低温后处理及配合因素对小麦花药愈伤组织诱导的影响

本文试验了低温后处理及其配合因素(2,4-D)对于小麦花药愈伤组织诱导的影响.结果表明,低温对提高愈伤组织诱导的影响是明显的,处理时间以2—3天为宜.低温的作用可能是以提高花粉细胞的存活率、延缓花粉正常发育、促进大多数花粉发育“同步化”等来影响愈伤组织的形成的.在低温后处理时,加入2,4-D与否,明显影响低温处理效果.对药壁组织较嫩材料,低温后处理效果以无2,4-D存在较好;药壁较老的材料则相反.2,4-D的作用可能也影响花粉的发育,低温和2,4-D的配合,可能既促进花粉细胞发育“同步化”,也有利于花粉发育和药壁发育的协调,从而影响愈伤组织的形成.因此,在低温处理的同时配合其他因素处理,可能为进一步弄清低温的作用机理,研究药壁的作用等,提供有用的线索.     

天目铁木愈伤组织和芽苗诱导技术

以天目铁木嫩茎尖为外植体,应用均匀设计法筛选其基部愈伤组织诱导和愈伤组织再分化芽苗的最适合培养基.结果表明,最适合的嫩茎尖基部愈伤组织诱导培养基为1/2DR+TDZ 2.30 mg·L^-1+2,4-D 0.55 mg·L^-1,诱导率为93.5%;愈伤组织芽苗再分化培养基为1/2DR+TDZ 3.30 mg·L^-1+KT 0.70 mg·L^-1,分化率达99.8%以上. 成功建立了天目铁木嫩茎尖离体诱导愈伤组织和芽苗再分化体系,且再生芽苗与野生植株染色体数目相同.     

基于均匀设计优化深山草莓花瓣离体培养及植株再生体系

应用均匀设计法对深山草莓花瓣诱导愈伤组织和愈伤组织再分化芽苗的主要因子和水平进行了探讨.结果表明,深山草莓花瓣愈伤组织诱导的适宜培养基为LS+TDZ 2.06 mg.L-1+2,4-D 0.60 mg.L-1,诱导率为98%;愈伤组织再分化芽苗的适宜培养基为1/2 LS+TDZ 2.30 mg.L-1+NAA 0.10 mg.L-1+KT1.30 mg.L-1,分化率为96.3%.炼苗移栽后观察植株的形态、花、果及生长等特征,以筛选具有优良性状的株系.     

DMSO对籼稻广陆矮4号种子愈伤组织诱导、再分化和过氧化物酶同工酶谱的影响

本文以二甲亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)作为外源因素研究其对培养的植物外植体的影响。 材料与方法 籼稻广陆矮4号(Oryza Satira L.Subsp.Indica CV.Guangluai 4)种子.1.1％DMSO预处理:去壳种子经酒精表面消毒后,浸于1％DMSO水溶液中,在25—30℃振荡培养6,12,24小时,并以不经DMSO溶液浸种的种子为对照。2.诱导培养基:N6,加蔗糖3％,2.4-D3mg/l,KT0.5mg/l,pH5.8。分化培养基:MS,加蔗糖3％,NAA0.5mg/l,KT10mg/l,水解乳蛋白500mg/l,pH5.8。培养条件:25±1℃,光照培养。接种9—10天后,统计愈伤组织诱导率,转入分化培养后15天统计分化率。3.过氧化物酶同工酶凝胶电泳:按照方国伟等的方法进行。     

蝴蝶兰的快速繁殖和规模化栽培技术研究

以蝴蝶兰的花梗、幼叶、茎尖和根尖为外植体,对影响原球茎发生、增殖、分化、炼苗和规模化栽培等外部因子进行了系统研究.试验结果表明:幼叶与茎尖是蝴蝶兰原球茎诱导的较佳外植体;1/2 MS+3 mg/L 6 BA+10%椰子汁+3%蔗糖是蝴蝶兰原球茎增殖的理想培养基;1/2 MS+0.1mg/L NAA+2%蔗糖+15%椰子汁是原球茎分化的适宜培养基;活性炭可促进生根壮苗.     

