文山松毛虫质型多角体病毒(DpwCPV)多角体蛋白基因的cDNA克隆及序列分析

通过对文山松毛虫质型多角体病毒的增殖 ,纯化 ,获得一株单一类型的质型多角体病毒 提纯的病毒粒子经SDS 酚抽提 ,琼脂糖凝胶电泳分离基因组dsRNA ,低熔点琼脂糖电泳法回收纯化编码多角体蛋白的第十片段S10 S10经DMSO变性 ,逆转录合成cDNA第一条链 ,PCR扩增后 ,克隆在PMD18 T载体上 ,克隆片段全长 76 3bp 起始密码AUG位于第 3～ 5位碱基 ,终止密码UGA位于第 74 7～ 74 9位碱基 推测DpwCPV多角体蛋白基因编码一段由 2 4 9个氨基酸组成的多肽 ,分子质量为 2 84 39.4 4× 10 3 与舞毒蛾质型多角体病毒 (LdCPV)多角体蛋白基因比较 ,两者核苷酸序列的同源性为 97% ,它们各自编码的多角体蛋白的氨基酸同源性为 99% ;与家蚕质型多角体病毒(BmCPV)多角体蛋白基因相比较 ,两者核苷酸序列的同源性为 88% ,它们各自编码的多角体蛋白的氨基酸同源性为 97%     

油桐尺蠖感染核型多角体病毒后血淋巴酯酶的变化

用核型多角体病毒（nuclear polybedrosis virus）感染油桐尺蠖（Buzura suppressaria）四龄初幼虫，以染病后12，24，48，72h分别对幼虫血淋巴进行酯酶同工酶（EST）电泳分析（Native-PAGE),并用薄层扫描仪检测酶带的相对含量，染病幼虫血淋巴的一部分EST含量低于同期对照组，而另一部分却高于对照组；就谱带而言，某些样品酶带在感染后出现迁移率的变化，而有些则出现新的酶带，这二种变化均表现在某一特定的酶带上，提示该酶带在病毒感染的血淋巴病理生化方面可能具有特殊意义。     

马尾松毛虫CPV基因组第7片段的cDNA克隆及序列分析

利用琼脂糖凝胶电泳分离马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)基因组dsRNA,并回收纯化第7片段(S7).经逆转录和PCR扩增,获得2个亚克隆片段并测序.再根据已测序列设计引物,利用RNA连接酶介导的RACE法得到S7两端克隆并测序.通过拼接可得到DpCPVS7全序列.经过序列分析发现,S7全长1502bp,5′端具有CPV 1型末端保守序列AGTAA,3′端具有保守序列GTTAGCC.起始密码子ATG位于25～27残基,终止密码子TAG位于1373～1375残基,推测S7片段编码448个氨基酸多肽,分子量约为5.0×107.与舞毒蛾质型多角体病毒(LdCPV 1)和家蚕质型多角体病毒(BmCPV)第7片段相比较,核苷酸同源性分别为99%和86%.     

重组家蚕核多角体病毒（rBmNPV）的复制及所载HuIFN－α基因的表达

报道了重组家蚕核多角体病毒（ＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉｎｕｃｌｅａｒＰｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓＶｉｒｕｓＢｍＮＰＶ）在家蚕细胞ＢｍＮ中复制的细胞病理学变化，除了不形成多角体以外，与野生型病毒相同．研究了病毒感染复数、细胞接种密度和细胞生长阶段对重组病毒复制和α－干扰素（ＩＦＮ－α）表达量的影响．在一定低感染复数时，α－干扰素的产量较高．对于重组病毒的复制，最适的细胞接种密度为３．６～７．０×１０５细胞／瓶．在细胞指数生长前期（４８～６０ｈ）接种重组病毒，对于获得较高的重组病毒复制效价和α－干扰素的产量都是有利的．     

HaNPV穿梭载体的构建及绿色荧光蛋白基因在棉铃虫中的表达

ＨａＮＰＶ穿梭载体的构建及绿色荧光蛋白基因在棉铃虫中的表达＊朱应齐义鹏＊＊刘德立（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）关键词棉铃虫核型多角体病毒，穿梭载体，绿色荧光蛋白基因分类号Ｑ７８，Ｓ８５２．６５杆状病毒表达载体被广泛用于表达各种外源基因．由于...     

