ODN-铈配合物定位水解切断DNA的研究

合成了能定位水解切断DNA的ODN-铈配合物人工核酸定位水解切断试剂. 使用HPLC对5′-EDTA-P-10 mers ODN进行了表征; 运用荧光光谱研究了5′-P-10 mers ODN和单链DNA之间的杂交反应, 证实合成的人工核酸定位水解切断试剂能够识别底物DNA, 并与之结合; 电泳实验结果表明该人工定位切断试剂具有良好的定位水解切断单链DNA的效果, 并对人工定位切断试剂切断DNA的位点进行了探讨. 该人工定位切断试剂可作为核酸工具酶在分子生物学和遗传工程中广泛应用.     

杂交及切断过程的QCM实时检测研究(英文)

采用自组装技术,将 5′端标记有巯基的 20-merODN(oligo 1)以金 硫键形式牢固结合在 7. 995MHz的AT-切石英晶体的镀金表面,然后由石英晶体微天平实时检测了与碱基序列互补的 10 merODN (oligo 2)和 8 merODN(oligo 3)的杂交,同时还研究了稀土金属铈离子在温和条件下对DNA的水解切断作用.结果表明:应用QCM方法可能实时检测DNA的固定和杂交,Ce(IV)能随机切断单链DNA;但不能切断杂交形成的双链DNA,因此可利用杂交保护的方法对单链DNA实行定位切断.     

荧光光谱法研究PNA-DNA的杂交和解链

本文建立了一种以阳离子型荧光染料藏红 T(ST)作为荧光试剂的荧光猝灭新方法 ,ST首次被用于PNA- DNA杂交和解链的检测。实验结果发现当 PNA- DNA杂交形成双链时 ,可以在一定程度上猝灭 ST的荧光 ,而当双螺旋解链时 ,对 ST荧光的猝灭程度减小 ,逐渐接近于 ST本身的荧光 ,根据荧光强度的变化研究了 PNA- DNA的杂交和解链过程。通过 UV光谱实验证实了这种荧光猝灭由它们之间的静电作用以及 ST插入到双螺旋内部引起     

三核铜配合物[Cu_3L_2](ClO_4)_2(H_2L=1,3-双（2-羟基-1-苯基-亚甲基）-丙烷)的合成与对pBR322DNA的切断作用

利用席夫碱配体[H_2L = 1，3-双（2-羟基-1-苯基-亚甲基）-丙烷]与铜盐作 用，得到了配合物[Cu_3L_2](ClO_4)_2，并用X射线单晶衍射测定了其晶体结构。 研究了该三核铜配合物与质粒pBR322 DNA之间的相互作用，琼脂糖凝胶电泳实验结 果表明该配合物能够将pBR322 DNA从超螺旋构型切割成开环型和线型。同时，紫外 光谱实验可以推测，配合物在对pBR322 DNA进行切断时，它们之间在一种插入作用 。     

Tb3+荧光离子探针检测三链DNA的形成

Tb^3 本身具有荧光,Tb^3 和DNA结合后仍具有荧光,荧光强度不仅与DNA中碱基的种类有关,而且还与DNA是单链、双链还是三链有关。文章用Tb^3 离子作为荧光探针,检测了三链DNA的形成。实验结果表明：polydA和Tb^3 结合后的荧光强度大于polyd T和Tb^3 结合后的荧光强度。说明荧光强度和碱基的种类有关。实验结果还显示Tb^3 在与三链DNA作用后的荧光光谱的谱峰位置与单链及双链DNA的荧光光谱的谱峰位置基本相同,但是其强度差异明显。Tb^3 与单链DNA作用后的荧光强度最大,三链次之,Tb^3 与双链DNA作用后的荧光强度最弱。通过测定荧光强度的变化研究了三链DNA的形成和pH、金属离子对形成三链DNA的影响。pH中性和高价阳离子的存在有利于三链DNA的形成。