γ-聚谷氨酸在细胞冻存中的作用

无DMSO、无血清细胞冻存液在临床级细胞产品的冷冻保存中具有重要的应用价值。本文以K562细胞为模型,设置含10%(v/v)DMSO及胎牛血清的冻存液为阳性对照,含10%(v/v)甘油的RPMI 1640培养基冻存液为阴性对照组,含10%(v/v)甘油及0.01%(w/v)γ-PGA的RPMI 1640培养基冻存液为实验组,考察了在无DMSO、无血清细胞冻存体系中γ-聚谷氨酸对细胞的冷冻保护作用。将K562细胞以1×10^6cells/mL的密度分别悬浮在上述冻存液中,置于液氮冻存10周,检测复苏后K562的细胞复苏率、细胞形态以及复苏后细胞的扩增情况,以评判γ-聚谷氨酸在无DMSO无血清冻存液中对K562细胞的冷冻保护作用。结果显示,实验组的细胞复苏率为(83.00±3.00)%,明显高于阴性对照组的(70.33±5.51)%(p<0.05)和阳性对照组的(71.00±2.65)%(p<0.05);且实验组冻存后的细胞形态完整,冻存前后细胞的平均直径及圆度基本一致,细胞复苏后培养24h后的细胞活性为(88.83±14.29)%,明显高于阴性对照组的(67.51±5.20)%(p<0.05),与阳性对照组的(78.75±3.31)%没有显著性差异,同时复苏后细胞扩增的延滞期明显缩短。可见,在无DMSO、无血清的甘油冻存体系中添加γ-PGA可显著提高细胞的冻存效果,具有良好的实际应用价值。     

用同步荧光法研究细胞色素C在水溶液中的存在形态

用同步荧光光谱法研究细胞色素Ｃ在水溶液中的存在形态，发现细胞色素Ｃ中色氨酸残基的同步荧光光谱随浓度改变而发生变化，在较稀的溶液中，只观察到色氨酸残基的一个荧光峰，在较浓的溶液中也观察到一个荧光峰，而在这两个浓度之间时，这两个峰共存，可能反映了细胞色素Ｃ在不同浓度溶液中聚集状态的不同，当向存在两个荧光峰的溶液中加入不同浓度的脲，在一定脲浓度范围内，细胞色素Ｃ不发生变性，脲的作用使细胞色素Ｃ的单体浓度     

5-羟色胺诱导胃底平滑肌细胞钙火花

以自行合成的胞浆特异性Ca²⁺荧光探针STDIn-AM标记胃底平滑肌细胞, 采用激光共聚焦线扫描技术, 首次研究了5-羟色胺诱导胃底平滑肌细胞内钙释放的最基本单位钙火花现象, 探讨了其作用机制. 表明5-HT与存在于胃底平滑肌质膜上的5-HT₂受体结合而使之激活, 激活后的5-HT₂受体通过Gq/Ⅱ蛋白介导的IP₃/Ca²⁺和DG/PKC双信使途径调节钙池内钙释放, 内钙释放导致钙池耗竭随即又会促发胞外Ca²⁺内流；同时, 激活的5-HTM₂受体又直接引起细胞膜去极化, 从而激动L型钙通道促发外钙内流. 这两种因素促发的胞外Ca²⁺内流, 随即激活质膜附近SR上的ryanodine受体开启单个或多个RyR受体Ca²⁺通道, 从而引起局部内钙释放, 形成钙火花.     

稀土对人正常肝细胞株7701和人宫颈癌Hela细胞生长的影响及其诱导细胞凋亡的作用

采用MTT法考察了16种稀土元素在9×10-8~2×10-4mol.L-1浓度范围内对体外培养的人正常肝细胞株7701细胞和宫颈癌Hela细胞的生长的影响。结果表明,稀土对细胞生长的影响存在浓度依赖性;低浓度促进细胞增殖,高浓度抑制细胞生长;不同稀土离子对细胞作用强弱不同,稀土间存在轻重分组效应;不同细胞对稀土的响应不同,表现出稀土对正常细胞和癌细胞作用的某种选择性。Hoechst 33258标记细胞DNA,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪对稀土处理的肝细胞株7701进行形态学观察和DNA含量分析。结果表明,较高浓度的稀土作用后的肝细胞株7701出现了明显的凋亡特征,稀土表现出的细胞毒性作用,其本质是诱导细胞发生凋亡。     

N－5－四唑基－N′－芳甲酰基脲的合成及其生物活性

合成了15个新的含四唑的基的芳甲酰基脲类化合物，用IR，^1H NMR和元素分 析证实了它们的结构，并进行了初步的生物活性试验，生测结果证明一些目标化合 物具有优良的植物生长调节活性，其中N－5－四唑基－N′－芳甲酰基脲（2h)和N －5－四唑基－N′－对溴苯基甲酰基脲（2j)具有很好的生长素活性，2h,2j和N－ 5－四唑基－N′－对甲基苯基甲酰基脲（2m）具有优良的细胞分裂素活性。     

Synthesis and Bioactivity of Novel Fluorinated Heteroaromatic Ureas

In order to find new urea cytokinins, a series of novel fluorinated heteroaromatic ureas have been designed and synthesized. The crystal structure of 3g was further determined by single crystal X-ray diffraction to obtain the structural feature of this class of urea compounds. The preliminary bioassay showed that some title compounds have good cytokinin activity.     

内皮素、血管紧张素-Ⅱ和心钠素对血管平滑肌和心肌细胞增殖的影响

本工作应用细胞培养、~3H-胸腺嘧啶核苷掺入和C-fos原癌基因斑点杂交等方法,观察到内皮素和血管紧张素-Ⅱ可促进离体培养的血管平滑肌细胞和心肌细胞的DNA合成和增殖;内皮素和血管紧张素-Ⅱ还可刺激血管平滑肌细胞C-fos原癌基因的表达;心钠素可拮抗内皮素和血管紧张素-Ⅱ的上述效应。     

芽孢杆菌模式菌株细胞极性脂组分的分析

通过双相薄层层析对14株芽孢杆菌模式菌株的细胞极性脂组分进行测定，结果表明大多数芽孢杆菌含有磷脂乙醇胺，磷脂酰基油和含糖的磷酸类脂，获得的极性脂图谱分成5种不同的类型，不同属的芽孢杆菌其细胞极性脂的类型不同，而同一属中不同的种，其极性脂图略有差异，实验结果一方面表明极性脂可以作为芽孢杆菌化学分类的重要指征，同时也为芽孢杆菌的化学分类填补了数据。     

人胎盘的生殖内分泌学研究——Ⅱ.细胞滋养层细胞的激素分泌功能

本文采用了无血清培养技术,研究了细胞滋养层细胞在体外分泌hCG、孕酮、雌激素、cGnRH和β-内啡肽的功能,在8天的培养中发现,细胞滋养层细胞在培养24h去除内源激素后能持续地分泌少量的hCG;与此不同,孕酮的分泌量逐日上升,第6天的孕酮分泌量为第1天的两倍;在外加雌激素的前身物雄烯二酮的情况下,细胞能合成雌激素,其产量亦是逐日上升,反映出细胞芳香化酶活性的不断提高,这种酶活性的提高与雄烯二酮的存在与否无关;在两种滋养层细胞培养中,唯有细胞滋养层细胞培养液中测得有cGnRH,产量以第2天为最高,接近4pg/10~5个细胞,合体滋养层细胞在离体下能分泌β-内啡肽,但其产量逐日下降,与此相反,细胞滋养层细胞的培养液中不但测到β-内啡肽的存在而且其含量在培养4—6天间明显上升。