多合一真菌毒素免疫亲和柱的制备及其应用

以rProtein A-琼脂糖凝胶为载体,同时偶联抗黄曲霉素B1( AFB1)、玉米赤霉烯酮( ZEN)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇( DON)单抗,制备了AFB1-ZEN-DON三合一免疫亲和柱,并对非特异性吸附、柱空白、柱容量、柱效及样品加标回收率等指标进行评价。结果表明,0.25 mL胶对应的柱容量分别为：AFB1295 ng,ZEN 905 ng,DON 2342 ng;柱空白为0;rProtein A-琼脂糖凝胶(0.25 mL胶)对3种毒素的非特异吸附率均低于8%,3种毒素不同浓度的平均柱回收分别为97.4%、98.0%和98.4%。通过优化条件,选择80%甲醇-水(80：20, V/V)为提取溶剂,PBST稀释;FAPAS质控样本经不同批次三合一亲和柱净化后测定结果接近靶心值。制备的三合一免疫亲和柱能满足食品及饲料样品的前处理,可替代常规单一亲和柱,为多种毒素的一步富集、净化、检测奠定基础。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中9种霉菌毒素及其代谢物

应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,建立了同时检测饲料中9种霉菌毒素及其代谢物的分析方法。样品加入NaCl经乙腈-水(85∶15)振荡提取后,用TC-M160多功能净化柱净化,氮气吹干,用1mL乙腈-水(1∶1)定容,Agilen C18色谱柱(150×2.1mm,3.5μm)分离,采用正负离子同时扫描的多反应监测模式进行检测,外标法定量。方法检出限为0.11~0.60μg/L,在2.0~100.0μg/L基质添加浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数r0.998。5.0~50.0μg/L加标范围内回收率为67.0%~103.5%,相对标准偏差15%。该法简便、快速、灵敏度高,符合对饲料中霉菌毒素的检测要求,可为相关检测提供技术支持。     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定六堡茶中黄曲霉毒素B1的含量

六堡茶属于后发酵茶,由于采用高温、高湿渥堆发酵工艺,容易受到黄曲霉毒素B₁污染而影响饮用安全,而目前专门针对六堡茶中黄曲霉毒素B₁检测的报道较少,因此提出了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定六堡茶中黄曲霉毒素B₁含量的方法。取2.50 g过筛的茶叶样品,用2.0 mL水润湿后,以20 mL含1%(质量分数)甲酸的乙腈溶液提取。振荡、离心后,分取1.0 mL上清液,以250 mg无水硫酸镁、15 mg HC-C₁₈吸附剂、80 mg N-丙基乙二胺净化。振荡、离心后,上清液过0.22μm有机滤膜,取续滤液进行测定。以0.1%(质量分数)甲酸溶液-乙腈为流动相体系进行梯度洗脱,分离后的黄曲霉毒素B₁经电喷雾离子源正离子模式扫描后,采用多反应监测模式检测,外标法定量。结果显示：黄曲霉毒素B₁标准曲线的线性范围为1.44～14.40μg·L^-1,检出限(3S/N)为0.03μg·kg^-1;按照标准加入法对空...     

基于高效液相色谱-三重四极杆质谱联用方法评价透析器对蛋白结合类尿毒症毒素的清除效果

建立了一种评价透析器对硫酸吲哚酚、硫酸对甲酸和马尿酸3种蛋白结合类尿毒症毒素(PBUTs)清除效果的高效液相色谱-三重四极杆质谱联用方法。配制与透析患者体内PBUTs浓度相当的模拟液代替血液,进行透析模拟治疗,取透析前后的模拟液作为待测样品。样品经乙腈沉淀蛋白和超滤离心处理后,采用Hypersil GOLD VANQUISH C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱分离,以5 mmol/L乙酸铵溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,负离子选择反应监测(SRM)模式扫描,内标法进行定量分析。3种PBUTs在25～1 000 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99,定量下限为25 ng/mL;在75、250、750 ng/mL加标水平下,回收率为92.5%～114%,日内、日间相对标准偏差(RSD)均小于5.0%,基质效应为80.6%～105%。该方法成本低、前处理简单、分析速度快、回收率高,适用于透析器对PBUTs清除效果的评价。     

