菜粉蝶颗粒体病毒杀虫剂的试制和应用

菜粉蝶(Pieris rapae L.)幼虫俗称菜青虫。是世界性的十字花科蔬菜的第一号害虫。幼虫取食叶片,重者全叶吃尽,仅留叶柄,严重影响蔬菜的质量和生产。其寄生植物有9科35种之多。每年发生代数因地而异,在武汉市郊一年发生9代,幼虫期为5令,3令以后食量最大,危害猖獗(图1)。1978年5月我们在洪山公社附近苞菜地里发现莱青虫自然罹病死亡甚多。经采集,分离鉴定其病原体是一种颗粒体病毒(GV)。此病毒在国外研究甚多,范围亦广。在国内报导中仅涉及到分离和电镜观察。本文着重报导菜粉蝶颗     

中国莲的定量染色体图

利用MetaMorph软件定量分析了中国莲(Nelumbo mucifera Gaertn.)每条前中期染色体上(从短臂到长臂)二脒基苯基吲哚(DAPI)荧光强度的变化，结合染色体的相对长度和臂比作为辅助参数，构建了中国莲前中期染色体的定量染色体图．该定量染色体图是实际的前中期染色体的一种直观模式，可识别中国莲基因组中每条染色体以及分析染色体上的异染色质分布，为莲的细胞遗传学研究提供了一种新的方法．     

卵圆绒泡菌rDNA小亚基片段的克隆测序

粘菌(Myxomycetes)是真核生物中比较特殊的一个类群.但是有关其分子系统学却研究得较少,目前大多数研究仅集中在多头绒泡菌(Physarum polycephalum)等少数几个种上.本文选取卵圆绒泡菌(Physarum didermoides(Pers.)T.Macbr.)为实验材料,用引物SMNUR101和SMNUR108对其rDNA小亚基进行PCR扩增,PCR产物经Wizard(r)PCR扩增DNA纯化系统纯化后,克隆到大肠杆菌JM109中进行测序,测得的序列长度为1910bp(见图1).该序列的测得添补了我国绒泡菌分子生物学研究的空白,也为进一步研究粘菌的起源和演化提供了重要的分子生物学证据.     

文山松毛虫质型多角体病毒(DpwCPV)多角体蛋白基因的cDNA克隆及序列分析

通过对文山松毛虫质型多角体病毒的增殖 ,纯化 ,获得一株单一类型的质型多角体病毒 提纯的病毒粒子经SDS 酚抽提 ,琼脂糖凝胶电泳分离基因组dsRNA ,低熔点琼脂糖电泳法回收纯化编码多角体蛋白的第十片段S10 S10经DMSO变性 ,逆转录合成cDNA第一条链 ,PCR扩增后 ,克隆在PMD18 T载体上 ,克隆片段全长 76 3bp 起始密码AUG位于第 3～ 5位碱基 ,终止密码UGA位于第 74 7～ 74 9位碱基 推测DpwCPV多角体蛋白基因编码一段由 2 4 9个氨基酸组成的多肽 ,分子质量为 2 84 39.4 4× 10 3 与舞毒蛾质型多角体病毒 (LdCPV)多角体蛋白基因比较 ,两者核苷酸序列的同源性为 97% ,它们各自编码的多角体蛋白的氨基酸同源性为 99% ;与家蚕质型多角体病毒(BmCPV)多角体蛋白基因相比较 ,两者核苷酸序列的同源性为 88% ,它们各自编码的多角体蛋白的氨基酸同源性为 97%     

用宿主范围扩大的重组AcNPV在家蚕中表达TNF

用宿主范围扩大的核型多角体病毒双穿梭载体Bonpvid与重组转座质粒 pFast-TNF转座，使含有有TNF基因的表达盒插入Bonpvid的Tn7att的接受位点筛选阳性重组E.coli菌落，将提取的阳性重组子DNA分别转染家蚕BmN细胞和Sf-9细胞，获得了能表达TNF的重组病毒，SDS－PAGE和Western blot分析表明，TNF在上述两种细胞中得到表达，以家蚕作为生物反应器，将含有重组病毒的的细胞上清注射感染家蚕4龄幼虫，使TNF在蚕体表达，用BmN细胞中表达的TNF感梁肿瘤细胞，诱导细胞发生了凋亡。     

草鱼出血病两种病原病毒的分离和致病性的研究

通过PEG和鱼精蛋白沉淀等方法，从草鱼(Ctenopharynogon idellus)出血病病鱼组织分离纯化出两种病毒一种是直径70-80nm的病毒颗粒，六边形，有双层衣壳，无囊膜，另一种直径仅20-30nm的小病毒颗粒，也呈六边形.前者是呼肠孤病毒(Reovirus)，以前已有报道，后者拟初步鉴别为小RNA病毒科(Picornaviridae)病毒.将两者分别感染1足龄健康草鱼，能复制出典型症状的草鱼出血病而致鱼死亡.呼肠孤病毒主要导致肠道出血的出血病，而小病毒颗粒导致肌肉出血为主的出血病.由此可以初步解释生产上出现两类出血病的原因.     

