A Study on the Effect of Environmental and Genetic Factors on Postmenopausal Osteoporosis in Wenzhou Women

为探讨温州地区绝经后女性骨质疏松症( Postmenopausal osteoporosis,PMOP)与雌激素受体基因( Estrogen receptor,ERa)多态性及相关因素的关联性,将203例观察对象按骨质疏松症诊断标准分为骨量正常组、骨量减少组与PMOP组,分别检测各组观察对象的腰椎L1-4正位骨密度、Pvu Ⅱ、Xba Ⅰ基因型并调查其膳食行为与运动习惯等项目.结果显示:(1)年龄越大、文化程度越低、身材矮小及BMI低者、妊娠次数越多、产次越多者易罹患PMOP;经常饮用牛奶、豆浆、茶,经常食用水产品、豆类、肉类、蛋类、水果、坚果及每月运动次数较多者与高骨密度有关;在校正年龄、文化程度、BMI等干扰因素之后,饮茶、食用水果、坚果类的次数与BMD呈正相关.(2)该研究未发现Pvu Ⅱ与Xba Ⅰ基因型与PMOP间有关联.提示该地区膳食行为、环境因素与PMOP关系密切,但雌激素受体α多态性与骨密度间关系尚不明确,其对骨质疏松的预测价值尚待深入研究.     

大豆异黄酮对骨质疏松模型大鼠骨量及微观结构的影响

为研究大豆异黄酮（SI）对骨质疏松模型大鼠骨量及微观结构的影响,将46只雌性SD大鼠双侧摘除卵巢,术后一周按血清总胆固醇水平随机分为5组,分别给予雌激素,低、中、高剂量SI干预并设正常对照组,实验周期为12周,灌胃给药,每周称质量一次,分别在去卵巢、给药4、8周处死时抽取尾静脉血,实验结束后分别测定血清碱性磷酸酶（AKP）活性及骨密度等指标。结果表明,高剂量SI干预对维持大鼠骨密度的作用与雌激素相似,去卵巢后干预SI可提高碱性磷酸酶（AKP）活性并能缓解因去卵巢造成的骨丢失,全视野下骨形态学以雌激素组、高剂量SI干预组与正常组结构最为接近。提示大豆异黄酮对骨质疏松模型大鼠的骨量及微观结构存在一定影响,中、高剂量干预可使骨质疏松模型大鼠血清AKP酶活性增加、逆转因去势造成的骨密度下降,考虑到植物雌激素与哺乳动物的雌激素受体（ER）结合能力低下,采用SI在临床开展干预的剂量与远期效果尚待进一步论证。     

Effect of Soybean Isoflavone on Bone Mass and Ultrastructural in Ovariectomized Rat Model of Osteoporosis

为研究大豆异黄酮(SI)对骨质疏松模型大鼠骨量及微观结构的影响,将46只雌性SD大鼠双侧摘除卵巢,术后一周按血清总胆固醇水平随机分为5组,分别给予雌激素,低、中、高剂量SI干预并设正常对照组,实验周期为12周,灌胃给药,每周称质量一次,分别在去卵巢、给药4、8周处死时抽取尾静脉血,实验结束后分别测定血清碱性磷酸酶(AKP)活性及骨密度等指标.结果表明,高剂量SI干预对维持大鼠骨密度的作用与雌激素相似,去卵巢后干预SI可提高碱性磷酸酶(AKP)活性并能缓解因去卵巢造成的骨丢失,全视野下骨形态学以雌激素组、高剂量SI干预组与正常组结构最为接近.提示大豆异黄酮对骨质疏松模型大鼠的骨量及微观结构存在一定影响,中、高剂量干预可使骨质疏松模型大鼠血清AKP酶活性增加、逆转因去势造成的骨密度下降,考虑到植物雌激素与哺乳动物的雌激素受体(ER)结合能力低下,采用SI在临床开展干预的剂量与远期效果尚待进一步论证.     

