Hg^2＋ -牛血清白蛋白复合体系中蛋白质微观结构的研究

研究了Hg2+在生物体内与牛血清白蛋白相互作用的毒性机理以及蛋白质的微观结构变化.测定了Hg2+与牛血清白蛋白(BSA)复合体系的红外光谱(FT-IR)和圆二色谱(CD),并对图谱进行拟合解析处理.红外光谱实验数据表明Hg2+与BSA发生作用的结合位点可能包括-SH、-OH和-NH基团,采用红外拟合技术对BSA二级结构的变化进行了研究,结果表明蛋白质α-螺旋结构含量降低,β-折叠结构含量升高.圆二色谱图也表明由于一定浓度的Hg2+与BSA结合,从而导致蛋白质的二级结构被破坏,这与拟合红外光谱得到的蛋白质二级结构数据相吻合.Hg2+与牛血清蛋白作用致使蛋白质的构象改变,形成金属离子与蛋白质作用的复合物,因而蛋白质失去活性导致生物体发生病变.     

Pb~(2+)-牛血清白蛋白复合体系中蛋白质二级结构的研究

采用紫外光谱、红外光谱和圆二色谱法研究了Pb2+与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用和蛋白质微观结构的变化。紫外光谱表明,Pb2+与BSA肽链上的CO存在相互作用,并使蛋白质疏水结构的微环境发生变化;红外光谱研究表明,Pb2+与BSA结合位点可能为—OH和—NH基团,利用二阶导、退卷积和谱线拟合技术对蛋白质红外谱图的酰胺Ⅰ带进行处理推测蛋白质二级结构的变化,结果表明蛋白质α螺旋和β折叠二级结构含量降低,β转角二级结构含量增加;圆二色谱(CD)也表明Pb2+与BSA的结合使蛋白质的构象发生了改变。     

磷脂酰胆碱与牛血清白蛋白相互作用的FT-IR研究

利用傅立叶变换红外(FT-IR)和拉曼(FT-Raman)光谱研究了高浓度磷脂酰胆碱(PC)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,及Eu3＋对该作用的影响.FT-IR结果显示,PC/BSA混合体系中二者的相互作用主要发生在PC头部极性基团,且这一作用随BSA含量的增加而增强,作用后蛋白质二级结构中α螺旋的比例有所增加. FT-Raman光谱说明PC与BSA的相互作用影响磷脂CH链的排列有序程度. PC/BSA/Eu3＋体系的红外光谱显示, Eu3＋与PC的磷氧键发生了强相互作用,并使蛋白α螺旋的比例进一步增加.     

光谱法研究呋苄西林钠与牛血清白蛋白的作用

采用紫外、荧光、红外光谱法研究了磷酸缓冲液中呋苄西林钠(FBS)与牛血清蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,FBS与BSA有较强的相互作用,FBS对BSA内源荧光有猝灭作用,静态猝灭是引起BSA荧光猝灭的主要原因。按照Stern-Volmer方程和双对数方程分析处理实验数据,得到了不同温度下FBS与BSA反应的结合常数和结合位点数,常温(26℃)下,分别为1.04×105和1.09;实验结果还表明,FBS与BSA之间的相互作用影响了BSA的二级结构,使其构象发生变化。     

红外光谱法研究温度变化对卵粘蛋白构象的影响

采用傅里叶变换红外(FTIR)光谱法和二维相关分析(2D Correlation analysis)技术研究了卵粘蛋白(Ovomucin)的构象转变与温度之间的关系. 结果表明, 当温度为55~65℃时, 卵粘蛋白的红外谱峰的位置和强度发生较大改变. 二维相关分析表明, 在升温过程中, 与肽链相比卵粘蛋白分子中的糖链对温度变化更为敏感, 且优先发生构象改变, 糖链分子的存在利于维持卵粘蛋白构象的热稳定性. 在25~95℃升温过程中, 卵粘蛋白分子二级结构的变化次序依次为α-螺旋、 β-折叠、 β-转角和无规卷曲. 由温度变化引起的卵粘蛋白分子结构动态变化的微观信息, 为揭示变温微扰引起的蛋白构象变化机理提供了初步的理论依据.     

