始兴石斛的无菌播种及快速繁殖

以始兴石斛种子为外植体,研究了NAA、6-BA、IBA、蔗糖以及活性炭(AC)等对种子无菌萌发及快速繁殖的影响。结果表明:适合种子萌发的培养基是MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA 0.6mg.L-1+AC0.1%,萌发率可达100%;适合原球茎增殖的培养基是MS+6-BA0.8mg.L-1+NAA0.3mg.L-1+蔗糖4.5%,增殖系数为7.75倍;适合分化的培养基是MS+6-BA2.5mg.L-1+NAA0.5mg.L-1+AC0.03%,分化率为92%;适合生根的培养基是1/2MS+IBA0.5mg.L-1+AC0.05%,生根率为95.3%;以苔藓和树皮作为基质,试管苗移栽成活率可达93%以上。     

羽衣甘蓝组织培养研究

以羽衣甘蓝的花蕾、花茎和腋芽为外植体,进行组织培养试验.结果表明:花蕾、花茎消毒时间以5~7min为好,腋芽消毒时间以8 min为宜,以腋芽为外植体,以MS基础培养 6-苄基腺嘌呤(BA)2 mg 萘乙酸(NAA)0.2 mg 3%蔗糖进行培养较好,继代培养以MS基础培养 BA 3 mg NAA 0.2 mg 3%蔗糖增殖率最高;在生根阶段,以50%MS(1 L) NAA0.4 mg 1%蔗糖生根效果最好,生根率达94.79%;移栽基质以蛭石最好,羽衣甘蓝组培苗成活率达86.7%,且生长健壮.     

建兰组织培养及根状茎增殖的动力学

以建兰品种小桃红根状茎为外植体,研究植物生长调节剂对根状茎增殖、分化和生根的影响,以及根状茎的增殖对培养基中营养物质消耗的变化规律。结果表明,根状茎增殖的最佳培养基是MS+6-BA 0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1,根状茎生长速度为7.33;根状茎分化的最佳培养基是MS+NAA 0.6mg·L-1+TDZ 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1,分化率为93.10%;生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+AC 0.05%,生根率为96.3%。根状茎增殖的生长量变化呈S型曲线,与细胞培养不同,各时期界限并不是很明显。培养基中碳源、氮源和磷酸盐的消耗曲线与根状茎的生长曲线基本一致。pH由于根状茎先消耗碱性盐(铵态氮)而下降,后利用硝态氮而上升。更多还原     

太空莲根状茎离体繁殖初代培养条件

以太空莲3号根状茎为实验材料,研究了培养基成分、培养基状态、取材部位和取材时间对其初代培养的影响。研究结果表明:(1)初代培养的最佳培养基为:下层为MS+0.5mg·L-1NAA(单位下同)+0.5GA3+1.56-BA+30.0Vc+0.1%活性碳的固体培养基,上层为3-4mm厚的MS+0.5NAA+0.5GA3+1.56-BA+30.0Vc的液体培养基;(2)顶芽培养明显优于侧芽,侧芽培养多为无效;(3)取材时间在10月-12月外植体处于休眠前期为佳,污染率低,诱导率高。     

金边瑞香茎尖脱毒及快繁技术

报道了金边瑞香顶芽在MS 0.05 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA培养基中预培养20 d,再在34 ℃(11 h) 23 ℃(13 h)的昼夜温度交替下处理30 d后,剥离0.2～0.3 mm大小的茎尖在MS 0.1 mg/L6-BA 0.1 mg/LNAA培养基中的诱导成活率为80.0%,并获得脱毒苗.继代和增殖培养基为MS 0.5～1.0 mg/L6-BA 0.1 mg/LNAA,增殖系数4.1.试管苗在适宜培养条件下平均生根率为82.6%,在珍珠岩:泥炭=2:1基质中生根苗移栽成活率达到96.46%.     

温泉瓶尔小草离体培养及种质试管保存培养基的筛选

以温泉瓶尔小草新生幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适宜的离体培养和种质试管保存各阶段培养基.结果表明,最适合愈伤组织诱导的培养基为WPM＋ZT0.50 mg·L-1＋2,4-D1.90 mg·L-1,诱导率为96.5%;芽苗分化的培养基为WPM＋ZT1.70 mg·L-1＋NAA0.10 mg·L-1,分化率为99.0%;生根培养基为1/4MS＋IAA0.05 mg·L-1＋IBA0.03 mg·L-1,生根率达97.8%以上;试管保存培养基为WPM＋KT1.10 mg·L-1＋根皮苷3.20 mg·L-1,通过24个月的保存,芽苗生长率仅在6.5%以下.试验结果证明,成功建立了温泉瓶尔小草离体培养体系,常温条件下利用延缓生长的方法在试管内保存温泉瓶尔小草种质是可行的.     

