轴向嘧啶衍生物修饰硅酞菁的光谱性质、光动力抗癌活性及与白蛋白相互作用的研究

研究了一种新型轴向修饰硅酞菁,即二(2-氨基-6-三氟甲基-4-嘧啶氧基)硅酞菁(SiPcF)的光物理光化学性质、离体光动力抗癌活性以及与白蛋白的相互作用。结果表明,SiPcF的Q带最大吸收峰波长686 nm,摩尔吸光系数为2.3×105 mol-1·L ·cm-1,荧光发射峰694 nm,荧光量子产率为0.46,光敏化产生单线态氧的量子产率为0.38,是有效的1O₂光敏剂。SiPcF与牛血清白蛋白(BSA)具有较强的相互作用,两者的结合常数为4.33×105mol·L-1,结合位点数为1。离体细胞实验表明,SiPcF具有较高的光动力抗癌活性,对人肝癌细胞HepG2的IC₅₀值为5×10-7mol·L-1。     

间二羧基苯氧基取代酞菁锌与白蛋白共价结合物的合成与光谱性质

制备了四种由β-四(3,5-二羧基苯氧基)酞菁锌(记为1)和β-八(3,5-二羧基苯氧基)酞菁锌(记为2)与人血清白蛋白(HSA)或牛血清白蛋白(BSA)构成的共价结合物,结合物中酞菁与白蛋白的摩尔组成比为6～7:1.在PBS溶液中的电子吸收光谱测试表明,当酞菁1共价结合到白蛋白上后,呈现出更明显的单体特征吸收(单体特...     

十六羧酸基酞菁锌光敏剂与白蛋白相互作用的光谱研究及复合物的制备

利用光谱法研究了光敏剂分子2,3,9,10,16,17,23,24-八(3,5-二羧酸基苯氧基)酞菁锌(ZnPc(COOH)₁₆)与白蛋白(BSA和HSA)的相互作用,结果表明,ZnPc(COOH)₁₆与BSA,HSA存在较强的相互作用,结合常数为2.25～2.94×106 L·mol-1。同时,通过温育摩尔比为2∶1的ZnPc(COOH)₁₆和白蛋白混合物,进而凝胶色谱分离纯化,得到了摩尔比为1∶1的ZnPc(COOH)₁₆-BSA和ZnPc(COOH)₁₆-HSA复合物。光谱研究表明,ZnPc(COOH)₁₆在复合物中以单体形式存在,Q带最大吸收峰和发射峰均较单纯的ZnPc(COOH)₁₆有所红移。     

光谱分析法研究八羧酸酞菁铝配合物与牛血清白蛋白的结合作用

以八羧酸酞菁铝配合物(AlPc(COOH)8)为红区荧光探针,用紫外光谱和荧光光谱分析方法研究了(AlPc(COOH)8)与牛血清白蛋白(BSA)的结合作用,测定了八羧酸酞菁铝与牛血清白蛋白(BSA)的结合位置数和结合常数,结果分别为n=5.7,K=5.74×105和K=3.51×105,两种分析方法结果基本一致.以氯血红素(HE)、布洛芬(IB)、L-色氨酸(TRP)为分子探针,用络合竞争法研究了它们对AlPc(COOH)8-BSA体系紫外光谱的影响,结果表明,往体系中加入HE后,AlPc(COOH)8的单体吸收峰增强,体系由结合态往游离态"转变",而加入TRP和IB后,吸收光谱未观察到明显的变化,由此确定AlPc(COOH)8与BSA的结合点为SiteⅠ.     

