直接竞争酶联免疫吸附法测定饲料中沙丁胺醇

应用本实验室制备的对沙丁胺醇(SAL)具有高亲和力的多克隆抗体和酶标半抗原,采用包被抗体-酶标半抗原直接竞争模式建立沙丁胺醇的酶联免疫吸附分析(ELISA)法。在优化实验条件下,ELISA法检测沙丁胺醇的线性浓度范围为0.1~1.0×10~3μg/L,沙丁胺醇对抗体-酶标半抗原结合反应的抑制中浓度(Ic50)为14μg/L,相对标准偏差(RSD)为8.6%(n=5),定量检测下限(Ic_(10))为0.29μg/L。在猪饲料中分别添加沙丁胺醇标样10、50、250μg/kg,ELISA法检测的回收率分别为85%~108%、81%~92%和81%~102%,RSD(n=5)分别为9.1%、5.6%和8.9%,对饲料中沙丁胺醇的最低定量检测浓度为4.23μg/kg。利用高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法同步测定饲料中添加250μg/kg沙丁胺醇的平均回收率为89%(n=3),相对标准偏差为3.9%。