氨基功能化大孔SiO2固定化漆酶

在溶剂热条件下,采用后嫁接法对新型大尺寸Si O2大孔材料进行氨基化改性,以氨基修饰的Si O2大孔材料为载体,借助交联剂戊二醛(GA)使诺维信工业漆酶固定化.研究结果表明:在GA质量分数为3%,p H值为5,漆酶质量浓度为30 mg·m L-1条件下固定化4 h制备得到的固定化漆酶最优,活力达到111.4 U·g-1;比较固定化漆酶和游离漆酶的性质发现,固定化漆酶p H稳定性和热稳定性均优于游离漆酶,固定化漆酶重复使用性好,与底物反复操作10次后,相对活性仍保持70.8%.     

三种形态的壳聚糖固定化脲酶的研究

以戊二醛为交联剂制备了3种固定化载体，即粉末状(I)，凝胶状(Ⅱ)，海棉状(Ⅲ)，并测定了固定化酶的特性．结果显示：固定化脲酶I，Ⅱ，Ⅲ的最适pH都是6，而游离酶的最适pH为7；固定化腮酶I，Ⅱ，Ⅲ的最适温度分别为55，55，45℃，游离酶为50℃；固定化酶I，Ⅱ，Ⅲ的表观米氏常数Km分别为2．78，14．5，34．5mmo1／L，游离酶的Km为55．5mmol/L．以上结果并结合固定化酶pH耐受性及贮存稳定性可知，凝胶状(Ⅱ)固定化载体更适于酶的固定化．     

米曲霉菌体细胞固定化及DL-蛋氨酸的光学拆分

用亚硝基胍对产氨基酰化酶的米曲霉(Aspergillus oryzae)3042进行诱变,经过筛选获得诱变菌株3042-5,再进行自然分离后得到了一株高产菌株3042-5-5a,其自由酶活力提高了215-7％-采用此菌株进行了固定化细胞酶法拆分DL一蛋氨酸(DL-Met)的研究,得到了最好的固定化条件为8％明胶包埋,0-1％戊二醛交联12h-制得的固定化细胞酶活力为81-99u／g-固定化细胞酶的最适作用温度为65℃,最适作用pH为8-0-用固定化细胞装柱,将连续拆分得到的产物用离子交换法进行分离精制,L-蛋氨酸盐酸盐的得率为理论产值的69-4％。     

pH敏感相分离的固定化酶的制备和性质

报道了一种新的制备溶解性可调节的固定化酶的方法．先将木瓜蛋白酶与Ｎ－羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯（ＮＡＳ）反应，再利用自由基溶液聚合反应，制备了ｐＨ敏感相分离的固定化木瓜蛋白酶．考察了固定化过程中的ｐＨ值、反应时间及给酶量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响，同时还测定了单体配比对固定化酶临界ｐＨ值的影响．这些固定化酶均具有较敏感相分离的特性，兼有溶液酶和固相酶两者的优点．     

在有机介质中固定化脂肪酶反应特性及其动力学研究

采用酶工程固定化技术,研究了固定化脂肪酶在生物反应器的有机介质中的反应特性及其催化动力学,探讨了脂肪酶水解植物油脂制备脂肪酸反应中的最适固定化载体、底物和反应条件.结果表明最适酶为酵母脂肪酶;最适固定化脂肪酶载体为硅藻土Celite545;最适底物为樟核油和棕榈油;最适反应条件是500 r/min,pH6.5,35℃,底物浓度60%.动力学研究结果表明Km2.35×10-2mol/L,Vm=0.75mol/L.min.     

固定化微生物在降解含油污水中的应用

通过活性炭吸附前后菌液浓度的变化测定了活性炭在25℃时对石油烃降解菌(W-2)的动态吸附量.考察了不同的固定化方法、交联剂的pH和包埋菌的量对固定化微球的物理性质和降解效果的影响.实验结果表明,直接包埋法优于先吸附后包埋固定法,在25℃交联24h时,最佳固定化条件为:交联剂溶液的pH值为5～6,包埋菌液与凝胶剂溶液体积比为1∶5,而且,包埋无机盐离子能加快固定化W-2恢复活性,并利用扫描电镜观察降解前后微球的表面结构.在含油量为300mg/L的无机盐培养基中,游离W-2适应的pH范围为7～8、盐度为3%左右,固定化W-2适应的pH范围为6～9、盐度范围为2%～5%,比游离W-2的适应范围变宽;游离W-2降解率最高达到40%左右,固定化W-2能达到70%以上,原油降解率提高了30%以上.     

