电喷雾电离质谱法研究环肽对HIV-1调控区DNA的识别及其相关碎裂机理和稳定性

利用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和二级质谱(MS/MS)研究了六种结构不同的环五肽, 环七肽以及环十肽与HIV-1调控区DNA的非共价键相互作用. 在研究中比较了不同识别分子与靶序列DNA结合的强弱, 发现环七肽CP5对靶点DNA具有高亲合性的结合. 用MS/MS法研究了环肽与DNA复合物的碎裂机理; 用升温实验研究了其热稳定性, 发现与CP5结合后能提高HIV-1双螺旋DNA的热稳定性.     

无机盐水合物对有机溶剂中酶促寡肽合成的影响

必需水的存在是酶在有机溶剂中保持活性的关键。本文研究了自由水初始水含量对有机溶剂中α－胰凝乳蛋白酶(α-chymotrypsin)和嗜热杆菌蛋白酶粗品(thermoase)催化合成寡肽的影响。用无机盐水合物Na2SO4·10H2O和Na2CO3·10H2O代替自由水重复了上述反应。实验表明,足量的无盐水合物能在有机溶剂中可逆地失去自射所带的结晶水,因而能代替自由水来提代酶所需的"必需水",并有效地控制有机溶剂中酶促反应体系的水活度(αw)值,从而有利于肽键的形成。     

HOBt,HOOBt, HOSu与惰性氯代烷溶剂之间的反应及其对 多肽合成影响的研究

HOBt,HOSu,HOOBt是多肽合成中常用的试剂,它们常被用作羧基活化试剂和消旋抑制剂。首次发现HOBt,HOSu,HOOBt在碱的存在下可与氯代烷烃溶剂发生反应,并系统地研究了不同的反应条件对产率的影响和对多肽合成的影响。发现反应的产率与碱的用量,反应温度,反应物等因素有关,碱性越强,反应速度越快产率越高,HOBt较易反应,HOSu较为稳定,二氯甲烷易生成双取代产物,1,2-二氯乙烷易生成单代产物,所有产物均经硅胶柱层析分离纯化,共合成8个经合物并通过光谱鉴定。虽然在模型二肽BocAlaPheOCH3合成反应中检测到少量副产物的产生,但二肽的产率>82%。