两个手性氧钒配合物[VO(Naph-Leu)(OMe)(CH3OH)] 和[VO(Naph-Phe)(OMe)(CH3OH)] 的合成、晶体结构和光谱表征

合成了2个新的手性L-亮氨酸萘酚醛和L-苯丙氨酸萘酚醛希夫碱氧钒配合物, [VO(Naph-Leu)(OMe)(CH₃OH)] (1)和[VO(Naph-Phe)(OMe)(CH₃OH)] (2)。X-射线单晶衍射分析表明, 1晶体属于正交晶系, P2₁2₁2空间群, 晶胞参数为:a=0.946 80(8) nm, b=3.246 3(3) nm, c=0.662 37(5) nm, V=2.035 9(3) nm³, Z=4, F(000)=864, R₁=0.046 3, wR₂=0.112 7, S=1.076。2晶体属于单斜晶系, P2₁空间群, 晶胞参数为:a=1.113 41(11) nm, b=0.724 09(6) nm, c=1.342 99(12) nm, V=1.047 95(16) nm³, Z=2, F(000)=464, R₁=0.035 8, wR₂=0.088 8, S=1.024。测定了它们的红外光谱、紫外光谱和圆二色光谱, 讨论了紫外吸收光谱和圆二色光谱性质。     

神经红蛋白突变体(F28Y,F106Y)的构建、 表达与表征

构建了神经红蛋白F28Y, F106Y的两种突变体, 并进行了表达、 纯化和谱学表征. 电喷雾质谱表明突变体蛋白的分子量与理论值一致. 氧化型和还原型F28Y及F106Y的紫外 可见吸收光谱与野生型相似, 仅氧化型F28Y的Soret 带有2 nm的蓝移, 说明这两种突变体蛋白仍保持六配位形式. F28Y的荧光最大发射峰明显红移(340 nm→347 nm), 表明其荧光基团更加暴露于极性环境中. 圆二色光谱表明, 突变体蛋白的α 螺旋含量降低且F28Y产生了β 折叠, 这是由于F28相对于F106则位于疏水腔外部且更加接近于溶剂表面所致. 热稳定性顺序为NGB>F28Y>F106Y, F106Y最不稳定, 是因为其与血红素间存在着较强的疏水作用, 突变使F106与血红素间的作用力减弱, 从而导致血红素在热变性条件下更容易从蛋白中解离出来.     

光谱法研究人胞红蛋白与铜(Ⅱ)离子的相互作用

胞红蛋白(Cygb)是近期在脊椎动物中发现的一种球蛋白家族成员,具有典型珠蛋白的“3+3”式的α-螺旋三明治折叠结构。利用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(CD)光谱法研究了Cu2+离子与Cygb的相互作用。结果表明,当Cu2+离子加入到Cygb溶液中后,Cygb在280 nm处的紫外吸收强度增大,说明Cu2+与Cygb发生了相互作用;Cu2+使Cygb的内源性荧光发生猝灭,其猝灭方式为静态猝灭。同步荧光光谱研究表明,Cu2+可使色氨酸和酪氨酸的微环境发生较小的改变,与酪氨酸相比Cu2+对Cygb的键合部位更接近于色氨酸。圆二色光谱研究表明,Cu2+对Cygb的二级结构未引起明显变化。     

圆二色光谱法研究环境因素对细胞红蛋白二级结构的影响

采用远紫外圆二色光谱法系统地研究了细胞红蛋白(cytoglobin, Cygb)的浓度、环境温度、溶液的pH值和溶剂性质对细胞红蛋白二级结构的影响.结果表明: 当Cygb浓度<1 μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,其α-螺旋含量>60%; 当Cygb浓度从0.3 μmol/L增大到2.0 μmol/L时,其α-螺旋含量迅速降低;当Cygb浓度>2.0 μmol/L时,其α-螺旋含量随浓度的增大变化很小(约30%).随着温度的升高,Cygb的α-螺旋含量逐渐减小,但既使温度达到368 K,它仍保持有20%的α-螺旋结构,说明该蛋白具有较高的热稳定性.在弱酸性和弱碱性溶液中,Cygb的二级结构都会有不同程度的破坏.在甲醇和乙醇中,Cygb的α-螺旋含量明显增加,这说明醇类可以诱导其α-螺旋的生成.     

