萝卜叶绿体rbc L基因定位及ctDNA基因文库的构建

用改进的高离子强度法分离的萝卜叶绿体（ｃｔ）经ＳＤＳ６０℃裂解，抽提的ｃｔＤＮＡ只需简单纯化即可用于酶切分析．萝卜ｃｔＤＮＡ用４种限制性内切酶ＢａｍＨⅠ，ＰｓｔⅠ，ＨｉｎｄⅢ和ＥｃｏＲⅠ分别进行单酶完全酶解，推算其分子量和长度分别为８２．５×１０６和１２５ｋｂ．以Ｎｉｃｋｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ标记的异源探针ｒｂｃＬ基因与ｃｔＤＮＡＥｃｏＲⅠ片段进行杂交，初步定位在Ｅ１１片段（１．７ｋｂ）上．以ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＭ１３为载体构建了萝卜ｃｔＤＮＡＥｃｏＲⅠ基因文库     

Oligo诱导突变的改进方法

介绍一种改进的Ｏｌｉｇｏ诱导ＤＮＡ定点突变方法，此法制备的含Ｕ野生型模板ＤＮＡ在ＪＭ１０７中的存活率从５％～１０％下降至１％～２％；诱变反应终产物转染ＪＭ１０７产生的斑数比原法提高１５～２０倍，诱导连续４个核苷酸替换产生的突变频率达８０％～８５％，即使诱导连续１２个核苷酸的缺失，也能获得４０％～５０％的突变频率．     

紫云英根瘤菌5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒外源片段的酶切图谱

对来源于紫云英根瘤菌７６５３Ｒ总ＤＮＡ基因文库的５个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒ｐＮＲ１０２，ｐＮＲ１０３，ｐＮＲ１０８，ｐＮＲ２０３和ｐＮＲ２１３，ＥｃｏＲⅠ酶切表明它们分别携带有一个４．６８，５．０１，５．０４，５．１０或９．３８ｋｂ的外源ＤＮＡ片段．选用１１种内切酶进行单、双酶切分析，建立了重组质粒外源片段的酶切图谱，５个质粒都具有１．７ｋｂ的ＥｃｏＲⅠ－ＢｇｌⅡ片段和１．９ｋｂ的ＥｃｏＲⅠ－ＳａｃⅠ片段．     

用p387NIT1转化和诱变莱茵衣藻(C.reinhardtii) CBN1基因的研究

用微玻璃珠研磨法将p387NIT1质粒转入到莱茵衣藻硝酸还原酶缺陷型及缺壁突变株品系CC-2677(cw15nit1-305 mt-)中,得到了一些不同的插入型突变转化子.在本实验室条件下CC-2677突变株品系的转化率最高时达到了88个/μg DNA.经多次转化共获得各种转化子1 800多个,对它们进行荧光检测后检测出缺乏叶绿素b的一个突变子NIT17-1.并进一步用高效液相色谱法对其光合色素含量进行检测,结果证实该突变体的确丧失了叶绿素b合成能力.该突变株将可作为CBN1基因克隆及其定位的有利工具.     

用P389ARG7转化和诱变菜茵衣藻(C.reinhardtii)CBN1基因的研究

用微玻璃珠研磨法将pARG7质粒转入到莱茵衣藻精氨酸依赖型、缺壁突变株品系CC-1618(arg7cw15mt-)和CC-1617(arg7cw15mt-)中,得到了一些不同的插入型突变转化子.CC-1617突变株品系的转化率为72个/μgDNA,CC-1618突变株品系的转化率为296个/μg DNA,即转化率比CC-1617突变株品系高.经多次转化共获得各种转化子3 900多个,对它们进行荧光检测后检测出缺乏叶绿素b的两个突变子ARGT3和ARGT4,并进一步用高效液相色谱法对其光合色素含量进行检测结果证实,这两个突变体的确丧失了叶绿素b合成能力.它们将可作为CBN1基因的克隆及其定位的有用的工具.     