影响骨质疏松症老年人的微量元素及膳食因素探讨

目的分析探讨骨质疏松症老年人微量元素含量变化。方法选取2014年7月—2015年6月到佛山市第一人民医院就诊的老年患者200例为研究对象,男性53例,女性147例,根据BMD分组为正常组、骨量低下组与骨质疏松组,对比分析男性与女性,不同BMD分组之间的微量元素含量。结果女性腰椎和股骨颈骨密度均明显低于同年龄的男性(P0.05),且绝经后女性更容易发生骨质疏松。男性微量元素Fe、Zn、Cd含量显著高于女性(P0.05);而Cu含量则显著低于女性(P0.05)。男性组中,骨质疏松组血清Fe、血清Cd含量均显著高于骨量正常组(P0.05)。女性组中,骨质疏松组血清Se、血清Pb含量显著高于正常组(P0.01)。结论老年骨质疏松症的发生与老年人机体内微量元素含量降低、营养代谢能力减弱等因素存在较大关系,故积极探究影响骨质疏松症老年人的微量元素及膳食因素具有重要意义。     

基于雌激素β受体结构雌激素类化合物的三维定量结构-活性关系与分子对接研究

雌激素类化合物由于其对人和野生动物健康的负面影响而受到广泛关注.雌激素受体存在α和β两种亚型,由于雌激素β受体（ERβ）与α受体（ERα）两者结合腔中的氨基酸序列存在明显差异,因此配体化合物在与雌激素β受体和α受体的结合活性和模式上也可能存在较大差别.本文以50个与雌激素β受体结合的化合物为研究对象,应用比较分子相似性指数分析（COMSIA）的三维定量结构-活性关系（3D-QSAR）分析方法研究化合物结构与活性之间的关系,比较了原子契合和基于受体结构两种分子叠合方式对模型质量的影响,建立了相关性显著、预测能力强的定量活性预测模型（R^2=0.961,qLOO^2=0.671,R^2Pred=0.722）,并结合分子对接方法揭示了影响化合物活性的分子结构特征和分子机理.     

血清外泌体的蛋白质组分析及其在骨质疏松中的应用

外泌体是细胞分泌的微小具膜囊泡，作为重要媒介参与细胞间的信号传递，已在疾病的诊断和治疗中发挥独特作用。骨质疏松症是全身性骨代谢疾病，容易引起骨密度减少并导致骨折，在老年人群中发病率很高，目前急需发展特异性体液诊断技术。本论文采用超速离心的方法，对血清中的外泌体进行了分离富集和表征，并采用液相色谱-质谱进行了外泌体蛋白质组学分析，共鉴定到了179个外泌体蛋白质，主要参与防御响应和免疫应答等生物过程。针对来自正常对照组、骨量减少组和骨质疏松组的血清样本，分离富集其中的外泌体，通过免标记定量蛋白质组学分析，分别鉴定到188、224和185个蛋白质。定量分析显示17个蛋白质的表达量在骨质疏松组和骨量减少组有显著改变（p<0.05），包括Integrin β 3、Integrin α 2 β 1、Talin 1和Gelsolin等，说明人体骨质在衰变过程中发生了系统性变化，并体现在血清外泌体中。该研究可为骨质疏松研究提供潜在的分子标志物，有助于阐明其病变机制。     

利骨素协同尼尔雌醇干预去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱及其机制

通过测定骨元素含量和血清相关激素及白细胞介素-6水平,探讨了尼尔雌醇和联合应用尼尔雌醇＋利骨素对去卵巢大鼠骨元素代谢的影响及其机制。将健康4月龄雌性SD大鼠24只随机分成4组：A组,假去卵巢组;B组,去卵巢组;C组,去卵巢＋CCE3（全量）组;D组,去卵巢＋CCE3（半量）＋利骨素。结果表明,与A组比较,B组大鼠骨Ca、Mg、S、Mn、Zn等含量显著降低,P含量显著增加;C组和D组均可使去卵巢大鼠骨Ca、Mg、S、Mn、Zn等含量显著回升,P含量显著回降,而D组的作用优于C组;血清相关激素的改变：与A组比较,B组大鼠,血清雌二醇（E2）,孕酮（P）,生长激素（GH）,降钙素（CT）促甲状腺激素（TSH）,甲状腺素（T4）,Cortisol等含量降低,卵泡刺激素（FSH）,黄体生成素（LH）,白细胞介素-6（IL-6）等含量升高,与B组比较,C组和D组大鼠,血清E2,P,GH,CT,TSH,T4,Cortisol等含量回升,FSH,LH,IL-6等含量回降。提示利骨素可协同尼尔雌醇改变去卵巢大鼠体内相关激素和细胞因子水平,是利骨素协同尼尔雌醇干预去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱的重要机制。     