粘虫核型多角体病毒p35基因抑制细胞凋亡的功能研究

利用去血清方法建立Ls细胞凋亡的实验体系，证明LsNPV p35基因在Ls细胞中瞬时表达可以抑制Ls细胞由于无血清造成的凋亡，构建了在哺乳动物中高效表达LsNPV p35基因的载体pRc/RSV-L p35,并导入Vero细胞瞬时表达，发现LsNPV p35基因产物也可以抑制Vero细胞由于病毒感造成的凋亡，用含LsNPVp35的质粒与vAcAnb(AcNPV p35基因缺失病毒）DNA共转浸Sf-9细胞，可以使vAcAnhDNA在St-9细胞中形成多角体，并且传代后多角体不扩增，表明LsNPV p35基因与AcNPVp35基因具有功能互补性。     

棉铃虫核型多角体病毒朝鲜分离株BamHI-Ⅰ片段的核苷酸序列分析

对在朝鲜首次分离得到的棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株(HaSNPV-KO)基因组BamHI-Ⅰ片段的全序列进行了测序与分析．该片段全长1．895kb．包括p26基因．p10基因及p74基因的3′末端序列．p26基因位于户10基因的上游．排列方向与p10基因相同，该基因的编码区大小为803bp，编码267个氨基酸，p10基因的编码区大小为261bp，编码87个氨基酸．p74基因的排列方向与p10和p26基因相反．棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株与棉铃虫核型多角体病毒中国株(HaSNPV-g4株)的p26基因序列的同源性为99．8％，两个分离株的p10基因序列完全相同，而p74基因3′末端序列的结果有99．4％的同源性．朝鲜株与美洲株(HzSNPV)的p26和p10基因序列的同源性分别为98．8％，98．7％，而p74基因3′末端序列有97．9％的同源性．     

重组tPA及其突变体纤溶活性的比较

将重组基因rtPA及其突变体rtPAm分别克隆到原核表达载体pET his上,通过平板筛选,双酶切和PCR鉴定获得阳性克隆子,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).经IPTG诱导,表达出的两种tPA蛋白都形成不可溶的包涵体.SDS PAGE结果显示两种tPA蛋白分子量为4.0×104左右,表达产量较高.包涵体经尿素变性,透析复性后柱层析纯化,纤溶平板法测定激活纤溶蛋白酶的活性,结果显示rtPAm比活性比rtPA高70%左右.     

藻红蓝α亚基脱辅基蛋白基因的克隆和表达

用 Ｐ Ｃ Ｒ技术从层理鞭枝藻总 Ｄ Ｎ Ａ 中扩增藻红蓝蛋白 α亚基脱辅基蛋白的基因（ｐｅｃ Ａ）, 将ｐｅｃ Ａ 克隆于ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ,然后将ｐｅｃ Ａ 基因插入表达载体ｐ Ｇ Ｅ Ｍ Ｄ,形成的重组质粒在 Ｂ Ｌ２１（ Ｄ Ｅ３）中获得了高效表达,表达蛋白形成包涵体．高效表达的蛋白质的分子量为１９×１０３ ,与藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白的分子量一致,经 Ｄｏｔ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 进一步证实该表达蛋白为藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白     

不同复性条件对重组人组织纤溶酶原激活剂复性的影响

大肠杆菌生产菌株诱导表达产生的无活性重组人组织纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)包涵体蛋白,溶解于尿素中变性后进行复性.通过单因子试验和正交试验考察了不同复性条件下透析复性对tPA包涵体蛋白复性效率的影响.结果表明蛋白质浓度、复性温度、pH值、复性介质、还原剂浓度对tPA的复性效果都有不同程度的影响,当0.5 g/L tPA包涵体蛋白溶解于pH 9.5的7 mol/L的尿素,加入5 mmol/L β-巯基乙醇,在20 ℃、pH 8.0的双蒸水条件下复性时,可以取得最高的复性效率(2.0×107IU/g).通过对稀释复性、透析复性和凝胶过滤层析复性3种方法比较,建立了适宜工业化生产tPA的复性方法.     

