配合物(ZnL),通过元素分析、IR和^1HNRM等手段进行了表征。采用pH电位滴定法,在25℃±0.1℃,I=0.1mol·dm^-^3(KNO~3)条件下,测定了配体的质子化常数以及配体与金属离子Zn(Ⅱ)配位反应平衡常数。讨论了配体与金属离子Zn(Ⅱ)的配位情况,得到了配位酚羟基的解离常数。运用分光光度法,在25℃±0.1℃,I=0.1mol·dm^-^3(KNO~3)条件下,在pH=5.5～9.0(50mmol·dm^-^3缓冲溶液)范围内,研究了配合物作为碳酸酐酶模拟物催化对-硝基苯酚乙酸酯(NA)水解动力学,得到了NA酯水解的配合物催化速率常数k~N~P。实验结果表明,ZnHL^+的配位酚羟基的解离常数pK~a为6.83;催化速率常数k~N~P与pH之间不存在Sigmoidal型曲线关系,而是在pH值中性附近有最大值,ZnHL^+对NA酯水解有很好的催化效果,并且采取双重催化机理,是碳酸酐酶很好的模拟物。     

漆树漆酶的催化氧化作用(X)──叔丁基儿茶酚类底物的漆酶催化氧化和漆酶的微环境效应

对6个含叔丁基的儿茶酚类底物的离解和漆酶催化氧化反应进行了考察。结果表明:叔丁基的存在,有利于增进对底物的结合,并可以利用漆酶活性中心周围提供的pH环境和质子载体性质,促进底物的离解,使这类底物能在远低于其一级离解的弱酸性环境中进行反应。由于叔丁基的特性和漆酶的微环境效应的共同作用,这些底物在pH=6.0的水溶液环境中都能顺利地氧化成相应邻醌,并具有合成价值。ESR结果证明:这些底物在弱酸性条件下的漆酶催化反应经历了质子转移和单电子氧化步骤。     

纳米级微带金电极上葡萄糖氧化酶的固定.性质及应用

实现了葡萄糖氧化酶以及葡萄糖氧化酶和电子传递媒体Fe(CN)^3^-~6同时在纳米级微带电极上的固定,用红外光谱和循环伏安对GOD/PPy微电极进行了表征, 研究了微带金电极上聚吡咯恒电位形成过程的动力学及葡萄糖氧化酶对其动力学过程的影响,探讨了微酶电极GOD/Fe(CN)^3^-~6/PPy对葡萄糖氧化的催化作用, 考察了PPy膜厚度和溶液中氧的存在对GOD/Fe(CN)^3^-~6/PPy微电极测定葡萄糖的影响.     

罂栗花粉中水溶性肽的分离纯化、序列测定和合成的研究

从罂栗花粉中分离得到含21, 17, 13和16个氨基酸残基的四种肽PSPP1～4, 测定了它们的序列。用固相法合成了PSPP2～4, 经HPLC和电泳法对比, 确定了分离肽的一级结构。用FT-IR、CD谱初步讨论了它们在固态和溶液中的二级结构。通过T-淋巴细胞转化实验等生理活性测定方法表明它们具有一定的促免疫活性。     

β-CD与间羧基苯磺酰氯及Fe^3^+构筑氧化还原酶

用β-CD与间羧基苯磺酰氯及三氯化铁反应, 制得了双(6-氧-间羧基苯磺酰基)-β-CD.Fe^3^+配合物, 以此配合物作催化剂, 将苯甲醇高速率氧化成苯甲醛和苯甲酸, 其反应速率是三氯化铁的1.4×10^4倍。     

光度法快速测定土壤中呋喃丹

呋喃丹是一种内吸性杀虫剂。因其残留毒性高,口服易急性中毒,是蔬菜生产过程是禁用的农药。但个别错误施用的现象时有发生,给土壤和蔬菜带来了污染。因此,研究呋喃丹在土壤中残留的分析方法具有重要意义。呋喃丹属氨基甲酸酯类农药,可用农药残留快速测定法(酶抑制法)测定,但检出限高且不能准确定量测定。国家标准采用色谱法测定,但样品处理和仪器要求高,不能用于快速检测。     

用2D Micro-HPLC/MS分析六种蛋白质混合物的胰蛋白酶解多肽产物

采用2D Micro-HPLC系统,用MS对六种蛋白质的胰蛋白酶解多肽产物进行了分析,实现了蛋白质的高灵敏度、高分离度的检测。结合离子交换色谱法和反相毛细管色谱法,利用六个捕集柱和脱盐系统,可对各种分离条件进行优化。因此,可以实现对多种痕量酶解多肽的分离检测。该系统是痕量蛋白质和未知蛋白质检测的有力工具,结合高性能质谱仪,可以达到非常高的灵敏度。     

琼脂糖水凝胶固定化血红素蛋白质的电化学研究

利用琼脂糖（agarose）水凝胶将肌红蛋白（Mb）、血红蛋白（Hb）、辣根过氧化物酶（HRP）和过氧化氢酶（Cat）4种血红素蛋白质固定在裂解石墨电极表面,形成稳定的血红素蛋白质-agarose膜修饰电极。在agarose膜中,Mb、Hb、HRP和Cat直接与电极传递电子。4种血红素蛋白质的式电势都随溶液pH的增加而负移且呈线性关系,表明电子传递过程伴随着质子转移。     

绍兴黄酒中ACE活性抑制肽的分离分析

首次将绍兴黄酒中的肽类组分进行大孔吸附树脂柱层析和高效凝胶过滤色谱以及反相色谱的多步提取纯化与抑制血管紧张素转换酶（AcE）活性试验,并首次利用基体辅助激光解吸电离-飞行时间串联质谱分析和液相色谱-电喷雾电离四极杆-飞行时间串联质谱联用分析鉴定出黄酒中4种ACE活性抑制肽的氨基酸序列为：VEDGGV、PST、NT和LY。     

不同苯原酚化合物用于GOD-Trinder法测定血糖的比较研究

对苯酚、2,4-二氯苯酚、2,6-二氯苯酚及间-苯二酚等四种苯原酚化合物作为过氧化物酶(POD)催化4-氨基安替比林(4-AA) -过氧化氢-酚显色体系测定血糖的葡萄糖氧化酶法(GOD-Trinder)进行比较研究。结果表明,苯酚、2,4-二氯苯酚及间-苯二酚三种苯原酚分别构成GOD-POD-4-AA-H₂O₂-酚显色体系测定血糖时,其检测结果均无显著性差异(P＞0.05),但2,4-二氯苯酚显色体系的显色灵敏度、方法的精密度和准确度均优于苯酚显色体系。间-苯二酚显色体系灵敏度不及苯酚,但检测速度快,线性范围宽,可用于较高浓度葡萄糖溶液的在线快速分析。