蝴蝶兰的快速繁殖和规模化栽培技术研究

以蝴蝶兰的花梗、幼叶、茎尖和根尖为外植体,对影响原球茎发生、增殖、分化、炼苗和规模化栽培等外部因子进行了系统研究.试验结果表明:幼叶与茎尖是蝴蝶兰原球茎诱导的较佳外植体;1/2 MS+3 mg/L 6 BA+10%椰子汁+3%蔗糖是蝴蝶兰原球茎增殖的理想培养基;1/2 MS+0.1mg/L NAA+2%蔗糖+15%椰子汁是原球茎分化的适宜培养基;活性炭可促进生根壮苗.     

新疆紫草外植体组织培养和植株再生

新疆紫草[Arnebia euchroma (Rovle) Johnston]嫩芽和幼叶切段在含有不同激素组合的琼脂培养基上产生了愈伤组织,其中在MSB+0.4mg/L NAA+0.2mg/L 2.4—D+1.0mg/L KT中愈伤组织诱导率较高,达82.2％.这些愈伤组织经过继代,生长很快。转入分化培养基后,愈伤组织表面产生了很多不定芽和少量胚状体。不定芽经扶壮,诱导生根,生长成完整植株并移栽成活。     

蕙兰（Cymbidium faberi）原球茎增殖培养条件的研究

用液体振荡培养法研究培养其中不同浓度的萘乙酸（NAA）与6－苄基腺嘌呤（6－BA）配比对蕙兰原球茎增殖的增响，发现最佳培养基为：MS＋0．5mg/L NAA 1.0mg/L 6-BA,第36天统计，其增殖率为371％，此外，还进一步试验了在该培养基中加入不同种类的天然提取物对原球茎增重的影响，结果表明；原球茎增重最佳的附加天然提取物是10％椰乳，第36天统计，其增重率为936％。     

东方旱麦草胚状体诱导和无性繁殖体系的建立

通过对东方早麦草无菌种子脱分化培养、继代培养、再分化培养的研究．建立了东方早麦草无性快速繁殖体系。结果表明：(1)2，4-D2．0mg／l KT0．2mg／l 肌醇100mg／l的MS培养基能促进东方早麦草幼芽脱分化；(2)2，4-D1．0mg／l KTO．3mg／l 肌醇100mg／l 天冬素150mg／l并以麦芽糖代替蔗糖的MS培养基能促进东方早麦草胚性愈伤组织、胚状体的产生；(3)胚状体在NAA0．1mg／l 大量元素110％的MS培养基上萌发生根．此体系为东方早麦草快速繁殖提供了一条新途径．     

山荷叶离体培养和种质试管保存技术研究

摘要：以山荷叶新生嫩叶为外植体,基于均匀设计法筛选其最适宜的离体培养和种质试管保存各阶段培养基.结果表明,最适合愈伤组织诱导的培养基为MS+6 BA 1.00 mg·L-1+IBA 0.08 mg·L-1,诱导率为99.7%;愈伤组织再分化培养基为MS+6 BA 2.80 mg·L-1+IBA 0.02 mg·L-1+GA30.90 mg·L-1,分化率为99.5%;生根培养基为1/6MS+IAA 0.02 mg·L-1+IBA 0.04 mg·L-1,生根率达99.2%以上;试管保存培养基为1/4MS+6 BA 0.10 mg·L-1+根皮苷2.50 mg·L-1,通过27个月的保存,芽苗生长率仅在7.9%以下.试验结果证明,成功建立了山荷叶离体培养体系,常温条件下利用延缓生长的方法在试管内保存山荷叶种质是可行的.     

