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Quantitative study on La~(3+) influx mediated by sodium-calcium exchanger in human lymphocytes 总被引:2,自引:0,他引:2
Whether La3+ can enter human peripheral blood lymphocytes by the Na+/Ca2+ exchanger or not and the effect of La3+on the Na+/Ca2+ exchanger activity are examined by fura-2 technique. And that whether La3+ is sequestered by intracellular organelles (mainly endoplasmic reticulum and mitochondria) is studied by this method. La3+uptake is obviously stimulated by pre-treating the cells with ouabain and by removing extracellular Na+, and intracellular La3+concentration ([La3+]i) is directly proportional to its extracellular concentration ([La3+]o). But when [La3+]o exceeds 0.4 mmol/L, the 340/380 nm ratio of fluorescence is no longer varied and the maximum [La3+], is 1.5×10-12 mol · L-1. The higher concentration of La3+ (0.1 mmol/L) increases Na+/Ca2+ exchange-mediated calcium influx, but lower concentration (10 μmol/L) appears to block calcium influx. The results also suggest that cytosolic La3+ is transported by the ATP-dependent Ca2+ pump. Intracellular Ca2+ stores are depleted by ionomycin, and then ion 相似文献
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淋巴细胞膜上Na+/Ca2+交换操纵的Eu3+内流的荧光法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用Fura-2荧光浓度指示剂法、通过检测360nm激发荧光强度的变化,研究了Eu3+能否利用人外周血淋巴细胞膜上的Na+/Ca2+交换进入细胞。结果表明:用ouabain预处理细胞无Na+介质中测试,当加入Eu3+时,360nm荧光强度发生猝灭,且随着胞外加入的Eu3+浓度的增大而猝灭增强。表明在实验条件下Eu3+可以进入细胞。电压依赖性Ca 相似文献
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Fourteen new di-n-butyltin(IV)complexes of hydroxamic acids of the formula Bu2SnL2(HL-hydroxamic acids)were synthesized by the reaction of Bu2SnO and hydroxamic acids in dry toluene and ethanol media.The compounds were characterized by elemental analyses,molecular weight,IR and 1H NMR spectoscopy.The results indicate that n-Bu2SnL2 have distorted trans-octahedral structure.The antitumor activity in vitro against human A-549 tumor cells and P388 leukemia was presented,and their structure-activity relationship was discussed. 相似文献
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本文主要对国内稀土离子跨膜运输研究的进展作了评述,着重介绍了用荧光法及膜片钳法研究的结果,并对该领域的研究前景作了展望。 相似文献
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利用荧光浓度指示剂fura-2研究了La3+能否利用Na+/Ca2+交换系统进入人外周血淋巴细胞以及La3+Na+/Ca2+交换的影响. 并首次用此方法研究了La3+能否在细胞器(主要为内质网和线粒体)中蓄积. 实验结果表明, 用乌本苷预处理细胞并在无Na+介质中测试, 可明显观察到La3+跨膜进入淋巴细胞, 而且胞内La3+的浓度与胞外的La3+浓度成正比. 但当胞外La3+浓度大于0.4 mmol/L时, 不再观察到340/380 nm荧光比值的变化, 此时细胞内La3+浓度约为1.5×10-12mol/L. 当La3+浓度较大时(0.1 mmol/L)抑制Na+/Ca2+交换操纵的Ca2+的进入, 而较低浓度(0.01 mmol/L)时却刺激Ca2+进入. 另外从实验结果可推测La3+可以被依赖ATP的质膜钙泵泵出胞外. 胞内钙库用离子霉素耗竭后, La3+内流过程中再次加入离子霉素后, 可明显观察到340/380 nm荧光比值增大, 说明La3+在细胞器中有一定程度的蓄积. 在模拟胞内离子组分的缓冲液中(pH = 7.05), fura-2对La3+的检测限为10-12mol/L, 对Ca2+的检测限为10-8 mol/L, 并测得fura-2-La3+的络合比为1∶1, 表观离解常数为1.7×10-12 mol/L. 相似文献
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稀土纳米氧化物和稀土化合物的生物效应已引起人们的广泛关注.利用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT),流式细胞术法和激光共聚焦显微镜初步探讨了纳米Eu2O3和Eu3+对体外培养的人肝癌细胞HepG2生长的影响.结果发现,较低浓度的纳米Eu2O3对细胞生长没有明显影响,浓度达到600μg mL-1作用癌细胞仅24 h,细胞就停止分裂,表现为细胞被阻滞在S期,大量细胞坏死.利用激光共聚焦显微镜观察到纳米Eu2O3能进入活的HepG2细胞中.而Eu3+则在较低含量,即≤100μmol L-1时能较弱地抑制癌细胞的生长,细胞被阻滞在G0/G1期,并诱导细胞发生凋亡. 相似文献
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Na^+/Ca^2+交换介导的Nd^3+跨淋巴细胞膜的行为研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用Fura-2荧光浓度指示剂法对Na^+/Ca^2+交换介导的Nd^3+跨入外赂血淋巴 细胞膜行为进行了一系列研究。结果表明:当细胞形成向外的Na^+梯度时Nd^3+能 跨膜进入细胞,电压依赖性L-型Ca^2+通道对Nd^3+进入无贡献,提出了Na^+/ Ca^2+交换系统是Nd^3+进入细胞的主要途径;在安全浓度范围内进入胞内的游 Nd^3+浓度成正比,计算表明进入胞内的最大游离Nd^3+浓度为(3.67±0.32)× 10^-14mol·L^-1;当胞外pH值降低时进入胞内的游离Nd^3+浓度减小,胞内游离 Ca^2+浓度减小时进入的游离Nd^3+浓度略微增大,胞外Nd^3+和Ca^2+竞争Na^+/ Ca^2+交换位点;结果进一步推测进入胞内的Nd^3+可被质膜钙泵泵出胞外,初步实 验表明进入胞浆中的Nd^3+会在内质网中进一步累积,而在线粒体中不累积。 相似文献
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稀土离子跨人血红细胞膜的荧光法研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用Fura-2荧光浓度指示剂对红细胞的稀土跨膜作用进行了系列研究.结果表明,稀土离子不能通过完整的红细胞膜进入细胞内.通过与离子载体实验相对照,发现细胞ATP耗竭后,低浓度的稀土离子(5×10-6mol/L)不能跨膜进入ATP-耗竭红细胞.KCl去极化及加入电压依赖性钙通道刺激剂Bay-K8644对稀土离子的跨膜也没有促进作用.在Ca2+内流正常的情况下,低浓度稀土离子(5×10-6mol/L)对钙离子内流无影响.增大稀土离子浓度到5×10-4mol/L,用显微镜观察此时红细胞已开始溶血.在模拟胞内离子组分的缓冲液中(pH=7.05),比较了La3+,Eu3+和Ca2+对Fura-2的敏感程度.此条件下Fura-2对La3+和Eu3+的检测限分别为10-12和10-14mol/L,对Ca2+的检测限为10-8mol/L,并测得Fura-2-La3+(Eu3+)的络合比为1∶1,表观离解常数为1.7×10-12和4.95×10-14mol/L,表明用此法检测稀土离子跨膜行为相当灵敏有效. 相似文献