奥扎格雷对蘑菇酪氨酸酶的抑制动力学

抗血小板凝聚药奥扎格雷不仅抑制酪氨酸酶单酚酶活性,而且对二酚酶具有很强抑制。导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的奥扎格雷浓度(IC50)分别为1.35mmol/L和3.45mmol/L。奥扎格雷对单酚酶的抑制效应主要表现于酶催化反应的延滞时间有明显的延长。奥扎格雷对二酚酶的抑制作用表现为可逆的竞争性和非竞争性混合型抑制。     

含三氟甲基1,2,3-三氮唑衍生物对蘑菇酪氨酸酶活性的抑制动力学(英文)

研究表明,含三氟甲基1,2,3-三氮唑衍生物(TF-TZ)对蘑菇酪氨酸酶具有很强的抑制性:不仅抑制单酚酶活性,而且对二酚酶活性也是可逆性抑制,其半抑制浓度IC50分别为30.4和34.5μmol.L-1,并且单酚酶延滞时间随着TF-TZ浓度增加而延长.TF-TZ对二酚酶的抑制为抛物线型竞争性抑制,表明一分子的酶可以和两分子的TF-TZ相结合,从而形成两种酶-抑制剂复合物:EI和EI2,其抑制常数分别为76.9和9.71μmol.L-1.紫外-可见光谱表明,TF-TZ和酶相互作用后产成特征的"肩峰",说明TF-TZ能够作用于酶的活性中心.     

葡萄糖基N-异丙基丙烯酰胺共聚物合成及其温敏性

采用酶促法合成了可聚合的葡萄糖乙烯酯衍生物6-O-乙烯己二酰-D-葡萄糖(OVAG),通过自由基聚合法将N-异丙基丙烯酰胺和OVAG共聚,制备出了温敏含糖共聚物poly(OVAG-co-NIPAAm),通过1H NMR对聚合物的结构进行了表征,用凝胶色谱测定共聚物的相对分子质量。用可见光吸收法测定了poly(OVAG-co-NIPAAm)的低临界溶解温度(LCST),动态光散射测定了聚合物在水溶液中的流体力学直径,静态光散射测定了共聚物在水溶液中的均方旋转半径。结果表明,采用自由基聚合制备的温敏含糖共聚物在水溶液中自组装成近似球形的纳米粒子,其LCST由N-异丙基丙烯酰胺均聚物的32℃提高至39℃,粒径在60 nm左右,粒径分布较窄。     

尼龙亲和膜色谱法纯化半胱氨酸蛋白酶抑制剂

建立了一种快速、简便的分离半胱氨酸蛋白酶抑制剂的方法,尼龙膜经壳聚糖改性后,以木瓜蛋白酶为配基制备了一种新型的蛋白质分离材料,并研究了此分离材料的物理及化学性能。所得到的亲和膜上固定化木瓜蛋白酶的热稳定性提高,最适催化温度为55℃,最适pH值为8.0,米氏常数为353.8 g/L;将该亲和膜应用于半胱氨酸蛋白酶抑制剂的分离纯化,在对洗脱液、洗脱速度进行优化的基础上,成功的分离纯化出半胱氨酸蛋白酶抑制剂,纯化倍数为7.25倍。     

L-Cys/MPA共修饰CdTe量子点:制备、表征及其在细胞标记中的应用

以L-半胱氨酸(L-Cys)和巯基丙酸(MPA)为共修饰剂在水相中快速合成高质量CdTe量子点.通过紫外-可见分光光谱、荧光光谱、荧光寿命衰减曲线、透射电子显微图片、XRD图谱等相关方法对产物进行表征.调节L-Cys和MPA的摩尔比,对CdTe量子点的生长速率和光学特性有明显影响.结果证实:与单一修饰剂L-Cys或MPA相比,L-Cys/MPA共修饰CdTe量子点具有较快的荧光发射峰红移速率,且其粒径分布均一、稳定性强.50L-CdTe(L-Cys与MPA摩尔比为50%)的荧光量子产率达到66.4%,75L-CdTe(L-Cys与MPA摩尔比为75%)的荧光寿命为46.8 ns.细胞毒性实验证明75L-CdTe量子点对SiHa细胞毒性较小,细胞存活率为75%~95%.进一步将其用于标记细胞,表明75L-CdTe量子点能有效地对SiHa细胞进行荧光标记.L-Cys/MPA共修饰CdTe量子点具有良好的荧光特性和生物相容性,在生物医药领域具有重要的应用价值.     

木瓜蛋白酶的化学修饰及对其酶活力的影响

用不同酸酐对木瓜蛋白酶进行化学修饰, 以三硝基苯磺酸法(TNBS)测定修饰酶的平均氨基修饰度, 对修饰前后的木瓜蛋白酶分别纯化并通过UV-vis和IR对其结构进行了表征. 考察了温度、pH值和表面活性剂SDS对化学修饰的木瓜蛋白酶活力的影响, 并与天然木瓜蛋白酶进行了比较, 对天然酶和修饰酶进行了动力学研究. 结果表明, 化学修饰木瓜蛋白酶的最适反应温度为80 ℃; 最适pH值为9.0; 在SDS浓度为5 mg•mL－1时修饰酶酶活仍能保持在50%左右; 在所有酶中, 均苯四甲酸酐修饰木瓜蛋白酶的催化效率最高, 为2.442×102. 与天然木瓜蛋白酶相比, 化学修饰木瓜蛋白酶的热稳定性、耐碱性和耐洗涤性得到了显著提高.     

化学修饰木瓜蛋白酶的固定化及性质研究

在底物保护和无底物保护下,用丁二酸酐对木瓜蛋白酶进行化学修饰,以三硝基苯磺酸法测定修饰酶的平均氨基修饰度,以棉布为载体,戊二醛为交联剂,对修饰前后的木瓜蛋白酶分别进行固定化.考察了温度、pH和表面活性剂SDS对化学修饰的固定化木瓜蛋白酶活力的影响,并与固定化天然木瓜蛋白酶进行了比较.研究表明,化学修饰固定化木瓜蛋白酶的最适反应温度为80℃;最适pH为9.0;在SDS浓度为20mg/mL时酶活也仍能保持在40%左右;米氏常数为187g/L.与天然的固定化酶相比,化学修饰的固定化木瓜蛋白酶的热稳定性、耐碱性和耐洗涤性得到了显著提高.