毛细管电泳技术快速检测牙周病原菌 |
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引用本文: | 李振庆,孟凡明,刘晨晨,张大伟,山口佳则.毛细管电泳技术快速检测牙周病原菌[J].分析试验室,2014(9):1009-1012. |
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作者姓名: | 李振庆 孟凡明 刘晨晨 张大伟 山口佳则 |
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作者单位: | 上海理工大学光电信息与计算机工程学院;大阪大学应用物理系; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(21205078);高等学校博士学科点专项科研基金博导类资助课题(20123120110002);上海市教育发展基金会曙光计划项目(11SG44);上海高校青年教师培养资助计划(51-13-302-102)资助 |
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摘 要: | 建立了毛细管电泳快速检测牙龈卟啉单胞菌(P.g)、齿垢密螺旋体(T.d)、福赛斯坦纳菌(T.f)3种牙周病病原菌种的方法。紫外分光光度法表明,采用无菌吸潮纸尖及PBS缓冲液可以实现牙周病原菌的快速有效提取。对提取的牙周病病原菌种做多聚酶链式反应(PCR)与多重PCR反应,最后以20 cm长,75μm内径的石英毛细管作为分离通道,分离电压4000 V,1.2%羟乙基纤维素(HEC,250 K)为筛分介质,牙周病病原菌菌种P.g,T.d,T.f PCR及多重PCR产物12 min内得到较好分离。结果表明,毛细管电泳与PCR技术相结合,可以实现牙周病原菌种快速鉴定,且检测限低至4.80×10-11ng/μL。方法已用于牙周病原菌菌种的快速检测。
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关 键 词: | 毛细管电泳 牙周病原菌 聚合酶链式反应 脱氧核糖核酸 |
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