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尺寸排阻色谱柱上尿素梯度复性全长人PPAR-γ 总被引:1,自引:0,他引:1
建立尺寸排阻色谱柱上尿素梯度复性全长人PPAR-γ重组蛋白的方法。利用尺寸排阻色谱柱上尿素梯度除去变性剂直接复性变性蛋白。添加尿素和精氨酸抑制聚集以提高复性产率,加入Zn2+促进变性蛋白形成正确折叠。复性后,重组蛋白的尺寸排阻色谱保留体积增大;紫外光谱最大吸收波长从234.0nm变为280.8nm;基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱分析重组蛋白的完整性,测得分子量与理论值一致;放射配体受体结合饱和实验测得解离常数(Kd)为89±4nmol/L;复性产率为52.7%。结果表明本文所建立的方法能成功用于复性变性全长人PPAR-γ,获得可用于结构和功能研究的具有生物学活性的全长人PPAR-γ蛋白。 相似文献
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用微臭氧化-薄层层析法分析测定了复合催化剂AlCl_3/SbCl_3,在不同Sb/Al比、投料比、溶剂和温度等条件下的α-菠烯(M_1)/苯乙烯(M_2)共聚产物的构成,表明该复合催化剂可获得~100%共聚体,其中α-蒎烯链节含量F1可在30%~56%之间调控。在仅生成共聚体的条件下由Mayo-Lewis积分式首次测定了竞聚率。AlCl_3/SbCl_3和单独AlCl_3相比,r1增大,r2减小,r2/r1值降低了5~6倍,使不易共聚的M_1/M_2变为易于共聚,可制备M_1组分含量高的共聚体。确认该复合催化剂对M_1/M_2的优良共聚合性能在于阳离子聚合活性种的非质子和抗衡阴离子(团)的特殊结构和性质. 相似文献
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