毛细管区带电泳法快速测定人血血清蛋白

人血血清蛋白电泳分析是临床上诊断多种疾病的常用生化指标 ,也是临床实验室检查的常规项目。目前采用的方法有醋酸纤维薄膜电泳和琼脂糖电泳 ,尤以前者为主。由于醋酸纤维薄膜电泳法操作繁琐 ,每一步骤均需手工完成 ,影响因素较多 ,初学者往往不易掌握 ,且测定的重复性较差。高效毛细管电泳是近几年来迅速发展起来的分离分析技术 [1,2 ]。用该技术分析人血清蛋白国内外虽有报道 ,但由于人血清中蛋白质组分甚为复杂 ,采用不同的分离方法和条件可出现不同数量的组分峰 ( 6、7个甚至 1 0个以上组分 ) ,与目前临床上常用的醋酸纤维薄膜电泳图谱…     

高效毛细管区带电泳法快速测定尿液中的肌酐

建立了一种快速测定尿中肌酐浓度的高效毛细管电泳方法。利用非涂层石英毛细管(64.5 cm×50μm i.d),以pH 2.5,0.1 mmol/L H3PO4作为电泳缓冲液,检测波长191 nm,用0.05 Pa压力进样4 s,在电压16 kV快速分离尿液中的肌酐,采用外标法定量。肌酐的迁移时间约为5.5 min,肌酐浓度在34.5~8840μmol/L范围内呈良好的线性(r2=0.999)。平均日内精密度为2.5%,日间精密度为3.0%。回收率94.1%~99.0%。与全自动生化分析仪碱性苦味酸速率法相比有良好的相关性(r=0.990,n=56)。高效毛细管电泳法测定尿肌酐可应用于临床样品的检测。     

信号转导抑制剂对TNF β诱导L929细胞凋亡的研究

本文采用FDA-PI荧光染色,DNA电泳和流式细胞仪等实验手段研究了本实验室自行重组并纯化的人TNF β对L929细胞的细胞毒效应,结果表明TNF β主要是诱导L929细胞以凋亡的形式死亡。实验还采用8种信号转导抑制剂,观察它们对TNF β杀伤L929细胞的影响,以探讨细胞凋亡的信号转导途径。初步研究表明：磷脂酶A2,Ca2+通道、丝氨酸蛋白酶的抑制剂能抑制TNF β对L929细胞的杀伤,而且抑制剂的持续存在能更有效地发挥这一抑制作用;相反地,蛋白激酶C和酪氨酸蛋白激酶的抑制剂可促进凋亡;而环加氧酶、磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂则对细胞凋亡不起作用。     

芯片式流通池用于顺序注射可更新表面荧光免疫法测定人血清中的IgG

采用芯片式流通池作为非均相免疫反应和原位固相荧光检测的场所,用双岔光纤将芯片式流通池与荧光光度计耦联,以双抗夹心式非均相免疫反应的模式,研究建立了测定人血清中IgG的顺序注射可更新表面非均相免疫分析新方法.     

顺序注射可更新表面固相荧光免疫法测定人血清中免疫球蛋白G

建立了采用芯片式微型流通池的测定人血清中免疫球蛋白G(IgG)的顺序注射可更新表面非均相荧光免疫分析法。将羊抗人IgG抗体固定于包被有蛋白A的Sephamse CL4B凝胶微珠,然后制备成固相抗体。用标记FITC的抗人IgG抗体作为第二抗体。固相抗体、血清试样和荧光标记第二抗体由顺序注射系统注入芯片式微型流通池,并在其中进行免疫反应生成夹心式抗体．抗原荧光复合物。荧光分光光度计通过光纤与流通池耦合测定截留于流通池中的抗体一抗原复合物荧光强度。一次测定完成后,微珠即被排出流通池。流通池经缓冲液清洗后即可进行下一次测定。体系经优化后,检出限为0．1mg／L IgG,分析速率达到11次／h。3．9mg／L IgG的日内和日间精密度(RSD)分别为1．7％和5．2％;校正曲线的线性范围为0．3—7．0mg／L IgG。所建立的方法已成功地应用于人血清中IgG的测定。