尿样中核基质蛋白22的免疫电化学生物传感器研制

将(4,4',4',4')四羧基酞菁钴(CoTcPc)和HRP标记核基质蛋白22抗体(HRP-Ab-NMP22)一起固定在Au电极表面,构建了一种快速测定膀胱肿瘤患者尿液中NMP22抗原含量的安培免疫传感器(HRP-Ab-NMP22/Fe3O4/CoPc CME).实验表明:该传感器对NMP22抗原具有良好的电化学响应,HRP对H2O2电催化氧化电流I0降低,△I0与NMP22浓度在1.0～150ng·mL-1成线性关系,检测限则为0.5ng·mL-1.该传感器基于一次性竞争性免疫反应,较Elisa法提高了检测速度,有望用于膀胱肿瘤的迅速诊断.     

人原始生殖细胞的分离和体外培养

从4～10周龄药物流产胚胎的生殖嵴和肠系膜组织中分离原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs),培养在添加人重组白血病抑制因子(rh LIF)、人重组碱性成纤维细胞生长因子(rh bFGF)和Forskolin的小鼠饲养层细胞上.经过4～7 d培养,PGCs形成典型的鸟巢状集落.集落在传代过程中保持碱性磷酸酶活性,且胚胎阶段性特异抗原1(SSEA-1)、胚胎阶段性特异抗原3(SSEA-3)免疫荧光染色呈阳性.具有分化潜能的PGCs能在体外连续传代培养12代.结果表明从药物流产胚胎中分离的人类PGCs可以在体外培养成为具有分化潜能的多能性干细胞.     

甜菜黄脉坏死病毒RNA3和RNA4有生物活性体外转录产物及功能研究

甜菜黄脉坏死病毒RNA3和RNA4全长cDNA的合成是分别以Oligo-d(T)_(15)为引物合成第一链cDNA,cDNA的第二链的合成则分别应用RNA3和RNA4特异引物完成。全长双链cDNA分别克隆在pGEM3Zf(+)载体中,置于噬菌体Sp6启动子控制下。在体外以质粒DNA为模板应用“run off”系统及Sp6RNA Polymerase成功地合成了大量的具有高度生物活性的转录产物RNA3和RNA4。在两种转录反应系统中,以第一种方法即转录与加帽(capping)分步进行转录效率高,第二种方法(转录与加帽同时进行)转录效率较低,但转录产物侵染性更高。虽然在RNA3和RNA4转录产物的5′末端和3′末端分别含数目不同的非病毒核酸序列,但转录产物的活性并未受到显著的影响。应用这种具有高度生物活性的体外转录产物与该病毒Rg1分离物机械接种甜菜幼苗根毛,首次阐明了RNA3是导致甜菜丛根病的主要因素。     

聚合酶链式反应技术应用

聚合酶链式反应技术应用郭春沅，计新（吉林延边特产研究所延吉１３３００１）（吉林省延边师专物理系延吉１３３０００）聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａ－ｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是一种特异性ＤＮＡ体外扩增技术，现已成为基础分子生物学研究、基因...     

光纤药物原位溶出度/释放度监测仪实时监测复方氯唑沙宗片体外溶出度

研制了光纤-光学传感-药物溶出监测仪并应用于复方氯唑沙宗片的实时-原位体外溶出度.分支光纤的一端与光源相接,另一端与检测器连接,其公共端部探头浸入于盛于溶出杯中的溶解液中.借联机的计算机进行数据记录及处理,对复方氯唑沙宗片的组分对乙酰氨基酚和氯唑沙宗的回收率在低、中、高三个浓度水平进行了试验,结果依次为98.3%,102.3%和103.1%及108.6%,98.7%和97.7%,其相应的RSD值为1.0%,1.4%和0.4%及1.7%,1.6%及1.3%.应用此监测仪对药片的溶出全过程进行了监控,并显示了药物的溶解曲线,相关的溶出参数可随时提取.试验证明,使用该仪器可获得药物溶出全过程的真实情况的信息.     

二正丁基锡(Ⅳ)双(二茂铁硫代甲酸酯)配合物的合成、结构表征及其体外抗癌活性研究

以二茂铁硫代甲酸和二正丁基氧化锡反应，合成了未见报道的二正丁基锡新型配合物(n—Bu)2Sn(FeCOS)2[Fe=(η^5-C5H5)Fe(η^5-C5H4)]．通过元素分析、红外光谱和核磁共振(^1H，^13C，^119Sn)谱等分析手段对配合物的组成和结构进行了表征．用X射线单晶衍射分析法测定了该配合物的晶体结构．晶体属四方晶系，空间群P421m，晶胞参数α=2．3351(7)nm，6=2．3351(7)nm，c=0．5870(2)nm，V=3．2005(18)nm^3，Z=4，De=1．501Mg／m^3,μ（Mo Kα)=1．823mm^-1,F(000)=1464．最终可靠因子R1=0．0733，wR2=0．1173．配合物中锡原子与2个S原子、2个O原子和2个C原子形成扭曲的八面体几何构型．体外抗癌活性测试结果表明，该配合物对人体的白血病HL-60、结肠癌HCT-8、胃癌BGC-823和鼻咽癌KB等癌细胞均有很好的抑制能力．     

光度法测定枸橼酸西地那非及尿中西地那非的含量

枸橼酸西地那非(Sildenafil citrate)商品名为万艾可(Viagra)，是治疗男性性功能障碍药。目前测定西地那非含量的方法主要是HPLC，操作繁琐，仪器昂贵。本文在pH2．5-4．7的酸性介质中，发现乙基曙红(EE)与西地那非(SD)反应后，生成红色离子缔合物，其最大显色波长和最大褪色波长分别为550nm和520nm，表观摩尔吸光     

克拉霉素漂浮-生物粘附微囊的制备及性能研究

选用乳化-溶剂挥发法制备乙基纤维素载药微球(EMs), 并通过内部凝胶化法进行包衣制得海藻酸钠-乙基纤维素载药微囊(AEMs), 最后通过离子交联法进一步包衣制得壳聚糖-海藻酸钠-乙基纤维素载药微囊(CAEMs). 研究克拉霉素漂浮\|生物粘附微囊的制备工艺, 并考察微囊的体外漂浮性能、 粘附性能及体内滞留性能. 结果表明, CAEMs球形度较好, 药物包封率为72.3%~78.2%, 载药量为7.1%~12.7%. 在pH=5的醋酸缓冲液中, 6 h时的累积释放率为56.6%~70.6%, 漂浮率大于70%, 4 h时的体内滞留率为60.5%. CAEMs有望通过延长药物胃内滞留时间, 在临床用于根除幽门螺旋杆菌, 从而降低消化道溃疡的复发率.     

酶分子在试管内的定向进化及其在手性有机物合成中的应用

本文扼要介绍了当今改进酶分子性能的有效手段———分子定向进化技术的基本方法如易错PCR和DNA洗牌,以及派生的一些新技术的原理与进展,并列举了在手性有机物合成中一些成功的实例,为该领域的研究与应用提供了一些新的信息。