甲钴胺与牛血清白蛋白相互作用的光谱特性

应用荧光光谱法、紫外吸收光谱法及共振光散射法,研究了甲钴胺 (Mecobalamin) 与牛血清白蛋白 (BSA) 之间的相互作用。在pH=7.40的三羟甲基胺基甲烷-盐酸 (Tris-HCl) 缓冲溶液中,随着甲钴胺浓度的增加,BSA的荧光强度、共振散射光强度逐渐减弱。通过计算不同温度(293,303,310 K)下的猝灭常数 (K_sv=5.40×10⁴,6.90×10⁴,8.00×10⁴ L/mol) 及扫描紫外吸收光谱,确定了甲钴胺对牛血清白蛋白的猝灭机理为动态猝灭。测定了该反应的表观结合常数 (K_A=1.68×10⁴,4.34×10⁴,7.90×10⁴ L/mol)和结合位点数 (n≈1)。利用热力学参数 (ΔH>0、ΔG<0和ΔS>0) 确定了分子间的作用力性质,作用力主要是疏水作用力,作用过程是自发的。同时应用同步荧光技术研究了甲钴胺对BSA构象的影响。结果表明,甲钴胺没有引起BSA构象的变化。     

马兜铃酸与牛血清白蛋白的相互作用研究

以荧光猝灭方法研究了模拟生理条件下马兜铃酸与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。研究发现：马兜铃酸与牛血清白蛋白有强的结合,结合位置与色氨酸残基间的距离r为2.8 nm;以已知结合位置的标记药物为探针,确定了马兜铃酸与BSA的结合位置为亚结构域ⅢA;利用CD和FTIR技术考察了马兜铃酸对牛血清白蛋白二级结构的影响,CD结果表明马兜铃酸与BSA的键合使BSA中α-螺旋结构含量从43.5%降到36.7%。     

甘草酸单铵盐-牛血清白蛋白超分子体系的荧光光谱研究

对甘草酸单铵盐(MAG)-牛血清白蛋白(BSA)体系的荧光光谱进行了研究,采用同步荧光技术考察了甘草酸单铵盐对牛血清白蛋白构象的影响,认为甘草酸单铵盐(MAG)对牛血清白蛋白(BSA)体系荧光猝灭是由于生成了超分子复合物的静态猝灭,求得MAG-BSA的形成常数K_A及热力学函数ΔG,ΔH和ΔS,根据热力学函数确定了超分子间的作用力类型为静电作用力,依据Forster非辐射能量转移机制,确定了给体-受体间的结合距离和能量转移效率。     

流动注射化学发光法灵敏检测牛血清白蛋白

基于牛血清白蛋白(BSA)在碱性介质中对luminol-H₂O₂体系化学发光的增敏作用,结合流动注射化学发光技术提出了一种快速、 灵敏检测BSA的新方法。在优化条件下,检测BSA的线性范围为2.5×10-9～1.0×10-6 mol·L-1,检出限为5.8×10-10 mol·L-1,样品检测速率达112个·h-1。对1.0×10-7 mol·L-1 BSA溶液重复测定11次,相对标准偏差RSD为0.8%。该方法已成功应用于实际样品牛血清中BSA含量的测定。结合化学发光光谱和紫外可见吸收光谱,对luminol-H₂O₂-BSA体系可能的反应机理进行了探讨。     

光谱法研究4-羟基香豆素类杀鼠剂与蛋白的结合模式

利用光谱法对4-羟基香豆素(4-HC)和杀鼠剂溴敌隆(BRD)、溴鼠灵(BDF)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用进行了研究.依据Foerster能量转移理论计算了3种药物与BSA 212位Trp残基的结合距离.利用光谱探针,通过竞争实验判断4HC、BRD、BDF主要结合于BSA的Subdomain ⅡA结构亚域的Site Ⅰ.实验初步探讨了该类药物与蛋白的结合模式与作用机制.     