亲和层析在蛋白质研究中的应用进展

文中介绍了生物、免疫、固定化金属离子拟生物几类常规亲和层析的原理及其在蛋白质分离纯化以及分析鉴定方面的应用（引用文献25篇）。     

脱辅基神经红蛋白热稳定性的光谱法研究

采用酸丙酮法制备了脱辅基神经红蛋白(apo-Ngb)。利用紫外-可见吸收光谱和圆二色光谱(CD)对apo-Ngb的热稳定性进行了研究。结果表明,在高温下apo-Ngb发生了变性,其二级结构遭到破坏,α-螺旋的含量减少。计算得到了apo-Ngb热变性的中点温度(61.8℃)和热力学参数(ΔH=93.1 kJ·mol-1,ΔS=277.8J·mol-1·K-1)。与Ngb相比,由于血红素辅基的去除,apo-Ngb蛋白肽链结构变得疏松无序,从而使apo-Ngb的热稳定性有所降低。     

ICP-AES测定赤泥中的16种元素

用电感耦合等离子体-原子发射光谱法(ICP-AES)测定了赤泥中Li、Na、K、Ca等16种元素,其RSD均小于5％.方法平均回收率在91.0％-109.4％之间,本法灵敏度高,结果准确并且多元素同时测定,可用于赤泥的分析研究中.     

光谱法研究细胞色素c氧化酶CuA结构域蛋白的稳定性

利用荧光光谱和圆二色谱研究了细胞色素c氧化酶CuA结构域蛋白的稳定性.结果表明,随着溶液pH值的升高,CuA结构域蛋白的稳定性降低.随着温度的升高,CuA结构域蛋白的二级结构遭到破坏.脱金属形式蛋白的热稳定性减小,表明双核金属铜中心的存在对CuA结构域蛋白的稳定性起重要作用.     

ICP-AES测定中草药三七中的金属元素

利用电感耦合等离子体-原子发射光谱法(ICP-AES)测定中药三七中的金属元素Na、K、Zn等14种元素,分析了ICP-AES校准曲线及各元素平均回收率和相对标准偏差(RSD).结果表明,三七中Na、K、Mg、Ca、Fe含量较高,分别为3189、7854、1339、4000、455μg/g,该法回收率在92.7％-105.1％之间,相对标准偏差≤3.58％.本方法灵敏度高,结果准确,并且可多元素同时测定,可用于中药分析研究中.     

氧钒配合物[VO（o-Van-Asn）（Phen）]·1.5CH3OH的合成、晶体结构及与DNA和BSA的相互作用

合成了一种新的L-天冬酰胺邻香草醛席夫碱和1,10-邻菲咯啉的氧钒配合物[VO(o-Van-L-Asn)(Phen)]1.5CH3OH(o-Van-L-Asn=邻香草醛与L-天冬酰胺形成的席夫碱,Phen=1,10-邻菲咯啉).利用红外光谱对其进行了表征,并通过X射线单晶衍射测定了其晶体结构.该晶体属于三斜晶系,P-1空间群,晶胞参数为:a=0.98990(10)nm,b=1.21591(11)nm,c=1.28349(12)nm,α=66.8180(10)°,β=83.816(2)o,γ=66.4150(10)o,V=1.2992(2)nm3,Dc=1.430 g cm-3,Z=1,F(000)=580,R1=0.0626,wR2=0.1631.通过紫外吸收光谱、荧光光谱、圆二色光谱(CD)和粘度测定等方法研究了该配合物与小牛胸腺DNA(CT-DNA)的相互作用.结果表明,配合物以插入方式与CT-DNA结合.光谱法研究该配合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用表明,它主要以静态猝灭方式使BSA的内源性荧光发生猝灭,可引起蛋白构象的变化.计算得到了其结合常数Kb和结合位点数n.