细胞色素c氧化酶可溶性结构域中Val162突变对蛋白结构和功能的影响

采用蛋白质工程的定点突变技术和UV-Vis,CD,荧光,EPR及快速动力学技术考察了与癌症相关的Val162的突变对细胞色素c氧化酶可溶性结构域的影响.研究发现,该突变导致了蛋白二级结构的转化和电子传递活性的降低,这为理解其致病机制提供了化学基础信息.     

激光散射及其在蛋白质溶液研究中的应用

简单介绍了激光散射这一现代技术的基本原理，综述了它在研究蛋白质的分子量、分子尺寸、形状及构象变化、分子的缔合和聚集等方面的应用。     

基于多肽与金属离子作用的一种高选择性Cd2+荧光比率传感器

利用固相多肽合成法合成了一种新的多肽,将该多肽与荧光基团Dansyl偶联制备了一种新的荧光化学比率传感器:Dansyl-Cys-Pro-Pro-Cys-Trp-NH₂。利用荧光光谱研究了它与金属离子的相互作用。结果表明,与其它13种金属离子相比该多肽对金属Cd²⁺有很好的选择性。它能特异性识别Cd²⁺,具有水溶性好,响应时间快等优点。该肽对Cd²⁺具有很强的键合作用,其结合常数为3.0×10¹¹ L²·mol^-2,检出限为11.5 nmol·L^-1。     

五肽Pro-Gly-His-Glu-Tyr的合成及与铜(Ⅱ)离子的作用

通过固相多肽合成法合成了一个新的五肽Pro-Gly-His-Glu-Tyr,电喷雾质谱法测得其分子量与理论值一致。利用荧光光谱法研究了该五肽与金属离子的相互作用。结果表明,Cu2+对该肽具有很强的荧光猝灭效应,而其他金属离子的荧光猝灭较弱。该肽对Cu2+的这种特异性作用是由其独特的氨基酸序列所决定的。荧光光谱研究表明,Cu2+对五肽的猝灭机理为静态猝灭,五肽与Cu2+形成复合物的结合常数Ka为5.54×104。     

ICP-AES测定中草药三七中的金属元素

利用电感耦合等离子体-原子发射光谱法(ICP-AES)测定中药三七中的金属元素Na、K、Zn等14种元素,分析了ICP-AES校准曲线及各元素平均回收率和相对标准偏差(RSD).结果表明,三七中Na、K、Mg、Ca、Fe含量较高,分别为3189、7854、1339、4000、455μg/g,该法回收率在92.7％-105.1％之间,相对标准偏差≤3.58％.本方法灵敏度高,结果准确,并且可多元素同时测定,可用于中药分析研究中.     

氧钒配合物[VO（o-Van-Asn）（Phen）]·1.5CH3OH的合成、晶体结构及与DNA和BSA的相互作用

合成了一种新的L-天冬酰胺邻香草醛席夫碱和1,10-邻菲咯啉的氧钒配合物[VO(o-Van-L-Asn)(Phen)]1.5CH3OH(o-Van-L-Asn=邻香草醛与L-天冬酰胺形成的席夫碱,Phen=1,10-邻菲咯啉).利用红外光谱对其进行了表征,并通过X射线单晶衍射测定了其晶体结构.该晶体属于三斜晶系,P-1空间群,晶胞参数为:a=0.98990(10)nm,b=1.21591(11)nm,c=1.28349(12)nm,α=66.8180(10)°,β=83.816(2)o,γ=66.4150(10)o,V=1.2992(2)nm3,Dc=1.430 g cm-3,Z=1,F(000)=580,R1=0.0626,wR2=0.1631.通过紫外吸收光谱、荧光光谱、圆二色光谱(CD)和粘度测定等方法研究了该配合物与小牛胸腺DNA(CT-DNA)的相互作用.结果表明,配合物以插入方式与CT-DNA结合.光谱法研究该配合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用表明,它主要以静态猝灭方式使BSA的内源性荧光发生猝灭,可引起蛋白构象的变化.计算得到了其结合常数Kb和结合位点数n.     

金属化合物与细胞组分的相互作用

本文综述了金属化合物与细胞膜的相互作用，详细介绍了金属离子对膜生物物理性质、生物化学性质、膜成份和膜结构的影响，并重点叙述了抗癌药物顺铂类配合物与细胞组分蛋白质的相互作用和对细胞功能的影响。     

细胞色素ｃ氧化酶ＣｕＡ结构域蛋白的荧光猝灭研究

近年来 ,有关细胞色素 c 氧化酶的研究取得了重要进展 [1] 。细胞色素 c 氧化酶是由多个亚基组成的复合酶分子 ,其核心亚基Ⅱ中含有可溶性 Cu A 结构域蛋白 ,它是一个高度离域化的混价双核金属中心结构 [Cu 1.5 -Cu 1.5 ],两个铜离子之间由两个 Cys-S - 桥联起来 ,这是生物体     

神经红蛋白突变体H64V与叠氮离子的作用

将64位组氨酸(His64)突变为缬氨酸(Val),构建了神经红蛋白(Ngb)突变体H64V基因并进行了蛋白的表达纯化,突变使Ngb的血红素Fe由六配位结构变成五配位结构.利用光谱法研究了突变体H64V与叠氮离子(N_3~-)的相互作用.紫外-可见吸收光谱表明,H64V与N_3~-键合后其Soret带吸收峰由406 nm红移至418 nm;荧光光谱表明N_3~-可使H64V的荧光发生静态猝灭.计算得到了H64V与N_3~-键合的平衡解离常数和热力学参数.另外,还研究了不同阴离子对H64V与N_3~-结合的影响,发现阴离子的存在减弱了N_3~-与H64V之间的结合力.     

重组人细胞红蛋白的表达纯化及谱学表征

以可溶性和包涵体两种形式表达纯化得到了重组人细胞红蛋白, 并比较了其谱学特征和热稳定性. 可溶性蛋白经硫酸铵分级沉淀, 再依次经Hiprep 16/10 Q FF阴离子交换柱、Hiload16/60 Superdex 75 凝胶过滤柱和 CM Sepharose FF 阳离子交换柱纯化, 得到电泳纯的包涵体蛋白; 包涵体蛋白经盐酸胍变性溶解、外加血红素重组和柱层析得到了电泳纯的可溶性蛋白. 电喷雾质谱表明, 以这两种形式得到的蛋白分子量相差153.0, 紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱均表明, 这两种形式的蛋白在血红素构象上存在差异, 其热稳定性也不相同.