用p389ARG7转化和诱变莱茵衣藻（C．reinhardtii）CBN1基因的研究

用微玻璃珠研磨法将 p ARG7质粒转入到莱茵衣藻精氨酸依赖型、缺壁突变株品系 CC-1 61 8( arg7cw1 5 mt-)和 CC-1 61 7( arg7cw1 5 mt-)中 ,得到了一些不同的插入型突变转化子 .CC-1 61 7突变株品系的转化率为 72个 /μg DNA,CC-1 61 8突变株品系的转化率为 2 96个 /μg DNA,即转化率比 CC-1 61 7突变株品系高 .经多次转化共获得各种转化子 3 90 0多个 ,对它们进行荧光检测后检测出缺乏叶绿素 b的两个突变子ARGT3和 ARGT4,并进一步用高效液相色谱法对其光合色素含量进行检测结果证实 ,这两个突变体的确丧失了叶绿素 b合成能力 .它们将可作为 CBN1基因的克隆及其定位的有用的工具     

耐碱细菌NTT36耐碱基因的克隆及表达产物的分析

耐碱芽孢杆菌ＮＴＴ３６总ＤＮＡ经ＥｃｏＲＩ酶不完全消化，与质粒ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＩ酶切产物在体外重组后，转化大肠杆菌ＨＢ１０１．在碱性平板上直接筛选耐碱转化子，转化子经检测具有氨苄青霉素（Ａｍｐｒ）抗性，分析表明转化子具有１５ｋｂ大小的重组质粒．用此重组质粒转化大肠杆菌ＨＢ１０１、ＤＨ５α和ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，均产生大量同时具有耐碱性和Ａｍｐ抗性的转化子．通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和点杂交证明此重组质粒（定名为ｐＧＣＡ）由ｐＵＣ１８和ＮＴＴ３６总ＤＮＡ的片段组成．分别提取上述３种克隆转化子和ＮＴＴ３６细胞膜蛋白，进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ梯度凝胶电泳，发现在ｐＨ１０．６条件下培养的转化子和供体菌ＮＴＴ３６与在中性培养基中生长的转化子和受体菌相比，有５条多肽带有明显差异．表明这５条多肽带与耐碱性有关．     

猪瘟病毒HCLV株E_2核苷酸序列与结构分析

用 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ技术从 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ Ｈ Ｃ Ｌ Ｖ 株 Ｆ４８２ 代感染兔脾的细胞总 Ｒ Ｎ Ａ 中分段扩增出了 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ Ｅ２ 基因特异的３ 个部分重叠的 Ｄ Ｎ Ａ 片段（大小分别为 ４９９ ｂｐ、５７２ ｂｐ 和 ２４５ ｂｐ）,并将之分别克隆到ｐ Ｇ Ｅ Ｍ Ｔ 载体上 经核苷酸序列测定和片段重叠完成了包含 Ｅ２ 全长基因的 １ １４４ ｂｐ 序列的测定,其 Ｇ Ｃ含量为４９．０％ ：核苷酸序列与国外报道的各株病毒的 Ｅ２ 基因同源性分别为８３．５％ ～９７．５％ ;其推导的氨基酸序列的同源性也分别为８９．３％～９６．２％ ,变异主要分布在 Ｅ２ 蛋白的 Ｎ 半部分     

eglinC基因的化学合成与克隆

采用固相亚磷酰胺法合成了ｅｇｌｉｎＣ全基因，该基因全长２２１ｂｐ，包括其结构基因，５＇－端起始密码子ＡＴＧ和３＇－端终止密码子ＴＡＧ，并在基因的５＇－和３＇－分别装上ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ位点．共分１２个片段，采取分段合成，酶促连接成完整的ｅｇｌｉｎＣ基因．合成的基因克隆于Ｍ１３载体，经杂交、检测，筛选出含ｅｇｌｉｎＣ基因的克隆．用双脱氧链终止法测其序列，结果与设计的一致．     

醌蛋白——猪肾二胺氧化酶的提取和性质

新鲜猪肾匀浆后，经热处理、盐析、羟基磷灰石和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等纯化步骤，二胺氧化酶的收得率为２３．９％，纯化倍数为４２５．该酶进行凝胶电泳后，经氨基黑、酶活性和ＮＢＴ溶液染色分别得到相对应的蛋白质、酶活性及醌辅基谱带．该酶可与腐胺、尸胺、己二胺、组胺等底物作用，释放出Ｈ２Ｏ２，当底物为腐胺时，最适浓度为５ｍｍｏｌＬ－１，Ｋｍ值为０．５ｍｍｏｌＬ－１，最适ｐＨ为７．０，最适温度为４０°Ｃ．在非酶系统中，该酶可与ＮＢＴ溶液反应，呈现紫色，并随时间延长而加深．经ＳＤＳ板状不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳，得该酶亚基分子量为８．３×１０４．     

我国中纬地区电离层总电子含量的一个经验模式

由新乡（３５．３°Ｎ，１１３．９°Ｅ）１９８１～１９８５年观测日本同步卫星ＥＴＳ－Ⅱ的总电子含量（ＴＥＣ）资料，利用付里叶分析方法得出了表示我国中纬地区上空电离层总电子含量的经验模式．ＴＥＣ模拟与观测资料的比较表明其误差范围在５％～２０％之间变化．     