水稻花粉去分化新激素的探索

通过本文研究的种胚预测法和随后进行的花药培养实验,从22种化合物中初步发现三种具有促进花粉去分化作用的物质。其中,MCPA 诱导愈伤组织能力超过对照2,4—D,TCP 和2,4,5—T 的诱导效果与2,4—D 相近。研究结果表明,从各类除草剂中探索花粉去分化新激素并深入研究其机理,可能是花培研究中一项有意义的工作。     

水稻花药培养诱导花粉绿苗最适条件探讨

水稻花药培养单倍体育种技术在水稻育种上具有重要意义.这不仅能缩短育种工作年限,而且具有提纯复壮作用,是一种多、快、好、省的育种新技术.本文探讨水稻花药培养诱导花粉绿苗最适条件,分为诱导花粉愈合组织、愈合组织的分化和简化培养基问题等三个方面内容,综合了1974年第一次全国花粉培养工作经验交流会议以来国内兄弟单位试验研究成果,结合自己工作并借鉴国外有用资料,提出了我们的看法,以期获得更多水稻花粉绿苗,更多水稻新品种,为提高我国粮食产量,实现四个现代化作出应有的贡献.     

温泉瓶尔小草离体培养及种质试管保存培养基的筛选

以温泉瓶尔小草新生幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适宜的离体培养和种质试管保存各阶段培养基.结果表明,最适合愈伤组织诱导的培养基为WPM＋ZT0.50 mg·L-1＋2,4-D1.90 mg·L-1,诱导率为96.5%;芽苗分化的培养基为WPM＋ZT1.70 mg·L-1＋NAA0.10 mg·L-1,分化率为99.0%;生根培养基为1/4MS＋IAA0.05 mg·L-1＋IBA0.03 mg·L-1,生根率达97.8%以上;试管保存培养基为WPM＋KT1.10 mg·L-1＋根皮苷3.20 mg·L-1,通过24个月的保存,芽苗生长率仅在6.5%以下.试验结果证明,成功建立了温泉瓶尔小草离体培养体系,常温条件下利用延缓生长的方法在试管内保存温泉瓶尔小草种质是可行的.     

彩色棉再生体系影响因子及抗病基因NP-1转化的研究

选用彩色棉优良品种(棕色)：新彩1号、新彩2号，以下胚轴和子叶作为外植体，确立了5～6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体，不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用，2，4—D是愈伤组织诱导中重要的激素，在附加有0．1mol／L2，4—D 0．1mol／LKT的MSB培养基上，诱导形成的愈伤组织质地疏松、生长旺盛，有利于分化为胚性愈伤，比较了不同糖源在愈伤组织诱导中的效应，在蔗糖和葡萄糖为糖源的培养基中，愈伤组织诱导率均为100％，但葡萄糖更有利于愈伤组织的形成和生长，蔗糖的诱导效果次之；麦芽糖和乳糖对愈伤组织的诱导效应不及蔗糖和葡萄糖；甘露醇作为糖源则抑制了愈伤组织的诱导和生长，在胚性愈伤组织的诱导培养中，KNO3加倍和NH4NO3减半的组合利于胚性愈伤组织的发生，在根癌农杆菌介导的抗病基因兔防御素NP—1转化过程中。外植体经农杆菌浸染10min，共培养48h较为合适，在添加头孢霉素500mg／L、卡那霉素50mg／L的培养基中筛选抗性愈伤组织。     

外沅激素在水稻花药培养中的作用

采用 N_6基本培养基,以 MCPA(2ppm)作为外沅激素,对水稻花药培养中的激素作用问题进行了研究。实验结果表明:虽然在无激素条件下少数花粉可以进行雄核发育,但外沅激素对愈伤组织的诱导,生长及其以后的分化均有重要的促进作用。根据培养不同时期的花药转移实验,发现外沅激素的作用在去分化培养阶段的全过程中都有所表现。但激素在培养前期的作用侧重对愈伤组织诱导率的影响;在培养后期则侧重对愈伤组织生长及其以后分化的影响。     

