血清白蛋白的构象研究：Ⅲ,乙醇,丙酮诱导HSA构象变化

本文用紫外二阶导数光谱辅助以紫外光谱研究了ＨＳＡ，中芳香族氨基酸残基微环境的变化。乙醇诱导的变化可以用溶剂效庆来解释，丙酮的效应较为复杂，可能还与它的π的电子有关。     

傅里叶红外光谱研究血清白蛋白构象

用傅里叶红外光谱法研究了ＢＳＡ及其水溶液的红外光谱。通过对其酰胺Ｉ带傅里叶自转积谱分析,为其及部分水溶液中的二级结构构象进行了指认。结果表明,ＢＳＡ水溶液状态与固态时的二级结构是不同的。随着溶液浓度的降低,酰胺Ｉ带二级结构峰存在明显的位移现象,即１６０９．８６ｃｍ＾－１位移到１６０８．２４ｃｍ＾－１,１６３３．８５位移到１６３８．３６ｃｍ＾－１,１６５３．６９ｃｍ＾－１位移到１６５６．１０ｃｍ＾－     

pH诱导牛血清白蛋白芳香氨基酸残基微环境变化的光谱分析

用荧光光谱和紫外吸收光谱研究了ｐＨ＝２．３～１１．３范围内牛血清白蛋白（ＢＳＡ）芳香氨基酸残基微环境的变化,以此推断蛋白质构象的变化,并讨论蛋白质表面疏水性变化的趋热。与中性环境相比,ｐＨ为２．３时,色氨酸微环境的疏水性增强,蛋白质局部表面疏水降低;ｐＨ为１１．３时,部分Ｐｈｅ残基微环境的极性增强,表明碱诱导蛋白质分子变性使蛋白质分子充分伸展,将更多疏水性氨基酸残基暴露于溶剂中。     

利福平与人血清白蛋白作用的荧光光谱

蛋白质是一类重要的生物大分子,它不仅是构成细胞内原生质的主要成分,也是生命现象的物质基础。对于蛋白质的探索是最复杂的课题之一。 以荧光光谱为手段,文章研究了药物利福平(Rifampicin capsules)与人血清白蛋白(HSA)的作用,测量发现利福平和人血清白蛋白的色氨酸残基的结合位置为R=2.567 nm, 临界距离R₀为2.433 nm。利福平-HSA的Lineweaver-Burk猝灭曲线的离解常数K_d=19.42×10-6 mol·L-1且结合常数K_s=5.149×104 L·mol-1。     

水杨酸与人血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

在ｐＨ９．５０含０．０１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ的硼砂缓冲溶液中,人血清白蛋白（ＨＳＡ）与水杨酸发生相互作用,而导致两者的荧光谱发生变化。采用不同的方法测得这一反应的解离常数。     

pH协同血清白蛋白对单个活态人红细胞作用的拉曼光谱研究

红细胞是维持生命最重要的细胞之一,pH是影响其结构功能的重要因素。 结合人血液中存在血清白蛋白,且可能会对红细胞起作用的特点,在模拟人体内血液中血清白蛋白与血红蛋白摩尔比值的条件下,研究pH协同血清白蛋白对单个活态人红细胞的形态,细胞膜变形能力及胞内血红蛋白结构变化的影响。 结果显示,不同pH下,红细胞的表面形态、 膜变形能力的变化规律与其胞内血红蛋白结构的变化有关：在pH 4.14,4.76,10.18时,红细胞胞内血红蛋白螺旋结构的减少、 疏水性氨基酸的暴露,血红素珠蛋白结合状态的改变,影响了血红蛋白结构的稳定性,从而导致红细胞的结构发生变化,其形态、 膜变形能力与正常值相比,变化结果显著。 而在pH 6.51和7.80下,血红蛋白的拉曼谱结果并未发现有上述变化情况,胞内血红蛋白的结构没有发生改变,红细胞的形态、 膜变形能力也接近于正常值。 在pH 5.49和8.76下,红细胞的表面形态和膜变形能力都有不同程度的变差,但其胞内血红蛋白的结构并没有改变,提示红细胞的形态和变形能力的改变可能是可逆的。 结果表明,pH协同血清白蛋白的作用下,血清白蛋白能对红细胞起保护作用,增强红细胞调节、 缓冲环境pH变化的能力。 研究结果全面地揭示了在模拟人体内血液中血清白蛋白与血红蛋白摩尔比值的情况下,红细胞结构功能的变化情况,不仅有助于阐明红细胞在有关生理、 病理状态下的结构与功能的变化,而且对其临床表现与有关防治对策都有重要的指导意义。     