悬铃木叶片暗棕色抑菌色素的分离纯化及特性的初步研究

以碱提取、酸沉淀和ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、Ａｌ２Ｏ３及ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析分离纯化等步骤，从悬铃木落叶中制备得到一种暗棕色化合物，经ＰＡＧＥ、ＰＬＣ及ＴＬＣ检测均为单一谱带或单一斑点；该有色化合物熔点２８２．５９～２８３．２９℃，λＫＯＨｍａｘ：２１５ｎｍ，Ｅ１％１ｃｍ：３４８．７，肩峰：２５６ｎｍ，ｐＩ：３．５，对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、巨大芽孢杆菌及枯草杆菌有较强的抑菌活性     

水溶液中β-环糊精与苯甲酸雌二醇包络反应的光谱研究与应用

在硫酸酸性介质和溴化十六烷基三甲铵（ＣＴＭＡＢ）存在下用紫外吸收、荧光光谱法对β－环糊精（β－ＣＤ）与苯甲酸雌二醇（ＥＢ）的主客体包络反应及协同增敏作用机理进行了研究，提出了水溶液中测定ＥＢ的荧光光度新方法，灵敏度高，检出限为４．９×１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１，其线性范围为５．３×１０－９～２．０×１０－６ｍｏｌ·Ｌ－１，方法的相对标准偏差为１．３％（ｎ＝５）．应用本法于苯甲酸雌二醇注射液样品中ＥＢ的测定，结果满意     

证券收益的尖点突变模型

利用突变理论分析了证券收益稳定性的基本原理，提出了用尖点突变模型研究证券收益稳定性状况的判据及计算模型。     

一种鉴定胸腺素高活性小分子组分的灵敏简便方法

用笔者稍加改进的梯度ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ尿素系统，分别测定自制的胸腺素Ｔ１溶液，观察到一条５．３ｋｕ的电泳谱带．Ｔ１溶液用Ｅ－玫瑰花结法测定时，生物活力较高，是粗抽提溶液的１８１倍     

Euclid平面上8点间的不同距离

１９４６年Ｅｒｄｏｓ提出“确定平面ｎ点间不同距离个数最小值ｆ（ｘ）”的问题．作者证明ｆ（８）＝ｆ（９）＝４,并猜测ｆ（１０）＝ｆ（１１）＝ｆ（１２）＝５．     

猪瘟病毒石门株E2基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增了猪瘟病毒石门株的Ｅ２基因．扩增片段大小为１１８４ｂｐ，与预期大小一致．经ＳａｃＩ酶切和巢式ＰＣＲ证实了Ｅ２基因的特异性．将Ｅ２基因扩增片段首先克隆至ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，进行全序列测定，将该基因再克隆到表达载体ｐＢＶ２２１．采用温控诱导，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果显示Ｅ２基因获得表达．ＥＬＩＳＡ表明Ｅ２基因表达产物可与猪瘟阳性血清起特异性反应．     

PEG诱导的柱胞鱼腥藻（Anabaenacylindrica）原生质球融合

以多盐复合液配制的ＰＥＧ溶液可诱导柱胞鱼腥藻原生质球融合，融合率约５％，融合时间６～４０ｍｉｎ，可发生两个或多个原生质球的融合，ＰＥＧ使用浓度１０％     

旱生植物梭梭苹果酸脱氢酶的纯化及其性质的研究

本文采用差速离心法、硫酸铵分级沉淀，ＤＥＡＥ纤维素和半琼脂糖柱层析方法，从旱生植物梭梭体内分离出纯化１０４倍的ＮＡＤ－——ＭＤＨ．该酶等电点为５．７，最适ｐＨ７．１，它对草酰乙酸和ＮＡＤＨ的表观Ｋｍ值分别为８０μＭ和９０μＭ，凝胶过滤法得分子量为６７０００Ｄ．ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电泳法得分子量为３３０００Ｄ，说明该酶是由两个相同亚基组成的二聚体蛋白．该酶的热稳定曲线表明，在５５℃以下时酶活性较稳定．     

C9orf72突变致病的分子机制

C9orf72突变是导致肌萎缩侧索硬化症和额颞叶痴呆最主要的突变形式,该突变由GGGGCC长重复序列插入C9orf72基因的内含子中造成.该突变有3种致病机制:由C9orf72蛋白表达量降低造成的功能缺失、长重复序列RNA造成的细胞毒性、长重复RNA转录产物造成的细胞毒性.本文就从3个方面综合分析了该突变的分子学致病机制,从RNA和蛋白质代谢以及核仁应激三方面总结了3种致病机制之间的联系,并对该突变致病机制研究遇到的困难和未来发展方向进行了总结和预测.