咪唑型离子液体与牛血清蛋白的缔合特性

通过紫外-可见光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色谱、衰减全反射红外光谱、负染-透射电镜、等温滴定微量热等实验方法系统地探讨了咪唑型离子液体与牛血清蛋白(BSA)的缔合特性.结果发现,离子液体[Bmim]Cl的加入使得BSA的紫外吸收强度增加,同时也会导致其荧光猝灭,并且这种猝灭是静态猝灭.同步荧光的研究结果表明,[Bmim]Cl分子可与蛋白质中接近色氨酸残基的区域发生相互作用,使蛋白质的构象和内部的疏水结构发生改变;负染色法透射电镜直观地显示了加入离子液体后形成的蛋白质-离子液体复合物结构逐渐变大;圆二色谱和衰减全反射红外光谱表明:在离子液体与BSA缔合过程中,离子液体的加入使得BSA二级结构中的α-螺旋和β-折叠的含量降低,从而引起蛋白质二级结构的变化;表面张力法和等温滴定微量热法进一步证实上述缔合作用为静电作用和疏水作用共同作用的结果,但离子液体的烷基链与BSA疏水内腔之间的疏水作用是离子液体与BSA缔合的主要驱动力.     

罗非昔布与牛血清白蛋白之间相互作用的研究

在模拟人体生理条件下,通过荧光光谱法、紫外光谱法、红外光谱法和分子对接等技术探究罗非昔布(RFB)与牛血清白蛋白(BSA)之间相互作用的化学本质。研究结果表明,RFB与BSA的Trp/Tyr残基之间的π-π堆积作用诱导了BSA的荧光发生猝灭,其猝灭机制为静态猝灭并且伴随着非辐射能量的转移;热力学参数表明RFB-BSA可以自发地通过氢键与范德华力进行结合,二者之间的结合距离r_0=3.50 nm,且结合位点数为1;同步荧光和分子对接结果证明RFB与BSA在结合位点Ⅰ结合;三维荧光光谱与红外光谱揭示了RFB导致BSA蛋白质二级结构发生变化,其中α-螺旋和β-片层结构含量下降,β-折叠和β-转角含量上升。     

光谱法研究萘酰亚胺类衍生物与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、红外光谱和圆二色光谱研究了3-氨基-4-二甲氨基-N-丁基-1.8-萘酰亚胺(ADBN)与牛血清白蛋白(BSA)结合反应的特征。荧光光谱与紫外-可见吸收光谱表明,ADBN使BSA荧光猝灭的机理为静态猝灭。根据热力学参数判断ADBN与BSA主要是通过氢键和范德华力结合,结合距离为4.08 nm。同步荧光光谱、圆二色光谱以及红外光谱表明,结合过程中BSA的构象发生了变化。     

电化学石英晶体阻抗和FTIR-ATR研究牛血清白蛋白在羟基磷灰石、TiO2表面的吸附

用电化学石英晶体阻抗法(EQCI)和衰减全反射红外光谱法(FTIR-ATR)研究了牛血清白蛋白(BSA)在纳米生物活性材料TiO_2和羟基磷灰石(HAP)上的吸附行为,获得了BSA吸附过程中电极表面的质量变化和电极/蛋白质界面双电层中电容变化以及BSA构象变化等信息。以2步骤连串反应机理分析BSA吸附动力学。结果表明,BSA在2种电极表面的吸附过程均分为吸附和重排2个过程,BSA在TiO_2上吸附速度慢于在HAP上的吸附,且难达到稳定状态。根据Sauerbrey方程结合Martin方程估算了BSA在TiO_2和HAP上饱和吸附时的表面质量覆盖度,分别为1．12×10~(-6)和1．09×10~(-6)g/cm~2。红外谱图结果还表明,生物材料的表面组成对蛋白质吸附动力学和蛋白质结构变化均有影响。BSA在HAP表面吸附时的响应更大,并对蛋白质二级结构的变化影响更大。     

β-1,2,3,4,6-五-O-倍酰-D-葡萄糖与人血清白蛋白的相互作用研究

应用红外光谱和荧光光谱方法研究了人血清白蛋白 (HSA)与 β 1,2 ,3 ,4,6 五 O 倍酰 D 葡萄糖 (PGG)的相互作用 .荧光光谱结果显示 ,PGG在CPGG/CHSA<0 5和 0 5 相似文献   