轴向核苷修饰硅酞菁与白蛋白非共价复合物的制备与光动力活性

通过荧光光谱法研究了5种轴向核苷(胞苷、氮杂胞苷、甲基胞苷、尿苷和甲基尿苷)衍生物修饰硅酞菁与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,结果表明,它们与BSA存在较强的相互作用,结合常数在(4.90~83.18)×105 mol-1·L之间。因此,进一步制备了二[5’-(2’,3’-O-异丙基)-胞苷氧基]硅酞菁(SiPc1)与BSA的非共价复合物(SiPc1-BSA),复合物中两者的摩尔比为1∶1。SiPc1-BSA与SiPc1在可见区的吸收光谱没有明显区别,两者的Q带最大吸收带均位于686nm附近,且吸收强度没有明显区别,这说明SiPc1结合到白蛋白后,其光谱性质没有受到明显改变。光动力抗癌活性测试表明,SiPc1-BSA具有较高的光动力抗癌活性,对人肝癌细胞HepG2的IC₅₀值为3.0×10-7 mol·L-1,且SiPc1-BSA的光动力活性高于SiPc1(PBS药剂形式,IC₅₀值为7.0×10-7 mol·L-1),这主要可归因于SiPc1-BSA具有更高癌细胞摄取率。     

Characterize the interaction between naringenin and bovine serum albumin using spectroscopic approach

Naringenin, a flavanone compound highly enriched in grapefruits, has been identified as a possible inhibitor of cell proliferation; and thus has the potential to act as an antitumorigenic agent. In this study, the binding of naringenin to bovine serum albumin (BSA) was studied at the physiological conditions (pH=7.40) by fluorescence and UV-vis spectroscopy. Naringenin strongly quenches the intrinsic fluorescence of BSA, and a decrease in the fluorescence quenching constant was observed together with an increase in temperature, which indicates that the fluorescence quenching of BSA by naringenin is a result of the formation of naringenin-BSA complex. Binding parameters calculating from Stern-Volmer method and Scatchard method showed that naringenin bind to BSA with the binding affinities of the order 10⁴ L mol⁻¹. Thermodynamic parameters such as ΔG, ΔH and ΔS, were calculated at different temperatures, showing that electrostatic interactions were mostly responsible for the binding of naringenin to BSA. Site marker competitive displacement experiments demonstrating that naringenin bind with high affinity to site I (subdomain IIA) of BSA. Furthermore, the effect of metal ions to naringenin-BSA system was studied, and the specific binding distance r (3.30 nm) between donor (Trp-212) and acceptor (naringenin) was obtained according to fluorescence resonance energy transfer (FRET).     

荧光法研究四(对甲氧基苯基)钴卟啉与牛血清白蛋白的相互作用

合成了四(对甲氧基苯基)钴卟啉,利用荧光光谱法研究了四(对甲氧基苯基)钴卟啉与牛血清白蛋白的相互作用,由实验数据计算求得该卟啉与牛血清白蛋白的双分子猝灭过程速率常数Kq=9.619×1012L·mol-1.s-1、结合常数KA=3.475×103L·mol-1、结合数n=0.6893,结果表明:四(对甲氧基苯基)钴卟啉与牛血清白蛋白之间发生了较强的静态荧光猝灭作用。     

Ilaprazole metabolites,ilaprazole sulfone and ilaprazole sulfide decreased the affinity of ilaprazole to bovine serum albumin

The interaction of ilaprazole (IPZ), ilaprazole sulfone (IPZO) and ilaprazole sulfide (IPZI) with bovine serum albumin (BSA), and the effect of IPZO and IPZI on the interaction of IPZ with BSA have been investigated by fluorescence, synchronous fluorescence, ultraviolet–visible (UV–vis), Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) and circular dichroism (CD). The results indicated that IPZ, IPZO and IPZI had a strong ability to quench the intrinsic fluorescence of BSA, and the binding affinities were significantly affected by structures in the order IPZ>IPZO>IPZI, while the van der Waals force and hydrogen bond played major roles in their binding with BSA. The analysis of synchronous fluorescence, FT-IR and CD spectra showed the change in secondary structure of BSA upon interaction with IPZ, IPZO or IPZI. Site marker competitive experiments indicated that their binding to BSA primarily took place in subdomain IIA. The presence of IPZO and IPZI decreased the quenching constants of IPZ with BSA by about 68.4% and 95.1%, respectively, which possibly resulted from the existence of competitive binding between IPZ and its metabolites with BSA. However, IPZO and IPZI did not change the quenching mechanism of IPZ with BSA, while all the fluorescence quenching was initiated by static quenching procedure combined with non-radiative energy transfer. Our results may have relevant insight into IPZ's bioavailability and efficacy affected by its metabolites.     