马铃薯提取液中生理活性物质的研究 Ⅰ 马铃薯提取液对莴苣(Lactuca sativa L.)愈伤组织的形成和生长的影响

据许多单位研究,马铃薯培养基对水稻、小麦和烟草等花药培养均有良好效果。本文主要叙述了马铃薯提取液的原液和经过葡聚糖凝胶(Dextran Gel,G—50)分离纯化的马铃薯提取液,对莴苣髓组织圆片愈伤组织的诱导和愈伤组织继代培养生长中的影响,已发现经分离纯化的马铃薯提取液,对莴苣髓组织圆片细胞分裂的启动和愈伤组织的生长促进作用,显著地大于马铃薯原液,并发现另一部分的分离收集液对愈伤组织生长起着一定程度的阻抑作用,作者认为,马铃薯培养基的良好效果和马铃薯所含的有效成分是相关的。因此,有必要对马铃薯的有效成分进行分析鉴定,以期更好地提高马铃薯培养基的效果。     

Fenton 试剂处理2,4-D废水研究

利用Fenton试剂(Fe2+/H2O2)处理含有除草剂2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的模拟废水.结果显示,Fenton试剂对2,4-D有很好的去除效果.Fe2+和H2O2的摩尔比为1:20,在H2O2为1/2Qth理论投加量的条件下处理30mtn,2,4-D去除率达到80.0%.考察了Fe2+投加量、Fe2+和H2O2投加比、2,4-D初始浓度和pH等因素对2,4-D降解的影响.通过GC-MS和HPLC检测到反应中间产物有2,4-二氯苯酚、邻氯苯酚和对氯苯酚,氯离子在这些中间产物上释放.通过离子色谱检测到进一步氧化的产物还有小分子酸,如乙醇酸、乙醛酸、顺丁烯二酸,提出了Fenton降解2,4 -D的可能途径.     

建兰组织培养及根状茎增殖的动力学

以建兰品种小桃红根状茎为外植体,研究植物生长调节剂对根状茎增殖、分化和生根的影响,以及根状茎的增殖对培养基中营养物质消耗的变化规律。结果表明,根状茎增殖的最佳培养基是MS+6-BA 0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1,根状茎生长速度为7.33;根状茎分化的最佳培养基是MS+NAA 0.6mg·L-1+TDZ 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1,分化率为93.10%;生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+AC 0.05%,生根率为96.3%。根状茎增殖的生长量变化呈S型曲线,与细胞培养不同,各时期界限并不是很明显。培养基中碳源、氮源和磷酸盐的消耗曲线与根状茎的生长曲线基本一致。pH由于根状茎先消耗碱性盐(铵态氮)而下降,后利用硝态氮而上升。更多还原     

新疆紫草外植体诱导愈伤组织研究

以新疆紫草(Arnebia euchroma(Royle)Johnston)幼叶、子叶和胚轴作为外植体,诱导产生了愈伤组织,幼叶和子叶在MSB+NAA0.4ppm+2.4—D0.2ppm+6—BA0.6ppm的琼脂培养基上脱分化效果好,愈伤组织为白色半透明状;胚轴在LS+NAA0.4ppm+IAA1.5ppm+KT2.0ppm的琼脂培养基上脱分化较合适,愈伤组织为红、白两种颜色,平均脱分化率为68.7%,这些愈伤组织有紧密型和松散型两种形态,扫描电镜观察了紧密型白色愈伤组织的表面结构,可看到愈伤组织表面有许多突起的胚性细胞团,在继代培养过程中,多数这种愈伤组织能够再分化,形成胚芽。     

龙牙百合体细胞胚的诱导及植株再生

以龙牙百合鳞片为外植体，以MS为基本培养，通过添加不同浓度的6-BA，2，4-D，研究了其体细胞胚发生的最佳培养条件，并对体细胞胚的发生过程进行了形态学观察。结果表明：影响龙牙百合体细胞胚发生方式的因素是2，4-D。当2，4-D浓度低于0．5mg／L时，体细胞胚以直接方式发生，起源于鳞片表皮下数层细胞或深层的细胞，依次经过多细胞原胚，球形胚，心形胚，成熟胚等阶段，其形态学发育过程与合子胚相似。当2，4-D浓度适中时，体细胞胚以间接方式发生，起源于愈伤组织内部的胚性细胞团，其形态学发育过程也与合子胚相似；诱导胚性愈伤组织的最适培养基为MS＋0．5mg／L6-BA＋2．0mg／L2，4-D，在分化形成体细胞胚时，需降低或去除2，4-D。     