草鱼出血病两种病原病毒的分离和致病性的研究

通过PEG和鱼精蛋白沉淀等方法,从草鱼(Ctenopharynogon idellus)出血病病鱼组织分离纯化出两种病毒.一种是直径70—80nm的病毒颗粒,六边形,有双层衣壳,无囊膜;另一种直径仅20—30nm的小病毒颗粒,也呈六边形.前者是呼肠孤病毒(Reovirus),以前已有报道;后者拟初步鉴别为小RNA病毒科(Picornaviridae)病毒.将两者分别感染1足龄健康草鱼,能复制出典型症状的草鱼出血病而致鱼死亡.呼肠孤病毒主要导致肠道出血的出血病,而小病毒颗粒导致肌肉出血为主的出血病.由此可以初步解释生产上出现两类出血病的原因.     

三角帆蚌钩介幼虫体外培养及变态稚贝的形态变化

以超纯水为对照,利用普通温控培养箱,在(24.0±1.0)℃条件下对三角帆蚌钩介幼虫进行了15d的体外培养实验.结果显示:钩介幼虫排出体外24h内存活率显著下降为50.7%(p=0.006);A组(MEM高糖)、B组(RPMI1640)、C组(MEM 199)幼虫变态率分别为(7.5±3.9)%、(13.3±12.0)%、(42.1±10.0)%;D组(L-15)的幼虫变态率最高,为(66.1±3.8)%,极显著高于C组(p=0.007).相关分析表明,培养液中葡萄糖含量与钩介幼虫变态率存在显著负相关(r=-0.886).利用光镜和扫描电镜对体外培养变态发育的稚贝形态观察发现:稚贝双壳表面圆形凹陷数量和深度比幼虫显著减少,双壳边缘外套膜增厚,在外套膜、斧足表面分布有大量乳状突起,但形态不同.体外培养稚贝的外部形态和内部器官均发生了显著改变,完成了变态发育过程.     

猪瘟病毒对IFN-β启动子活化

猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)之所以能在猪体中建立持续感染,与其逃避宿主的免疫清除有关,据此,本课题以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)作为诱导剂,利用荧光素酶报告基因系统测定了CSFV Shimen株对IFN-β启动子活化的影响。结果表明CSFV不仅不能活化IFN-β启动子,而且能明显抑制NDV对IFN-β启动子的活化作用,说明CSFV可通过抑制IFN产生来逃避机体的免疫清除,为病毒建立持续性感染创造条件。     

马尾松毛虫CPV基因组第7片段的cDNA克隆及序列分析

利用琼脂糖凝胶电泳分离马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)基因组dsRNA,并回收纯化第7片段(S7).经逆转录和PCR扩增,获得2个亚克隆片段并测序.再根据已测序列设计引物,利用RNA连接酶介导的RACE法得到S7两端克隆并测序.通过拼接可得到DpCPVS7全序列.经过序列分析发现,S7全长1502bp,5′端具有CPV 1型末端保守序列AGTAA,3′端具有保守序列GTTAGCC.起始密码子ATG位于25～27残基,终止密码子TAG位于1373～1375残基,推测S7片段编码448个氨基酸多肽,分子量约为5.0×107.与舞毒蛾质型多角体病毒(LdCPV 1)和家蚕质型多角体病毒(BmCPV)第7片段相比较,核苷酸同源性分别为99%和86%.     

粉螨科(Acaridae)一新种记述(蜱螨亚纲:真螨目)

本文记述作者在江西省庐山从粮站的面粉中采得粉螨科(Acaridae)粉螨属(Acarus)—新种,庐山粉螨(Acarus lushanensis sp.nov.)新种。模式标本保存于江西大学生物学系。     

油桐尺蠖感染核型多角体病毒后血淋巴酯酶的变化

用核型多角体病毒（nuclear polybedrosis virus）感染油桐尺蠖（Buzura suppressaria）四龄初幼虫，以染病后12，24，48，72h分别对幼虫血淋巴进行酯酶同工酶（EST）电泳分析（Native-PAGE),并用薄层扫描仪检测酶带的相对含量，染病幼虫血淋巴的一部分EST含量低于同期对照组，而另一部分却高于对照组；就谱带而言，某些样品酶带在感染后出现迁移率的变化，而有些则出现新的酶带，这二种变化均表现在某一特定的酶带上，提示该酶带在病毒感染的血淋巴病理生化方面可能具有特殊意义。     

RbGa7的晶体结构

化合物RbGa_7的晶体结构,几位作者有不同的报导。Belin的结果是单斜晶系,空间群为C_(2/m)每个晶胞内含有两个二十面体,图1晶胞Ⅰ.本文作者在1983年认为该化合物为六方晶系,空间群为R_(3m),计算了相应的晶胞参数,图1晶胞Ⅱ。1985年Van Vucht用粉末法也得到一个六方晶系的结果,图1晶胞Ⅲ。本文认为RbGa_7晶体在所叙述的实验条件下只有一个相。不同的研究结果是作者从不同的角度选取晶胞造成的差别。     