三七总皂甙对牛血清白蛋白溶液构象的影响

应用衰减全反射傅立叶变换红外光谱结合荧光光谱和紫外光谱研究了中药三七 的有效成分三七总皂甙与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用，采用对蛋白质红外光 谱酰氨Ⅰ带和酰氨Ⅲ带进行曲线拟合的方法，定量分析了不同浓度三七总皂甙对 BSA二级结构的影响，发现随着三七总皂甙浓度的增加，蛋白分子结构逐渐发生了 由螺旋向折叠的转化。a-螺旋结构减少了3%，β-折叠结构增加了约5%，其它二级 结构没有明显的变化，红外差谱和荧光光谱的结果为药物与蛋白质的作用引起牛血 清白蛋白溶液构象的变化提供了佐证，紫外光谱反映了单体皂甙与蛋白质的结合常 数的差异。     

Interaction of a Rhodococcus sp. trehalose lipid biosurfactant with model proteins: thermodynamic and structural changes

One major application of surfactants is to prevent aggregation during various processes of protein manipulation. In this work, a bacterial trehalose lipid (TL) with biosurfactant activity, secreted by Rhodococcus sp., has been identified and purified. The interactions of this glycolipid with selected model proteins have been studied by using differential scanning calorimetry (DSC), Fourier-transform infrared (FTIR) spectroscopy, isothermal titration calorimetry (ITC), and fluorescence spectroscopy. Bovine serum albumin (BSA) and cytochrome c (Cyt-c) have been chosen because of their quite different secondary structures: BSA contains essentially no β-sheets and an average 66% α-helix, whereas Cyt-c possesses up to 25% β-sheets and up to 45% α-helical structure. Differential scanning calorimetry shows that addition of TL to BSA at concentrations below the critical micelle concentration (cmc) shifts the thermal unfolding temperature to higher values. FTIR indicates that TL does not alter the secondary structure of native BSA, but the presence of TL protects the protein toward thermal denaturation, mainly by avoiding formation of β-aggregates. Studies on the intrinsic Trp fluorescence of BSA show that addition of TL to the native protein results in conformational changes. BSA unfolding upon thermal denaturation in the absence of TL makes the Trp residues less accessible to the quencher, as shown by a decrease in the value of Stern-Volmer dynamic quenching constant, whereas denaturation in the presence of the biosurfactant prevents unfolding, in agreement with FTIR results. In the case of Cyt-c, interaction with TL gives rise to a new thermal denaturation transition, as observed by DSC, at temperatures below that of the native protein, therefore facilitating thermal unfolding. Binding of TL to native BSA and Cyt-c, as determined by ITC, suggests a rather nonspecific interaction of the biosurfactant with both proteins. FTIR indicates that TL slightly modifies the secondary structure of native Cyt-c, but protein denaturation in the presence of TL results in a higher proportion of β-aggregates than in its absence (20% vs 3.9%). The study of Trp fluorescence upon TL addition to Cyt-c results in a completely opposite scenario to that described above for BSA. In this case, addition of TL considerably increases the value of the dynamic quenching constant, both in native and denatured protein; that is, the interaction with the glycolipid induces conformational changes which facilitate the exposure of Trp residues to the quencher. Considering the structures of both proteins, it could be derived that the characteristics of TL interactions, either promoting or avoiding thermal unfolding, are highly dependent on the protein secondary structure. Our results also suggest the rather unspecific nature of these interactions. These might well involve protein hydrophobic domains which, being buried into the protein native structures, become exposed upon thermal unfolding.     