重瓣丝石竹试管苗玻璃化发生原因初探

本文研究了引发重瓣丝石竹 (Gypsophila paniculata L. ) 试管苗玻璃化现象发生的若干因素 .结果表明 ,外植体取材部位显著影响玻璃苗发生频率 ,重瓣丝石竹玻璃苗发生频率以中部茎段最高 , 远高于顶芽和基部茎段. 培养基内较高浓度的细胞分裂素 , 尤为高浓度B A5mg L- 1 ,是影响玻璃苗发生的主要原因 . 琼脂浓度 ,蔗糖及培养温度等对玻璃苗发生率的影响 ,依培养基中激素的状况而异.添加适量硝酸钾 ,可以完全抑制玻璃苗的发生     

铁皮石斛叶肉原生质体的分离与培养研究

对铁皮石斛无菌试管苗叶片原生质体的游离及培养条件进行了研究.结果表明原生质体分离的适宜酶液配比是0.5%Pectinase和1.0%Cellulase Onozuka R-10,渗透压调节剂的浓度为0.5 mol/L,以蔗糖作为渗透压调节剂优于甘露醇和葡萄糖,质壁分离处理后的叶片原生质体产量提高了16.6%,存活率提高了14.2%.培养在1/10 MS附加2 mg/LNAA+0.5 mg/L6-BA和多种有机成分培养基上的铁皮石斛无菌苗叶片原生质体,3～5 d后开始第一次分裂,30 d后长成胚性细胞团.弱光照(150 1x)和稍低的温度((21±0.5)℃)适于原生质体的培养.     

甜叶菊增殖培养及~(60)Co-γ诱变生物效应

为获得甜叶菊的最佳增殖培养基以及60 Co-γ辐射诱变育种的剂量,以无菌甜叶菊茎段为外植体,采用正交实验对其增殖培养基的激素种类和浓度进行优化;在此基础上,分别采用5、15、30、60、90、120和150Gy剂量的60Co-γ射线对甜叶菊茎段进行辐照诱变,每隔15d记录其生长情况,统计死亡率;并测定≤30Gy剂量处理的叶片中可溶性多糖和可溶性蛋白质的含量。结果表明,甜叶菊茎段增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.5mg·L-1+TDZ0.1mg·L-1+6-BA 1.0mg·L-1。60 Co-γ射线诱变的半致死剂量(LD50)为24Gy,处理后的甜叶菊外观呈现显著差异,随着辐射剂量的增强,30d后甜叶菊死亡率分别为1.7%,2.4%,20.5%,92.7%,98.9%,99.4%,100%,辐射剂量是5、15、30Gy时,可溶性多糖含量较对照组分别增加76.77%,26.73%,15.29%,表明辐照诱变导致甜叶菊试管苗短期的应激效应。研究结果为甜叶菊的辐照诱变育种提供了理论参考。     

麻黄组织培养及诱导枝条生根条件初探

本文包括两方面的工作，一是麻黄组织培养，由愈伤组织诱生不定芽；二是诱导自然生长的麻黄枝条段生根，在第一部分工作中，木贼麻黄(Ephedra equisatina Bge)无菌苗子叶切段在M4(MS 2．4-D1．5mg／L KT0．5mg／L)上脱分化效果好，愈伤组织白色透明，生长快，在第二部分工作中。选用中麻黄(Ephedra，intermedia)自然生长的枝条段为材，经过多种处理发现，以20ppmNAA溶液浸泡枝条6h。扦插入粗沙中对生根有利．埋入沙中的结节处膨大。呈浅黄色，同时，灭菌麻黄枝条段在Ⅱ号培养基(1／2MS KT0．1mg／L NAA3．0mg／L)中生长良好，末端膨大，接触培养基的枝条韧皮部产生较多的愈伤组织。     

DMSO对籼稻广陆矮4号种子愈伤组织诱导、再分化和过氧化物酶同工酶谱的影响

本文以二甲亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)作为外源因素研究其对培养的植物外植体的影响。 材料与方法 籼稻广陆矮4号(Oryza Satira L.Subsp.Indica CV.Guangluai 4)种子.1.1％DMSO预处理:去壳种子经酒精表面消毒后,浸于1％DMSO水溶液中,在25—30℃振荡培养6,12,24小时,并以不经DMSO溶液浸种的种子为对照。2.诱导培养基:N6,加蔗糖3％,2.4-D3mg/l,KT0.5mg/l,pH5.8。分化培养基:MS,加蔗糖3％,NAA0.5mg/l,KT10mg/l,水解乳蛋白500mg/l,pH5.8。培养条件:25±1℃,光照培养。接种9—10天后,统计愈伤组织诱导率,转入分化培养后15天统计分化率。3.过氧化物酶同工酶凝胶电泳:按照方国伟等的方法进行。     