丹酚酸B与牛血清白蛋白相互作用的光谱学研究

丹酚酸B（SAB）是丹参中主要的水溶性成分之一,具有广泛的生物活性。血清白蛋白是哺乳动物体内血浆中含量最为丰富的蛋白质,约占血浆总蛋白的60%,能与许多内源及外源性物质相结合,发挥存储和转运的作用。丹酚酸B进入人体后,必然先与血液中的蛋白质相结合,然后才被转运到其受体结合部位,进而发挥其药理作用。为更好地了解丹酚酸B在体内的分布、转运及代谢,在模拟生理条件下,采用荧光光谱法、圆二色光谱法和核磁共振波谱法等方法研究丹酚酸B与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用机制。结果表明：丹酚酸B与牛血清白蛋白的结合能有效地导致牛血清白蛋白的内源荧光猝灭,猝灭机制为以静态猝灭为主的联合猝灭方式。荧光光谱分析表明两者的结合常数分别为7.51 ×105（288 K）,7.40 ×105（298 K）和5.57 ×105（308 K） L·mol -1,达到105 L·mol -1数量级,且随着温度的升高逐渐降低。Scatchard方法确定牛血清白蛋白与丹酚酸B相互作用时结合位点数约为1,说明两者之间可形成1∶1型非共价复合物。位点标记竞争实验表明丹酚酸B在牛血清白蛋白亚结构域IIA（Site I）的疏水腔内相结合。三维荧光光谱法和圆二色谱法实验结果显示,结合丹酚酸B后牛血清白蛋白中色氨酸和酪氨酸所处的微环境发生了一定的变化（即峰位置发生红移,色氨酸和酪氨酸残基周围微环境疏水性减小,极性增强）,而二级结构和和三级结构的变化较小。此外,利用核磁共振波谱技术比较一定浓度的丹酚酸B在不同浓度的牛血清白蛋白溶液中的化学位移变化情况,研究表明H5”和H6”所在的苯环在牛血清白蛋白与丹酚酸B相互作用过程中发挥着重要的作用。该研究有助于了解丹酚酸B在机体内的作用机制以及对血清白蛋白结构和功能的影响,为丹酚酸B类新药的研发提供一定的理论参考。     

光谱法研究甲氨喋呤与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光和紫外吸收光谱法,研究了抗癌药物甲氨喋呤(MTX)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明：在生理条件下,甲氨喋呤对牛血清白蛋白荧光有较强的猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭。根据猝灭结果,求出了不同温度下反应的结合常数及反应热力学参数,并据此确定了它们相互作用的主要形式。     

芦丁钐配合物与血清白蛋白的相互作用

在生理pH值条件下,用荧光光谱法(FS)研究了芦丁钐配合物(rutin-Sm)与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)之间的结合反应。探讨了rutin-Sm对BSA 和HSA的荧光猝灭过程的猝灭机理, 以Lineweaver-Burk双倒数方程分别计算了不同温度下rutin-Sm与BSA和HSA的结合常数(K_LB)和热力学参数,并判断rutin-Sm与BSA和HSA结合的作用力类型;实验结果表明:rutin-Sm与BSA和HSA结合形成复合物,导致BSA(HSA)内源性荧光猝灭是由于分子内的非辐射能量转移而引起的静态猝灭;以Lineweaver-Burk方程计算rutin-Sm与HSA和BSA的结合常数KLB分别为:rutin-Sm-HSA, 295 K: 6.830×105 L·mol-1; 310 K: 4.665×105 L·mol-1; rutin-Sm-BSA, 295 K: 6.540×105 L·mol-1; 310 K: 3.265×105 L·mol-1;芦丁钐配合物与BSA之间的作用力主要为范德华力、氢键; 而与HSA之间的作用力主要为静电引力。同时用同步荧光光谱法探讨了rutin-Sm对BSA和HSA构象的影响。进一步证明芦丁钐配合物在体内能够被血清白蛋白存储和转运。     