氟化物对幼年大鼠骨矿物质和血微量元素的影响及其相关性研究

为探讨氟化钠对幼年大鼠血清4种微量元素和骨矿物质含量的影响,以及大鼠骨矿物质和血清微量元素的相关性,将80只2月龄SPF级SO大鼠,雌雄各半,随机分成8组：对照（幼年CS、成年AS）组和用药组（幼年高氟组CHS、幼年低氟组CLS、成年高氟组AHS、成年低氟组ALS、幼年长期高氟组HS、幼年长期低氟组15）。对照组灌胃生理盐水,用药组分别按相应时间给予不同剂量的NaF灌胃,测定了大鼠尺骨和血清中的Ca、P、Fe、Zn含量。结果表明,（1）血清微量元素：①与cs组相比,CHS组和CLS组的磷（P）分别增加100．0％和193．8％（P〈0．05）。②与AS组相比,HS组的Ca、Zn分别下降了20．5％和40．0％,而P则增加了74．0％（P〈0．05）;Ls组的Zn下降了33．3％（P〈0．05）。与HS组比较,CHS组的Ca增加22．3％。③与LS组比较,CLS组的P和Zn明显增加49．2％和28．5％（P〈0．05）。（2）骨矿物质：①与As组相比,HS组的Ca分别下降了23．9％（P〈0．05）,Zn则增加了36．1％（P〈0．05）。②与HS组相比,CHS组的Ca和Fe分别增加了42．3％和36．05％,Zn下降了38．6％（P〈0．05）。（3）骨矿物质和血清微量元素的相关性：骨Ca和血Ca、骨P和血P、骨Zn和血Zn、骨Fe和血Fe的相关系数分别为0．435、0．347、0．136和0．059（P〉0．05）。提示长期使用氟化钠,可以导致幼年大鼠血中微量元素代谢紊乱,骨矿物含量降低,但未确定大鼠骨矿物含量和血微量元素具有相关性。     

覆膜金属罐中PBT/PET环状低聚物在食品中的迁移测试及基于膳食暴露量的风险评估

该文建立了一种超高效液相色谱－四极杆飞行时间质谱联用技术（UPLC－QTOF MS）测定覆膜金属罐包装食品中聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）和聚对苯二甲酸丁二醇酯（PBT）环状低聚物迁移量的方法。利用我国人群食物消费量、与食品接触面积和食品单位质量/体积比（S/V）的调查数据以及PET和PBT环状低聚物迁移试验数据,估算了我国人群对摄入的水果罐头、饮料和啤酒等以覆膜金属罐包装食品中PET和PBT环状低聚物的膳食暴露量,并按照毒理学关注阈值（TTC）决策树方法对其进行风险评估。结果显示,6种PET和PBT环状低聚物均属于Cramer Ⅲ类结构;其膳食暴露量最大值为1.234 μg/kg·BW/d,低于Cramer Ⅲ类物质的阈值1.5 μg/kg·BW/d。表明通过摄入覆膜金属罐包装的水果罐头、饮料和啤酒暴露于PBT和PET环状低聚物所引起的健康风险较低。     

电活性可生物降解纳米复合材料PAP/op-HA/PLGA的制备及成骨活性

以苯胺五聚体与聚乳酸（PLA）的三嵌段共聚物（PAP）与表面接枝低聚乳酸的纳米羟基磷灰石（op-HA）和聚丙交酯-乙交酯（PLGA）的复合物共混,制备的电活性可降解纳米复合材料PAP/op-HA/PLGA为研究对象,采用紫外可见光谱、循环伏安扫描和标准四探针法分析其电化学特性及电导率。ESEM观察其膜表面形貌,接触角评价其亲水性。通过在材料膜表面接种兔成骨细胞进行体外培养,采用荧光染色、NIH Image J图像分析和Real-time PCR综合评价细胞在材料表面的粘附、扩展（细胞面积比）和成骨相关基因的表达水平,以此评价新型电活性纳米复合骨修复材料PAP/op-HA/PLGA的表面性质和生物活性。结果表明,PAP/op-HA/PLGA的电导率较低（~5?10?6 S/cm）但具有良好的电化学氧化还原性能,PAP含量为0.1%时材料的亲水性明显改善,成骨细胞的粘附和扩展明显增强。培养7天时骨形态蛋白- 2（BMP-2）和骨连接蛋白（Osteonectin）的基因表达水平明显提高,而对Ⅰ型胶原蛋白的基因表达没有明显影响。提示PAP/op-HA/PLGA具有良好的细胞相容性和成骨活性。     