瓯柑愈伤组织的玻璃化法超低温保存研究

采用玻璃化法对瓯柑愈伤组织进行超低温保存研究.瓯柑愈伤组织在含5%二甲亚砜(DMSO)的MS培养基上预培养5 d,室温下60%PVS2预处理20 min,然后用100%PVS2于0℃处理40 min,投入液氮(LN)保存,24h后在40℃水浴中迅速化冻,再用1.2 mol/L蔗糖培养液洗涤3次.用氯化三苯四氯唑(TTC)法检测,其存活率可达85.62%.冻后的愈伤组织转移到MS+6-BA 0.5 mg/L继代培养基上,在黑暗中培养生长,存活率可达76.32%.分析讨论了瓯柑愈伤组织玻璃化法超低温保存中存在的一些问题及意义,并对其前景进行了展望.     

基于均匀设计法优化长白舌唇兰和凹舌兰的高效快繁体系

以长白舌唇兰和凹舌兰的茎尖为外植体,应用均匀设计法筛选最适合于原球茎和类原球茎诱导及类原球茎萌发为完整植株的培养基.结果表明,最适合长白舌唇兰原球茎和类原球茎诱导的培养基为N6+TDZ0.05 mg.L-1+NAA0.01 mg.L-1+KT0.50 mg.L-1,诱导率为92.5%;最适合凹舌兰原球茎和类原球茎诱导的培养基为N6+TDZ0.05 mg.L-1+KT0.50 mg.L-1,诱导率为98%;长白舌唇兰类原球茎萌发为完整植株的最佳培养基为N6+IAA0.01 mg.L-1,萌发率为96%;凹舌兰类原球茎萌发为完整植株的最佳培养基为N6+IAA0.01 mg.L-1+GA30.01 mg.L-1,萌发率为94.5%.以类原球茎的切片为材料进行类原球茎快繁的结果表明,在30～40 d的一个培养周期内,增殖倍数达100以上,成功建立了两种兰的高效快繁体系.同时对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了两种兰的类原球茎发生发育过程.     

唑来膦酸/白介素-2诱导的中国恒河猴外周血γδT细胞体外扩增

建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法。采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴(rhesus macaque)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用含5%猴自体血清、1 000 U·mL~(-1)白介素-2(IL-2)和不同浓度唑来膦酸(1,5,10μmol·L~(-1))的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细胞仪进行纯度及表型分析。结果显示:使用含不同浓度唑来膦酸培养基诱导第8 d时,1μmol·L~(-1)和5μmol·L~(-1)处理组的猴γδT细胞分别扩增至总细胞的91. 4%和93. 1%;5μmol·L~(-1)处理组表达CD56、CD69及HLA-DR蛋白的猴γδT细胞占总细胞的比例分别为75. 6%、75. 5%以及78. 0%;5μmol·L~(-1)处理组表达干扰素IFN-γ的猴γδT细胞比例为84. 8%。本研究通过优化培养基的组成成分,仅添加猴自体血清和IL-2即能有效诱导猴γδT细胞在体外的大量扩增,且培养得到的猴γδT细胞能够显著表达CD56、CD69、HLADR及IFN-γ,并具有较强的免疫激活和细胞杀伤作用。     

基于分子印迹-量子点荧光材料的双酚A检测技术研究

利用分子印迹聚合物的高选择性和量子点的优良荧光特性,制备获得了对双酚A(BisphenolA,BPA)具有特异荧光响应的分子印迹-量子点纳米结构聚合物(MIP-QDs),并应用于痕量BPA的测定.采用扫描电镜、红外光谱、选择性分析等对获得的MIP-QDs特征进行分析,表明其对BPA具有较高的选择性响应.在此基础上获得的MIP-QDs最佳反应体系如下:水:乙醇=6:4 (V/V)、pH为5.0、Na Cl质量浓度3.5%.在最佳条件下, MIP-QDs在0.002～10.0 mg·L~(-1)时,抑制剂浓度与(F——0-F)/F之间具有较好的线性关系,相关系数为0.998 3,LOD为0.75μg·L~(-1).在添加质量浓度分别为0.002,0.1,2.0 mg·L~(-1)时,回收率为96.8%～102.8%,相对标准偏差(RSD)低于7.4%.结果表明,获得的MIP-QDs对BPA具有较好的选择性荧光抑制性能.