UPLC-MS/MS测定海水、悬浮颗粒物及沉积物中18种藻毒素

采用固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）同时检测18种海洋藻毒素,包括原多甲藻酸贝类毒素（AZAs）、裸藻毒素（BTXs）、太平洋雪卡毒素（P-CTXs）、鳍藻毒素（DTXs）、米氏裸甲藻贝类毒素（GYM）、刺尾鱼素（MTX3）、大田软骨酸毒素（OA）、扇贝毒素（PTX2）、螺环内酯毒素（SPX1）及虾夷扇贝毒素（YTXs）。海水（1 L）或悬浮颗粒物及沉积物（1 g）的超声萃取液经Agilent Bond Elut C18(500 mg/6mL)固相萃取柱净化萃取后,在洗脱液中加入10%丙三醇-甲醇溶液以减少目标物损失。以95%乙腈水和水（两相均含有0.1%甲酸和2 mmol/L甲酸铵）为流动相,目标物经Phenomenex Kinetex C18色谱柱（100 mm×2.1mm i. d.,1.7μm）分离,采用电喷雾串联质谱多反应监测模式下正、负离子同时检测,外标法定量。18种藻毒素在6 min内分离良好,在线性范围内的相关系数为0.991 1～0.999 9,定量下限为0.05～250 pg/L（或pg/g）。三水平六平行的加标回收率为77.4%～119...     

Two new antitumor diterpenes from Pinus sylvestris

Two new diterpenes, 15-ethyl-18-methyl pinifolate （1） and 18-hydroxy-labda-8（17）, 13E-dien-15-acetate （2）, were isolated from the needles of Pinus sylvestris. Their structures were elucidated by spectroscopic methods, including 2D-NMR spectra. Compound 1 exhibited the significant cytotoxic activity against the human carcinoma cell lines Hela, SK-N-SH and BEL-7402 in vitro.     

Synthesis and cytotoxic activity of novel curcumin analogues

Five novel curcumin analogues bearing different substituents at 4-position of phenyl group were synthesized. Their structures were confirmed by NMR and HRMS spectrum. Their cytotoxic activities against six tumor cell lines were tested by the standard MTT assay in vitro. The results indicated that four analogues （1A-1C, 1E） with solubilizing moieties showed selective potent cytotoxicity against HepG2, HeLa and CT26 cell lines, and analogue 1A and 1C exhibited more potent cytotoxicity than curcumin against CT26 cell line. It was suggested that introduction of appropriate substituents to 4-position of phenyl group might be a potential option for structural modification of curcumin.     

Cytotoxic Diarylheptanoids from Pericarps of Juglans Cathayensis Dode

A novel diarylheptanoid, named Jugcathanin（1）, along with two known diarylheptanoids（2,3）, were isolated from the fresh pericarps ofduglans Cathayensis Dode. A known triterpene（4） and a known aphthaoquinone（5） were also isolated from the plant. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic studies. All the compounds exhibited moderate cytotoxicities against human Hela, HepG2, and HL-60 cell lines.     

基于铂纳米颗粒@金属有机骨架纳米模拟酶的无标记电化学赭曲霉毒素适体传感器的构建

以具有类过氧化物酶性质的Pt NPs@Mn-MOF纳米复合材料作为电极基底, 采用丝网印刷电极构建了一种无标记型电化学适体传感器, 用于赭曲霉毒素(OTA)的检测. 利用Pt NPs@Mn-MOF的模拟酶特性, 将其作为电极基底用于捕获OTA适体链, 同时催化H₂O₂还原产生电流响应信号. OTA的引入会减少纳米酶的催化活性位点, 从而导致电流信号降低. 在0.01~300 ng/mL范围内, 随着OTA浓度的增加, 电流响应值逐渐降低; 采用计时电流法检测电流响应信号, 从而间接实现了对OTA的定量检测. 此外, 该生物传感器通过U盘式小型工作站进行检测, 不仅可与电脑连接进行检测, 还可与手机连接进而实现实时检测, 并且其检测灵敏度高、 重现性好, 检出限低至3.33 pg/mL(S/N=3). 该传感器可用于真实玉米样品中OTA的检测, 在真菌毒素现场检测中展现出潜在的应用价值.