血卟啉衍生物与人血清白蛋白作用的光谱特性研究

研究了用于光动力学诊断和治疗的光敏剂血卟啉衍生物(HpD)、人血清白蛋白(HSA)及其复合物的光谱特性。HpD与HSA作用形成HSA-HpD复合物大分子,其吸收光谱主峰(402 nm)和荧光发射光谱主峰(622 nm)与纯HpD的主峰相比都红移了8 nm以上。当使用对应HSA的激发峰228和279 nm及HpD的激发峰394 nm的光源,分别激发HpD-HSA混合体系时,发现体系中的HSA与HpD的吸收对复合大分子在622 nm的荧光发射均有贡献。当使用对应HpD-HSA吸收峰的激发波长402, 502, 537和570 nm,分别对HpD-HSA体系进行激发时,发现402 nm波长对该体系的荧光激发效率最佳,且吸收次峰537和570 nm对HpD-HSA的激发效率则明显高于纯HpD水溶液体系。实验结果表明,在肿瘤的临床诊断和治疗中选择合适的激发波长和荧光接收波长时,应考虑HpD与体内的特征蛋白结合后发生的光谱红移。该研究结果同时预示,当选用穿透能力较强的长波吸收次峰对肿瘤组织进行激发时,其激发效率应高于体外该波长激发单纯HpD水溶液体系的效率。     

芦丁对血清白蛋白构象的影响

用同步荧光光谱法和圆二色谱法研究了芦丁对牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)构象和功能的影响,同时用电化学方法研究了芦丁与血清白蛋白之间的结合作用。在体内随着芦丁浓度的增加,其与血清白蛋白结合时对血清白蛋白的构象无影响,但对血清白蛋白的二级结构有影响,导致α-螺旋结构减少,β-折叠结构增加,蛋白质的二级结构被破坏。电化学研究发现：芦丁的氧化还原电流随着血清白蛋白浓度的增加而明显降低, 表明芦丁与血清白蛋白发生反应,生成比较稳定的复合物。芦丁的氧化还原最大峰电位也随着血清白蛋白浓度的增加发生变化,峰电位差略增加,表明芦丁的氧化还原性随着血清白蛋白浓度的增加而增强。进一步证明芦丁在体内能够被血清白蛋白存储和转运。     

茜素黄GG共振光谱散射法测定人血清白蛋白

研究了酸性介质中茜素黄GG与人血清白蛋白(HSA)作用产生的共振光散射(RLS)现象.在pH=3.0附近RLS增强信号与一定浓度范围内的HSA呈线性关系,共振光特征峰在414nm.据此建立了一种测定HSA的新方法.线性范围0-5.0mg/L,检出限:24μg/L.     

光谱法研究硫唑嘌呤与人血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱法研究了巯嘌呤药物与人血清白蛋白(HSA)分子间的相互结合反应.测定了硫唑嘌呤与HSA反应的结合平衡常数为:4.13×106L/mol.结合位点数n为1-2.运用Baster偶极与偶极非辐射能量转移原理,测定了硫唑嘌呤与HSA结合距离为r=2.59nm.并用同步荧光法考察了硫唑嘌呤对HSA构像的影响,证实了硫唑嘌呤药物与人血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程.     

Mn（Ⅱ）,Co（Ⅱ）与HSA相互作用的荧光光谱研究

用荧光光谱法研究了生理ｐＨ和等离子点（ｐＨ＝５．３０）时Ｍｎ（Ⅱ）、Ｃｏ（Ⅱ）与ＨＳＡ的相互作用。根据Ｆｏｒｓｔｅ非辐射能量转移理论,得到了不同ｐＨ时Ｍｎ（Ⅱ）、Ｃｏ（Ⅱ）在ＨＳＡ中的第一强结合位置与Ｔｒｐ－２１４残基间的距离。这一结果远大于文献报道值,根据Ｍｎ（Ⅱ）、Ｃｏ（Ⅱ）在ＨＳＡ中的结合部位及ＨＳＡ的畴结构对这一显著差异进行了讨论。     

