固相时间分辨荧光免疫标记技术研究

通过固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂4,7-二氯磺基苯-1,10菲罗啉-2,9-二羧酸标记抗-乙型肝炎表面抗体(HBsAb)IgG实验,对于BCPDA标记蛋白质的方法进行了研究。结果表明：BCPDA在相对温和条件下能与蛋白质反应,反应后蛋白质的相对生物活性高于78％,标记比为23～55,蛋白回收率达60％以上。在一定条件下与铕离子形成稳定的BCPDA-Eu^3 (HBsAb)IgG标记物。利用自建的分析方法,测定了标记过程的有关参数。并对标记物的某些光学特性进行了研究。     

时间分辨荧光免疫分析的双向螯合剂-BCPDA的合成与表征(Ⅱ)

本文是在三步法合成用于时间分辨激光荧光免疫分析的4，7-二（氯磺酰基苯基）-1，10-菲罗啉-2，9-二羧酸（BCPDA）基础上，为提高产物纯度，探讨五步合成方法。本法经氯化、酯化、制备二钠盐、还在二羧酸、磺化，获得了目标产物--BCPDA。研究了中间产物重结晶条件和结构参数。并将五步合成目标产物与三步合成的目标产物的结果通过熔点、红外光谱、核磁共振氢谱、元素分析及其某些物理、化学性质进行了报道。与国外文献结果具有较好的一致性，正在进行的标记分析实验证实了BCPDA的双重功能。     

4,7-(氯磺酸基苯基)-1,10-菲啰啉-2,9-二羧酸-铕标记甲胎蛋白抗体

在合成BCPDA基础上 ,对甲胎蛋白抗体与BCPDA连接及与铕离子螯合条件进行了研究。BCPDA与甲胎蛋白抗体反应后 ,分离纯化最佳淋洗液为pH 9.1的 0 .1mol/L碳酸盐缓冲溶液 ,BCPDA用量为甲胎蛋白抗体量 (mol)的 12 0～ 16 0倍 ;反应时间为 30min。讨论了Eu3 + BCPDA AFP抗体螯合物的荧光光谱 ,最佳温育时间为6 0min ,体系pH值为 7.8的Tris HCl溶液。当Eu3 + 浓度为 10 -6mol/L时 ,BCPDA的检出限为 4 .3× 10 -11mol/L。