体液直接进样固定相的研究进展

评述了生物体液直接进样主效液相色谱固定相的制备、结构性能及应用。其特点可概括为：只允许生物体液中蛋白质等大分子物质与亲水的生物相容的固定相表现接触、使其在柱中无保留地洗脱、而小分子物质可获得保留、达到直接进样分析的目的。     

浸透限制固定相及其应用

讨论了浸透限制固定相的特性及其在药物分析中的应用。已发展起来的浸透限制固定相主要用于高效液相色谱法对生物体液中药物的直接进样分析。这种固定相填料是在疏水层上覆盖了一层亲水层,而亲水层允许小分子物质如药物自由出入于固定相的疏水部分,从而立体地阻止了大分子物质如蛋白质与固定相的疏水部分相互作用,使小分子物质得到分离。     

高效液相色谱法准确测定血清中的尿酸

建立了准确测定血清中尿酸含量的高效液相色谱方法,血清样品利用乙腈沉淀蛋白,过滤后直接进样测定。所采用的色谱柱为Inertsil ODS-SP(4.6mm i.d.×250 mm,5μm),柱温25℃,流动相体系为10 mmol/L乙酸铵(pH 4.5),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为280 nm。线性范围12.5~150μg/g,回收率为99.79%~100.5%。本文采用乙酸铵缓冲体系,对环境的污染小,同时也为建立液相色谱-质谱法测定尿酸奠定了良好的基础。     

高效液相色谱法直接测定尿中尿酸和肌酐

尿中尿酸与肌酐比值的测定对于某些疾病的诊断及病理研究很有意义,但一般需先分别测出二者浓度,再计算比值,这样不仅测定周期长,而且干扰影响大,结果准确性差。采用色谱法测定尿酸和肌酐可较好地改善检测的特异性。 本文推荐了一种基于液相色谱分离,UV234nm检测的分析方法,在5分钟内可完成对尿中尿酸和肌酐的同时测定。尿样只需用流动相稀释后便可直接进样,操作简便、干扰少,是一种特异、灵敏、准确的测定方法。     

色谱法用于治疗药物检测中的衍生化方法

由于色谱法(包括气液色谱和高效液相色谱具有高灵敏度、高分高度以及很好的选择性,所以,在临床药学及药代动力学的研究中,用色谱法测定人体体液中的各种药物浓度是最常用的方法之一。 在治疗药物的监测中,生物样品(血清、血浆、尿、脑脊液、痰、唾液等)必须经过去除蛋白、提取样品等步骤才能进样到色谱柱内进行分析,但有些样品还须进一步衍生化以满足色谱分析的要求。     

HPLC柱切换技术在临床药物分析中的应用

综述了近十年来高效液相色谱柱切换技术在药物分析中的应用情况，主要介绍了柱切换技术在生物样品纯化，富集和手性分离方面的实际应用，该技术可用于直接进样分析，特别适用于临床药物分析，可和于药代动力学，生物利用度等研究。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定水中丙烯酰胺、苯胺和联苯胺

建立了直接进样-高效液相色谱-串联四极杆质谱同时分析水中丙烯酰胺、苯胺和联苯胺的分析方法。采用SHIMADZU Shim-pack FC-ODS柱(75 mm×4.6 mm,3μm)为分离柱,甲醇和0.1%甲酸为流动相,采用梯度洗脱,流速0.2 mL/min,柱温40℃。经液相色谱分离后,采用串联四极杆质谱的多反应监测模式,使用TIS(+)源电离水样。在上述条件下,水样过0.22μm滤膜后可直接进样,单个样品分析时间仅11 min。进样体积25μL时,3种物质检出限分别为0.1,0.1和0.03μg/L,在0.10~100μg/L范围内,3种物质均线性良好(r>0.9995);测试低、中、高浓度的混合标准物质,3种化合物的相对标准偏差在1.3%~5.6%之间,样品加标回收率在92.8%~106%之间。本方法可应用于实际样品的分析。     

弱阳离子交换毛细管液相色谱整体柱的制备及其对蛋白质的分离

毛细管液相色谱柱具有节省样品、流动相,固定相消耗少,提高检测灵敏度等优点[1].近年来,随着蛋白组学的发展,毛细管离子交换液相色谱受到重视.目前蛋白组学中占有重要地位的多维液相色谱-质谱联用技术中,第一维液相色谱大多采用毛细管离子交换色谱柱[2].目前采用的颗粒填充毛细管柱柱压较高,易被蛋白质污染,且价格昂贵,使用寿命短.整体柱[3]具有大孔结构,柱背压低,对流传质使传质速率加快,制备过程简单,由于溶质与基质的接触时间短,降低了生物样品失活的可能性.与强阳离子交换固定相相比较,弱阳离子交换固定相与生物分子的相互作用比较温和,因此不易发生蛋白质变性现象.目前报道的弱阳离子交换整体柱通常采用两步法改性[4]:先用乙二胺处理,再用氯乙酸反应.我们在选取的具有良好刚性和渗透性的整体固定相上,利用亚胺乙二酸进行一步改性,简化了合成步骤,获得了具有羧酸基团的弱阳离子交换毛细管整体柱,并考察了其对于蛋白的分离能力.     

高效液相色谱法直接测定血浆中的丝裂霉素C

本实验采用两根反相柱串联而形成的高效液相色谱柱切换装置，直接进样测定血浆中抗癌药物丝裂霉素Ｃ。第一根柱利用胶束流动相进行样品的纯化和富集，第二根柱对药物进行分析。紫外检测波长为３６５ｎｍ。药物的回收率在９５．９％～１００．３％之间，相对标准偏差为２．７６％。用该法对人和狗的局部和全身注射药物的血浆样品进行了测定。     

引言

色谱柱是色谱分离分析的“心脏”,而色谱柱的分离性能主要由色谱固定相的性质所决定;因此,液相色谱技术的发展与色谱固定相的创新密切相关,如近年来细粒度(＜3 [WTBZ]μ[WTB4]m)固定相的研制成功为高压液相色谱(UHPLC)技术的发展奠定了基础。色谱固定相一直以来也是色谱研究领域的前沿和热点。近年来,整体柱材料、超细色谱固定相和基于介孔纳米材料的固定相等制备技术得到了快速发展,其在复杂样品的高效分离分析和样品预处理中的应用也获得了广泛的关注,并取得了重要进展。