白蚁巢中小白球菌生态因子研究初报

通过实地观察和模拟实验来研究鸡以菌 （ Termitomyces albuminosus ( Berk .)Heim . ） 的小白球阶段 （ Termitosphaeria duthiei( Berk .)Ciferri . ） 的生态因子 ．结果表明：白蚁的存在,较高的CO2,分压和空气相对湿度,是使小白球菌成为蚁巢中优势种类的主要选择因子 ．小白球在实验室条件下生长良好 ,为人工栽培鸡从菌（ T .albu minosus ) , 提供了一条可能的途径 ．     

用鸡胚培养对虾白斑综合症病毒(WSSV)的研究

为探索对虾白斑综合症病毒(WSSV)能否在鸡胚中培养, 基于稳定培养体系, 将WSSV接种到SPF鸡胚中. 收获接种3d后死亡的鸡胚, 从中提取病毒; 将其再次接种到健康鸡胚中, 传代5次后, 由卵黄囊膜提取病毒, 将其经肌肉注射至克氏原螯虾, 结果实验组克氏原螯虾100%死亡, 而对照组无死亡情况. 对各代鸡胚及克氏原螯虾进行PCR和电镜检测, 实验组呈WSSV阳性; 电镜下, 死亡鸡胚细胞中可见大量正在组装的病毒粒子; 表明WSSV可用鸡胚进行培养.     

人乳腺癌组织中类似病毒颗粒的电镜观察

近年来肿瘤病毒研究占肿瘤研究的主要地位并取得很大的进展。关于病毒引起乳腺癌问题自从1936年发现小鼠乳腺癌病毒(当时称为“乳汁因子”)以来至今已近40年,长期以来的大量工作对于小鼠乳腺癌病毒已经获得了较多的资料,而且在家鼠旅鼠和猴等动物的乳腺癌中相继发现和小鼠乳腺癌病毒相似的病毒。对于人乳腺癌是否也由病毒引起近年来做了许多工作,虽然有人报道在人乳汁中发现了和小鼠乳腺癌中一种病毒颗粒相似的颗粒,其它方面的实验结果也表明人乳腺癌中可能存在着病毒,但目前还没有得到令人十分信服的证据。最近(1975年)有人报告从人乳腺癌中分离出病毒,这工作还有待于进一步证实。     

一类一致最优完全多部图

以(n,m)表示具有n个顶点m条边的图的集合.假设图G的边可靠,而顶点可靠的独立概率为p,若对于所有1 p∈(0,1),图G均为(n,m)中的最可靠图,则称G为一致最优图.本文证明了完全k-部图K(b,(b+2)k 1)在其图类中是一致最优的,而当i>3时,完全k-部图K(b,(b+2)k 2,b+i)在其图类中不是一致最优的.     

分数临界图的新韧度条件（英文）

一个图G称为分数(g,f,n)-临界图如果满足从G中删除任意n个顶点,其剩余子图依然存在分数(g,f)-因子.得到分数(g,f,n)-临界图的新韧度条件,若t(G)≥b2-1-Δ+bn/a,则G是分数(g,f,n)-临界图,其中Δ=b-a.进一步地,给出分数(a,b,n)-临界图的韧度条件.     

分数临界图的新韧度条件

一个图G称为分数(g,f,n)-临界图如果满足从G中删除任意n个顶点,其剩余子图依然存在分数(g,f) 因子.得到分数(g,f,n) 临界图的新韧度条件,指出若t(G)≥〖SX(〗b2-1-Δ+bn〖〗a〖SX)〗,则G是分数(g,f,n) 临界图,其中Δ=b-a.进一步地,给出分数(a,b,n)-临界图的韧度条件.     

棉铃虫核型多角体病毒朝鲜分离株BamHI-Ⅰ片段的核苷酸序列分析

对在朝鲜首次分离得到的棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株(HaSNPV-KO)基因组BamHI-Ⅰ片段的全序列进行了测序与分析．该片段全长1．895kb．包括p26基因．p10基因及p74基因的3′末端序列．p26基因位于户10基因的上游．排列方向与p10基因相同，该基因的编码区大小为803bp，编码267个氨基酸，p10基因的编码区大小为261bp，编码87个氨基酸．p74基因的排列方向与p10和p26基因相反．棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株与棉铃虫核型多角体病毒中国株(HaSNPV-g4株)的p26基因序列的同源性为99．8％，两个分离株的p10基因序列完全相同，而p74基因3′末端序列的结果有99．4％的同源性．朝鲜株与美洲株(HzSNPV)的p26和p10基因序列的同源性分别为98．8％，98．7％，而p74基因3′末端序列有97．9％的同源性．