壳聚糖微球负载的己二胺型聚酰胺-胺树状大分子的制备及对胆红素的吸附

通过反相悬浮反应制备了戊二醛交联的壳聚糖微球。以所制备的壳聚糖微球为载体,合成了己二胺型低代数聚酰胺-胺（Polyamidoamine,简称PAMAM）树枝状大分子（Genaration≤3）。考察了该微球在生理条件下对水溶液中胆红素的吸附行为,以及溶液的pH值,离子强度,温度,胆红素初始浓度,牛血清白蛋白等因素对吸附的影响。结果表明,吸附剂对胆红素具有良好的吸附性能,CS-G2.0,CS-G3.0,CS-G1.0,CS-G0和CS微球的平衡吸附率分别为94.61%,93.44%,92.97%,86.47%,52.38%,CS-G1.0-G3.0微球在0.5h吸附率已经超过70%,1h基本接近平衡,对胆红素的吸附量高达42.78mg/g。     

热重分析-单滴微萃取-气相色谱-质谱结合傅里叶变换红外光谱考察咖啡酸的热解行为

采用热重分析-单滴微萃取-气相色谱-质谱(TG-SDME-GC-MS)联用系统和傅里叶变换红外光谱,研究了咖啡酸的热解行为。设定热重分析仪5 ℃/min的升温速率及400 mL/min的氮气流量,在160～360 ℃温度范围内,采用乙醇对热解逸出物质进行单滴微萃取,然后利用GC-MS分离分析,监测了咖啡酸5种主要热解逸出产物相对含量随温度升高的动态变化情况。使用傅里叶变换红外光谱分析了咖啡酸所对应各失重点固体剩余物的特征官能团变化情况。结果表明,咖啡酸热失重的主要原因是在240～360 ℃产生大量的邻苯二酚,在200～220 ℃热解产生4-乙基邻苯二酚。另外,咖啡酸在230 ℃下已完全裂解。该方法的建立为温度连续上升模式下的物质热解行为分析提供了借鉴和参考。     

Synthesis and Characterization of NASICON Nanoparticles by Sol-gel Method

Na superionic conductor(NASICON) nanoparticles were synthesized by a modified sol-gel method and sintered at a temperature range of 800―1000 ℃.The performance of the samples was characterized by the analysis methods of X-ray diffraction(XRD),Fourier transform infrared spectroscopy(FTIR),and transmission electron microscopy(TEM) as well as conductivity measurement.Compared with those sintered at other temperatures,the NASICON material sintered at 900 ℃ had the best crystalline structure and higher conductivi...     

Spectroscopic study of conformation changes of bovine serum albumin in aqueous environment

The secondary structural changes of protein aqueous solutions with and without calcium cations were investigated by attenuated total reflection-Fourier transform infrared (ATR-FTIR) technology.     

双酚芴双胺型苯并嗯嗪树脂的合成、结构及热性能

以9-芴酮、苯酚为原料,以质量分数为98%的浓硫酸为催化剂,2-巯基丙酸为助催化剂,合成了双酚芴[9,9-双(4-羟苯基)芴],再用其与乙二胺和多聚甲醛反应,合成了线性双酚芴双胺型苯并噁嗪树脂(BF-eda树脂).采用FTIR,'H NME和<'13>C NMR等分析手段对双酚芴和BF-eda树脂的化学结构进行了表征;...     

前沿色谱法对盐酸小檗碱和固定化牛血清白蛋白结合作用的研究

盐酸小檗碱(BC)是黄连的主要有效成分,它具有抗菌消炎等多种作用。采用前沿色谱法测定了不同温度下BC与固定化牛血清白蛋白(BSA)的结合常数K和结合率PPB、BC的保留因子k、BC在色谱柱上活性位点的物质的量mL,以及BC与BSA结合过程中的热力学参数。在温度为30 ℃时,BC与BSA的结合常数为4.79×104 L/mol。K、k和mL均随温度的升高而降低,其中以mL的变化程度最为显著,表明k的降低是由于K与mL共同作用的结果。而BSA分子构象变化可能是mL降低的主要原因。热力学分析结果表明:BC和BSA之间的作用力以静电作用力为主。     

Study on the structural changes of bovine serum albumin with effects on polydatin binding by a multitechnique approach

Polydatin is a traditional Chinese medicine which shows effective biological activity as antimicrobial and antiviral agent. The secondary structure changes of bovine serum albumin (BSA) were investigated by the methods of Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), circular dichroism (CD) and Raman spectroscopy. The experimental results indicated that polydatin changed the secondary structure of BSA. The presence of polydatin decreased α-helix content of BSA. The conformations of disulfide bridges and the microenvironment of Tyr, Trp residues were also changed.