荧光光谱法研究5-氟脲嘧啶与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱法研究了抗癌药5-氟脲嘧啶(5-Fu)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用。5-Fu对BSA的荧光有较强的猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭。25℃和37℃时,5-Fu与BSA之间的结合常数KA分别为7.2×104、4.9×104L.mol-1,结合位点数分别为1.18和1.17。计算得到不同温度下反应的热力学参数,表明二者之间的结合主要以静电力为主。     

贝诺酯与牛血清白蛋白位点选择性结合的分子光谱研究

采用荧光光谱、紫外可见光谱、同步荧光光谱及三维荧光光谱等分子光谱方法,研究了生理条件下贝诺酯(BEN)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,BEN对BSA的内源荧光有显著的猝灭作用,猝灭机理为动态猝灭,二者之间的作用力类型以疏水作用为主,BEN与BSA发生反应后,使BSA的疏水环境极性增强,疏水性减弱,荧光强度降低。测得的表观结合常数和结合位点数分别是1 050 L·mol^-1和0.88,同时测得了焓变(ΔH)、熵变(ΔS)和自由能变(ΔG)等热力学参数。同步荧光和三维荧光光谱的结果表明,BEN使BSA的构象发生改变。利用荧光特异性位点探针DA和DP,通过竞争结合实验,监测BEN与BSA的结合位点,测得了位点Ⅰ和位点Ⅱ的表观结合常数分别为4 300 L·mol^-1和21 200 L·mol^-1,表明BEN与BSA优先在位点Ⅱ结合。     

荧光光谱法研究四苯基-锌金属卟啉与蛋白质的相互作用机理

利用荧光光度法研究了meso-四(4-羟基苯基)卟啉-锌金属卟啉(TPP-Zn)与牛血清白蛋白(BSA)之间的结合反应。TPP-Zn对于BSA有荧光猝灭作用,基于TPP-Zn对BSA内源荧光的猝灭机理,测定了两者之间在不同温度下的结合常数,温度在27,35和42 ℃时,利用荧光猝灭法测得的结合常数K分别为1.521×106 L·mol-1,7.048×105 L·mol-1,1.473×105 L·mol-1,各温度下的最大扩散碰撞猝灭速率常数K_q均大于2.0×1010 L·mol-1·s-1,由此判定猝灭类型为静态猝灭。根据Frster非辐射能量转移理论,确定了TPP-Zn与BSA之间的能量转移效率E,能量给体(BSA)与受体(TPP-Zn)之间的结合距离r=3.72<7 nm,符合非辐射能量转移条件。依据热力学参数ΔG<0,ΔH<0和ΔS>0确定了TPP-Zn与BSA之间的作用力主要是静电引力。     

Probing the Interaction of Trans-resveratrol with Bovine Serum Albumin: A Fluorescence Quenching Study with Tachiya Model

The interaction of trans-resveratrol (TRES) and bovine serum albumin (BSA) was investigated using fluorescence spectroscopy (FS) with Tachiya model. The binding number maximum of TRES was determined to be 8.86 at 293.15 K, 23.42 at 303.15 K and 33.94 at 313.15 K and the binding mechanism analyzed in detail. The apparent binding constants (K (a)) between TRES and BSA were 5.02 x 10(4) (293.15 K), 8.89 x 10(4) (303.15 K) and 1.60 x 10(5) L mol(-1) (313.15 K), and the binding distances (r) between TRES and BSA were 2.44, 3.01, and 3.38 nm at 293.15, 303.15, and 313.15 K, respectively. The addition of TRES to BSA solution leads to the enhancement in RLS intensity, exhibiting the formation of the aggregate in solution. The negative entropy change and enthalpy change indicated that the interaction of TRES and BSA was driven mainly by van der Waals interactions and hydrogen bonds. The process of binding was a spontaneous process in which Gibbs free energy change was negative.