硅烷化磁铁粉固定胰蛋白酶的研究

分别以硅烷化磁铁粉、硅烷磁化脱乙酰几丁质及脱乙酰几丁质作载体,甲醛或戊二醛为交联剂,对胰蛋白酶的固定化条件及所制备的固定化酶的性质进行了研究．研究了载体种类、交联剂和ｐＨ值以及载体与酶比例等因素对胰蛋白酶固定化的影响．研究了不同载体固定胰蛋白酶的特点,证明以硅烷化试剂和甲醛作交联剂的硅烷化磁铁粉作胰蛋白酶固定化的载体具有明显优点,所制备的硅烷化磁铁粉固定化胰蛋白酶酶学性质明显优于可溶性胰蛋白酶     

壳聚糖固定化胰蛋白酶的制备及理化性质研究

采用壳聚糖吸附和成二醛交联的方法,将胰蛋白酶固定于壳聚糖上．初步探讨了壳聚糖的脱乙酰度、交联剂用量及给酶量对固定化效果的影响,并对固定化酶的理化性质进行了研究．结果表明,用88％脱乙酰度壳聚糖0．2g,5％戊二醛2mL,8mg胰蛋白酶固定化效果较好;固定化胰蛋白酶的热稳定性较天然酶有较大提高,最适反应温度70℃,较天然酶提高了25℃;最适pH为7．0;表观米氏常数K’m为0．24％,天然酶Km为1．16％;室温下酪蛋白的半衰期为41d．     

有机溶剂中固定化脂肪酶催化水解植物油脂的研究

研究了在有机溶剂中固定化脂肪酶对樟核油、棕油水解反应的催化作用,考察了有机溶剂／水、固定化酶量、反应时间等因素对水解反应的影响。实验结果表明：在３７℃时,水解樟核油的最佳条件是有机溶剂／水９８％、固定化酶量０．０２ｇ／ｇ油、反应时间６ｈ,而水解棕榈油的最佳条件是温度３５℃、有机溶剂／水９５％、固定化酶量０．０２ｇ／ｇ油、反应时间４ｈ。     

中性蛋白酶产生菌0031菌株的筛选及其产酶特性的初步探索

我们从9株水解圈比值(水解圈直径/菌落直径)较大的(一般在7以上)初筛株中,经摇瓶复筛,筛选出一株中性蛋白酶产生菌0031菌株.经初步观察其培养特征较接近于枯草芽孢杆菌(A.S.1398),但其发酵液在盘状电泳上的酶谱,有别于枯草芽孢杆菌,其产酶的摇瓶发酵培养基为:豆饼粉3%,玉米粉2%,麸皮3%,KH_2PO_40.03%,Na_2HPO_40.4%,pH 8.0(消毒前).在50 ml(每500 ml 三角烧瓶)的装量,旋转式摇床(转速220次/分偏距2.5cm)温度28℃的条件下发酵,经34—38小时,酶效价稳定在2000单位左右(测定反应温度30℃)最高效价可达2330单位.在该菌株的产酶特性的探索过程中,我们发现1.适当的加大通气量和提高 pH 能提高产酶量和缩短发酵周期,但美中不足的是酶高峰期较短促,较不利于在发酵过程中控制产酶高峰点.2.提高发酵温度(30℃以上)略有抑制产酶的趋势或有明显的酶高峰期推迟的现象.3.Zn~艹和 Ca~艹(试验浓度分别为 ZnSO_40.005%和 CaCl_2 0.3%)对产酶无促进作用.根据目前所表现的生产性能,0031筛选株是理想的,值得联系实际目的,进一步研究提高其产酶能力.     

固定化假单胞菌产L-多巴

选择海藻酸钙和聚乙烯醇凝胶为固定化载体包埋假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．），以提高该菌以Ｌ－酪氨酸为底物生产Ｌ－多巴的效率．海藻酸钙和聚乙烯醇固定的假单胞菌分别将发酵周期缩短了８和１４ｈ．半连续发酵的结果表明，海藻酸钙和聚乙烯醇固定化细胞分别能重复使用５次和１４次，Ｌ－多巴生产效率比游离细胞分别提高了１６％和１６０％．聚乙烯醇固定化细胞经过热处理和在生理盐水中振荡处理可明显提高Ｌ－多巴的生产效率和产量，过高的底物加入量不利于固定化细胞的重复使用     

黑曲霉脂肪酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

根据黑曲霉F044脂肪酶N-端氨基酸序列，运用生物信息学方法，找到与黑曲霉脂肪酶基因同源的候选基因A84689．根据该基因序列，设计引物直接经RT—PCR扩增得到黑曲霉脂肪酶全长基因anl．anl全长1044bp，含3个内含子，编码297个氨基酸（含信号肽27个氨基酸），与其他脂肪酶基因没有明显的同源性．将成熟脂肪酶基因连接到pPIC9K载体上得到重组表达质粒，转化P．pastoris GSll5．脂肪酶基因在P．pastoris GSll5中实现了分泌性表达．     

