| 微量生物样品中糖蛋白N-糖链电喷雾电离质谱分析前处理方法的建立 |
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| 引用本文： | 张英,刘影,刘洋,强珊,杨冰莹,黄琳娟,王仲孚.微量生物样品中糖蛋白N-糖链电喷雾电离质谱分析前处理方法的建立[J].分析化学,2016(2):265-272. |
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| 作者姓名： | 张英 刘影 刘洋 强珊 杨冰莹 黄琳娟 王仲孚 |
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| 作者单位： | 西北大学生命科学学院,西安,710069 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(Nos.31170773;31300678)资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (.31170773 |
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| 摘 要： | 基于电喷雾电离质谱检测技术,建立了一种可靠、高效、简单,适合于微量糖蛋白N-糖链解离、富集纯化的方法.以糖蛋白牛胰核糖核酸酶(Rib B)和卵清白蛋白(OVA)为模型蛋白直接酶解,比较了4种方法纯化酶解样品的效果.比较了直接酶解和经过聚偏氟乙烯(PVDF)膜富集后酶解微量复杂生物来源样品胎牛血清的酶解效果,最终建立了微量生物样品中糖蛋白N-糖链的质谱分析前处理方法.采用PVDF膜吸附复杂生物样品中的糖蛋白,N-糖苷酶F(PNGase F)酶直接在膜上完成糖链释放(37℃,24 h),采用微晶纤维素柱结合石墨碳柱对糖链进行富集纯化,用于微克级胎牛血清和健康人血清中N-糖链质谱分析的前处理.本方法通用性好,在微量生物样品糖链质谱分析检测的前处理方面具有一定应用价值.
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| 关 键 词： | 微量分析 糖蛋白 N-糖链 电喷雾质谱 前处理 |
Pretreatment Method for Detecting of N-linked Glycans of Glycoprotein in Micro-scale Complex Biological Sample based on Electrospray Ionization Mass Spectrometry |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Micro-scale analysis Glycoprotein N-Linked glycans Electrospray ionization mass spectrometry Pretreatment |
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