大麦幼胚培养的初步研究

大麦幼胚组织培养结果初步表明,两种培养基之间,两个品种之间总出愈率没有显著差异,而不同类型愈伤组织诱导率却存在差异。Ⅱ号培养基中,甲、乙两种类型愈伤组织产生比例多于Ⅰ号培养基,丙型愈伤组织正好相反。因此认为Ⅱ号培养基对大麦幼胚培养中诱导出愈及生长是较理想的。啤酒大麦品种“付8”的甲型愈伤组织比例大于高蛋白品种“Hiproly”。愈伤组织和胚芽的总过氧化物酶活性变化较大,但规律不明显,因此很难作大麦幼胚培养中愈伤组织诱导、生长及分化的指标。过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶的电泳分析,表明不同品种,培养基、组织器官之间存在一些差异。改进与扩大试验设计进一步探索提高出愈及分化率的研究正在进行中。     

始兴石斛的无菌播种及快速繁殖

以始兴石斛种子为外植体,研究了NAA、6-BA、IBA、蔗糖以及活性炭(AC)等对种子无菌萌发及快速繁殖的影响。结果表明:适合种子萌发的培养基是MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA 0.6mg.L-1+AC0.1%,萌发率可达100%;适合原球茎增殖的培养基是MS+6-BA0.8mg.L-1+NAA0.3mg.L-1+蔗糖4.5%,增殖系数为7.75倍;适合分化的培养基是MS+6-BA2.5mg.L-1+NAA0.5mg.L-1+AC0.03%,分化率为92%;适合生根的培养基是1/2MS+IBA0.5mg.L-1+AC0.05%,生根率为95.3%;以苔藓和树皮作为基质,试管苗移栽成活率可达93%以上。     

重瓣红玫瑰组织培养中培养基和培养条件的筛选

为解决重瓣红玫瑰繁殖周期长,不能满足日益增长的市场需求.以山东平阴地区培育的一种重瓣玫瑰作为实验材料,利用其带腋芽茎段为外植体,进行腋芽初代培养、继代培养、无菌苗的生根及移栽,探索其诱导、增殖、生根的最佳培养基配比及培养条件.结果表明,重瓣红玫瑰诱导芽的最佳培养基配比为MS culture medium(MS)+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)1.5 mg·L~(-1)+萘乙酸(NAA)0.1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+0.8%琼脂;芽增殖的最佳培养基配比为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 0.25 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+0.8%琼脂;最佳生根培养基为1/2MS+吲哚丁酸(IBA)1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+0.8%琼脂+黑暗条件培养.     

拟南芥菜Arabidopsis thaliana(L)Heynh的无菌培养和组织培养研究

我们对拟南芥菜无菌培养的条件作了初步研究。在培养过程中,对它的光周期反应进行试验,观察到它在25±1℃和光强度约4000勒克斯白色熒光连续光照的培养条件下,平均可在19天内开花;而以同样光强度,12小时光照/12小时黑暗交替处理时,则需要32天才能开花。据统计,经前法处理的植株,平均每株结实73.07±42.67粒,而后者则达150.00±42.67粒。同时,我们曾切取了无菌培养植株的茎段、叶柄和叶片进行组织培养,发现上述三种组织的外植体均能在附加2,4-D(0.5—5.0毫克/升)或NAA(1.0—8.0毫克/升)与KT(6-糠基氨基嘌吟,0.2或0.5毫克/升)的B_5和MS培养基上诱导出愈伤组织;并分別从它们分化出完整的再生植株。     

莴苣 (Lactuca sativa L) 髓组织的愈伤组织形成和植株再生的研究

本文研究了莴苣髓组织外植体愈伤组织的诱导形成和愈伤组织的器官分化.髓组织的外植体在含有2毫克/升NAA和2.5毫克/升KT的稍加改动的Miller培养基上只要6天时间,就可诱导产生出愈伤组织.并证明了莴苣髓组织的愈伤组织需要同时提供外源生长素和激动素才能正常增生.在愈伤组织的分化中,发现根的分化较为容易,而芽的分化则较为困难.它不但受激素的配比的影响,而且也受培养基的渗透压和离子浓度的影响.变换培养基类型有利于组织上芽的分化.从愈伤组织分化出的小苗能在试管里抽苔、开花.