血清白蛋白与小分子化合物相互作用的荧光光谱研究

以牛血清白蛋白-Triton X-100和牛血清白蛋白-盐酸西布曲明两个体系为实例,考察了以血清白蛋白和小分子化合物为荧光检测对象所获得的相互作用信息的差异。发现两种方法获得的分子间结合常数差异显著,说明在以血清白蛋白为检测对象的传统荧光光谱法中,以色氨酸基团的荧光光谱所表达的信息来代表整个蛋白分子的相互作用信息是不准确的。文章提出了以荧光小分子化合物为检测对象的改进荧光光谱方法和荧光背景扣除方法,前者能全面表达相互作用过程中分子的整体信息,后者实现了荧光光谱交叠体系的荧光光谱法相互作用分析。     

醇引起酵母醇脱氢酶构象变化的光谱研究

应用紫外、荧光、ＣＤ谱研究了酵母醇脱氢酶经乙醇、正丙醇和乙二醇作用后的构象变化。结果表明２２０ｎｍ、２８０ｎｍ处的紫外吸收，３３６ｎｍ的相对荧光强度随醇浓度增大而加强。ＣＤ谱显示乙醇、乙二醇引起酶分子在２０８ｎｍ、２２０ｎｍ处的双负峰逐渐加强，正丙醇使２２０ｎｍ处负峰加强，２０８ｎｍ处负峰减弱并红移，直至完全消失。上述数据表明醇浓度增加导致酶分子结构逐步松散，同时伴随着活力的丧失。     

荧光猝灭法研究刚果红与人血清白蛋白的相互作用

在0.050mol.L-1的Tris-HCl缓冲介质中（内含0.10mol.L-1NaCl）,用荧光光谱法在模拟生理条件下,研究了刚果红与人血清白蛋白的相互作用。在不同温度和不同pH值下,刚果红对人血清白蛋白的荧光猝灭作用为静态猝灭机制。根据荧光猝灭双倒数曲线和位点结合模型计算出的刚果红与人血清白蛋白之间的结合常数相当,且结合常数与结合位点数都随温度升高而减小,在pH7.4时最大。根据热力学方法讨论了两者间主要的作用力类型,由重叠积分面积,得出两者的结合距离。由此可见,刚果红与人血清白蛋白之间有很强的结合作用。     

光谱法研究碳量子点与人血清白蛋白的相互作用

近年来,纳米材料对环境和人类健康的潜在风险已经引起了人们的广泛关注.纳米颗粒尺寸小、反应活性高,当其进入机体后很可能与体内的生物大分子相互作用,使其原来的理化性质发生改变,更容易被细胞识别、吞噬,进而对组织、器官等产生危害;作用过程中生物大分子也会受到纳米颗粒的影响,可能导致其生理结构受到损伤,并干扰其特定功能的正常执...     

用振动光谱的频率参数研究分子结构的构象变化 Ⅰ．芳香酯液晶分子的研究

通过振动光谱的频率参数，结合构象与键级的关系，观测了芳香酯液晶分子（一种高分子液晶模型化合物）在相态变化过程中的构象结构变化。认为这种液晶化合物在由晶态到液晶态的变化过程中是从酯基与苯环呈相互垂直状态到酯基与Ａ环是共平面状态而与Ｂ环不共平面即垂直的状态。     

血卟啉与人血清白蛋白结合作用特征的热力学研究

采用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了在模拟人体生理条件下不同温度时,血卟啉与人血清白蛋白结合反应的荧光猝灭光谱行为,根据Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数函数曲线计算了其结合常数在高温时要比低温时小;根据Fster能量传递原理计算出结合位点r=4.36,并根据热力学参数确定了它们之间的作用力类型主要为氢键和Van der Waals力,HP进入了HSA的疏水腔。     

稀土离子对人血清白蛋白动态结构性质影响的23Na NMR研究

利用²³Na作为探针磁核,通过弛豫分析发现:稀土离子与HSA络合后使蛋白质分子体积膨胀,链段活动性增加,表现为相关时间(τ_c)减小;HSA可能至少有了3个高亲和位点可络合稀土离子;稀土离子诱导的HSA动态结构变化在某种程度上具有可逆性,即当高亲和位上的稀土离子被螯合剂在取后,膨胀伸展的结构趋于恢复原有状态。     

马兜铃酸与人血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

采用荧光光谱技术研究了模拟生理条件下马兜铃酸与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.结果显示:马兜铃酸与人血清白蛋白有强的结合,结合位置与色氨酸残基间的距离r为2.5nm,二者间的结合是疏水和静电力共同作用的结果.