硅光探测器紫外量子增益谱

对硅光探测器在紫外光波段的量子增益过程进行了分析，考虑到碰撞粒子的相对运动及终态的态密度分布，计算了增益谱．制作了紫外性能良好的硅光电二极管，测量了紫外光谱响应．对实验测量与理论计算进行了比较，结果基本一致     

坐标测量机立体误差的检测和误差的分离

一高精度平面，以相对于坐标测量机Ｘ，Ｙ，Ｚ轴的方向余角，被放在每一个象限（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，ⅣＷ）的二个位置上，当输入Ｘ，Ｙ；Ｙ，Ｚ；和Ｚ，Ｘ值时，则有输出Ｚ；Ｘ和Ｙ，因此，这输出与第三轴本身的分项误差之差即为综合测量误差。本文建立了一个描述综合误差与分项误差相互关联的数学模型，据此模型，分项误差将可由综合误差中得到。     

环境因子对东湖几种沉水植物生理的影响研究

报道了光照强度、水体温度及水体ｐＨ值对东湖５种沉水植物生理的影响．实验结果表明，在一定温度范围内，５种植物的光补偿点均随温度的升高而上升，且种间有较大的差异．各植物光合色素的含量，受生态因子的影响，表现出一定的适应性．５种植物对水体高ｐＨ值耐受能力有明显的差异．探讨了富营养化湖泊沉水植物消亡的原因及生态分布的规律，提出了富营养化湖泊水生植被的恢复及水生生态系统重建中的植物选种原则．     

干燥处理对野生稻愈伤组织绿苗分化率和某些生化指标的影响

对４种野生稻愈伤组织进行了干燥处理，其中３种野生稻绿苗分化率得到不同程度的提高．干燥处理的愈伤组织中吲哚乙酸（ＩＡＡ）、水溶性蛋白（ＷＳＰ）水平明显下降，过氧化物酶同工酶活性升高．干燥处理可能是通过提高愈伤组织中过氧化物酶同工酶活性来降低ＩＡＡ含量，从而促使野生稻绿苗分化率的提高．     

凸区域上椭圆方程的预解估计

研究了一般凸区域上非齐次散度型二阶椭圆方程的非零解u的二阶导数的预解估计,得到弱解且有精确估计,常数C与区域D的直径等无关．     

灰色随机变量的熵和信息量

在定义灰随机变量的基础上,应用熵和信息量理论,研究了灰随机变量熵和随机量,得到若干公式和运算性质,拓展了胡庆贺在文[3]中对灰数信息量给出的定义和运算法则,揭示了灰随机变量两类不肯定性的特征及其相互关系,为进一步了解某些信息不完全事物的未知信息量提供了理论依据。     

船速桨频测量仪研究

船速桨频测量仪是一种智能化测量仪器．单片微型计算机８７Ｃ５１是测量系统的核心．本文系统介绍其工作原理，软、硬件的设计方法．最后列举测试结果并进行误差分析     

论人物地理分布计量分析的若干问题──以唐五代时期诗人分布为例

以唐五代时期诗人为例,对其分布特征进行计量分析,提出了文化均衡发展指数（EDI）作为刻划诗人分布特征的指标,并根据EDI及其它指标分析了该时期诗人分布的特征及其时代变迁．     

县域耕地需求预测方法探讨

讨论了《县级土地利用总体规划编制规程》耕地需求量预测方法在应用中所存在的问题提出了改进方法，并以郑县土地利用总体规划为例双明该方法是有效的．     

求解非线性规划问题的光滑路径跟踪方法

通过对非线性规划问题的K-T点的光滑路径跟踪方法研究，得出一种针对于既有不等式约束条件又有等式约束条件的优化问题光滑路径跟踪方法，证明了光滑跟踪路径的存在性。