纳豆菌细胞包埋材料的选择

以海藻酸钠（SA）和聚乙烯醇（PVA）为包埋材料，采用固定化细胞技术对纳豆菌生产纳豆激酶进行了研究。研究发现，在PVA中加入SA进行细胞包埋可获得渗透性能好强度高的固定化细胞，通过正交试验进一步确定：当PVA的浓度为11％，SA的浓度为1％，硼酸的浓度为5％，CaCl2的浓度为6％时，固定化细胞的强度最好，可反复使用6批次，活性也很高，产生的纳豆激酶酶活溶纤圈直径积达88mm^2／15μL。     

硼上去烃化反应中的共生效应

考察三（２－苯并呋喃基）硼烷、三（２－呋喃基）硼烷及三（２－噻吩基）硼烷被某些β－二酮（乙酰丙酮、二苯甲酰基甲烷、二茂铁基甲酰丙酮）去烃化的能力，及其产物β－二酮螯合物在电子电离质谱反应中的再去烃化差异．结果证实，受共生效应支配，共生性配体２－苯并呋喃核及２－呋喃核比非共生性配体２－噻吩核均较难从硼原子上裂去．     

相转移催化合成对苯乙炔聚合物(PPV)发光材料中间体1，4 二乙氧基苯的研究（PartⅠ）

近年来二烷氧基取代对苯乙炔聚合物(PPV)发光功能材料广泛应用于液晶彩电、电脑、飞机彩色液晶显示屏中,本文研究了利用相转移催化反应在不同的催化剂反应条件下,合成二烷氧基取代对苯乙炔聚合物(PPV)发光功能材料的中间体1,4-二乙氧基苯,在氢氧化钠及催化剂HA-1存在下,对苯二酚与硫酸二乙酯于60～65℃反应3h条件下合成1,4-二乙氧基苯,产品收率达84%以上.对不同的催化剂的使用和反应时间进行了条件优化,对产品1,4-二乙氧基苯的IR谱图、1 H-NMR谱图进行了确认和详细分析.     

固定化新月菱形藻的制备及其对N、P吸收的影响

为优化固定化新月菱形藻(Nitzschia closterium)在污水中去氮、磷的效果, 以褐藻酸钠为固定化载体, 采用单因子试验方法, 研究了不同包埋藻细胞密度(0、0.27×107、0.81×107、1.35×107、1.89×107、2.43×107 cells?mL-1), 不同藻球直径(2.5、3.0、3.5、4.0mm), 3% CaCl2溶液不同加固时间(0、1、2、4、6、8h)、不同藻球用量(0、7.5、15.0、22.5、30.0、37.5g?L-1)和不同加固时间下反复使用次数对氮、磷的去除效果. 结果表明: 包埋藻细胞密度为1.35×107 cells?ml-1时单位藻细胞去除NH4+-N和PO43--P的效果较好. 藻球规格对NH4+-N和PO43--P去除效率的影响不显著(P>0.05). CaCl2加固时间2~8h对藻球中藻细胞生长、NH4+-N和PO43--P去除率没有显著影响(P>0.05), 但均显著高于加固1h, 未经加固的藻球极易破损. 藻球投放质量越大, NH4+-N和PO43--P的去除速度越快, 投放量为30g?L-1, 培养9d后, NH4+-N和PO43--P去除率可达80%以上. 固定化藻球反复使用3次以上, 其NH4+-N和PO43--P的去除效率下降. 由此得出: 固定化新月菱形藻球包埋藻细胞密度以1.35×107 cells?mL-1, 藻球直径3.5mm为佳; 藻球制作时在3% CaCl2溶液中加固最佳时间为2h; 藻球用量为30g?L-1; 对藻球定期(9d)进行加固, 有利于增加藻球使用寿命, 并保持其较好的氮、磷去除率.     

固定化酵母酿造黄酒试验初报

本文用海藻酸钙凝胶固定活酵母细胞酿造黄酒试验在实验室获得成功,试验结果表明:(1)黄酒发酵周期为10天,与传统生产工艺相比可缩短50—70天;(2)本试验制成之黄酒含乙醇16％(v)左右,糖份为0.6(g/1OOml),总酸为0.4(g/100ml)以下。     

PU/EP互穿网络聚合物的协同效应

本文以光固化型的聚醚氨酯（PU）与环氧树脂（EP）为体系,由不同的组成比制备了一系列PU／EP的IPN材料,经力学性能测试,均显示正协同效应,且协同效应的大小与聚合物网络的互穿程度有关,而PU／EP交联网络结构的材料只显PU／EP的加和性而不显协同效应,从而进一步证明IPN的协同效应源于IPN的网络互锁环连的结构,并对其结构所产生的协同效应的机理进行了探讨。