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目前磷酸化蛋白质组学研究中的主要技术是蛋白质酶解产生的磷酸化肽的质谱检测。但是实际样品中的磷酸化肽(特别是多磷酸化肽)很难被检测到。其原因普遍认为是由于质谱检测时,非磷酸化肽抑制磷酸化肽。但也有认为非磷酸化肽对磷酸化肽没有抑制作用。另外磷酸化肽之间是否存在离子抑制作用还没有报道。本文采用相同氨基酸序列的标准磷酸化肽和非磷酸化肽,将其单独和混合进行质谱检测,通过对比混合前后磷酸化肽的信号强度,证明了非磷酸化肽对磷酸化肽有离子抑制作用;单磷酸化肽对二磷酸化肽有一定的抑制作用,但不太显著;单磷酸化肽对三磷酸化肽、二磷酸化肽对三磷酸化肽均有显著的离子抑制作用。该研究为今后单磷酸化肽和多磷酸化肽的分段富集和检测提供了有力的证明。 相似文献
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近年来,偶氮苯类化合物的光学顺反异构现象已引起人们的广泛关注[1~7].在紫外光照射下,偶氮苯由反式结构转变为顺式结构,引起分子的偶极矩发生变化,导致分子的吸收光谱、尺寸及表面能等均发生变化[7].偶氮苯表面能的改变可引起其表面浸润性发生变化.据文献[1~4]报道,偶氮苯膜在紫外光照射前后接触角最大改变了11°.浸润性是固体表面的一个重要特性,主要受固体表面的化学组成和微观几何结构(粗糙度)影响[8~11].通常,与水的接触角大于150°的表面称为超疏水表面;而与水的接触角小于5°的表面称为超亲水表面.本文以2-(4-偶氮苯基苯氧基)丙烯酸… 相似文献
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糖基化蛋白对于生命体的生长发育, 免疫调节, 细胞识别粘附等具有重要意义, 而异常的糖基化表达与风湿关节炎、肿瘤、阻塞性肺病等疾病密切相关. 因此糖蛋白结构检测对于研究生命活动至关重要. 由于在复杂样品中糖肽含量相对较少, 加之非糖肽的离子抑制作用, 使得糖肽的质谱检测有一定的挑战性. 因此发展一种有效富集糖肽的方法是必要的. 本实验中我们选用氧化铝对糖肽进行富集研究, 并考察了影响氧化铝保留多肽的机理. 我们利用氧化铝, 从HRP酶解液中共获得16个糖肽, 从IgG酶解液中共获得12个糖肽. 与直接检测样品酶解液和经商品化材料Sepharose富集后再检测相比, 检测到糖肽的个数增多. 实验数据证明氧化铝富集糖肽具有较好的选择性和覆盖率. 相似文献
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利用TiO2富集、超滤膜滤过实现了选择性富集和分离磷酸化肽和含唾液酸的N-链接糖肽.首先选取截留分子量为1×104的超滤膜分离糖肽和磷酸化肽,然后利用酪蛋白和牛血清白蛋白的酶解物验证所建立的方法,该方法的最低检出限是0.16 pmol.将上述方法应用于肺癌患者的唾液检测,成功检测并鉴定到8个磷酸化肽和5个糖肽.本方法可有效提高磷酸化肽和糖肽检测的选择性和灵敏度,为疾病生物标志物的检测提供了新方法. 相似文献
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