基于MRI的绝经后女性腰椎退行性病变程度与骨质疏松的相关性研究

本研究探讨基于磁共振成像(MRI)的绝经后女性腰椎退行性病变程度与骨质疏松的关系。选取经骨密度检查确诊的骨质疏松绝经后女性患者50例为骨质疏松组、非骨质疏松症绝经后妇女50例作为对照组,两组妇女均接受MRI检查。结果显示,骨质疏松组的L1/L2、L2/L3、L3/L4、L4/L5、L1~S1椎间盘Pfirrmann分级评分均高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);骨质疏松组患者的腰椎L1/L2、L2/L3、L3/L4、L4/L5、L1~S1之间的BMD与椎间盘Pfirrmann分级评分呈显著的正相关关系(P<0.05);多元线性回归模型结果显示:绝经时间、年龄、腰椎BMD值与患者椎间盘Pfirrmann分级评分呈显著的正相关关系(P<0.05)。绝经后女性采用MRI检查评估的腰椎退行性病变程度Pfirrmann分级评分与骨质疏松程度有关,同时与患者的年龄、绝经时间长度有关。     

Association of ADIPOR1 polymorphisms with bone mineral density in postmenopausal Korean women

Adiponectin may affect bone through interactions with two known receptors, adiponectin receptors (ADIPOR) 1 and 2. We examined the association between polymorphisms of ADIPOR1 and ADIPOR2 and bone mineral density (BMD) in postmenopausal Korean women. Six polymorphisms in ADIPOR1 and four polymorphisms in ADIPOR2 were selected and genotyped in all study participants (n = 1,329). BMD at the lumbar spine and femur neck were measured using dual-energy X-ray absorptiometry. Lateral thoracolumbar (T4-L4) radiographs were obtained for vertebral fracture assessment and the occurrence of non-vertebral fractures examined using self-reported data. P values were adjusted for multiple testing using Bonferroni correction (P(corr)). ADIPOR1 rs16850799 and rs34010966 polymorphisms were significantly associated with femur neck BMD (P(corr) = 0.036 in the dominant model; P(corr) = 0.024 and P(corr) = 0.006 in the additive and dominant models, respectively). Subjects with the rare allele of each polymorphism had lower BMD, and association of rs34010966 with BMD showed a gene dosage effect. However, ADIPOR2 single nucleotide polymorphisms and haplotypes were not associated with BMD at any site. Our results suggest that ADIPOR1 polymorphisms present a useful genetic marker for BMD in postmenopausal Korean women.     

Methionine synthase reductase polymorphisms are associated with serum osteocalcin levels in postmenopausal women

Homocysteine (Hcy) is thought to play an important role in the development of osteoporosis and fracture. Methionine synthase reductase (MTRR) is an enzyme involved in the conversion of Hcy to methionine. We hypothesized that certain genetic polymorphisms of MTRR leading to reduced enzyme activity may cause hyperhomocysteinemia and affect bone metabolism. We therefore examined the associations of the A66G and C524T polymorphisms of the MTRR gene with bone mineral density (BMD) and serum osteocalcin levels in postmenopausal women. Although we did not detect any significant associations between MTRR polymorphisms and BMD or serum osteocalcin levels, we found that the 66G/524C haplotype, which has reduced enzyme activity, was significantly associated with serum osteocalcin levels in a gene-dose dependent manner (P = 0.002). That is, the highest osteocalcin levels (34.5 +/- 16.8 ng/ml) were observed in subjects bearing two copies, intermediate osteocalcin levels (32.6 +/- 14.4 ng/ml) were observed in subjects bearing one copy, and the lowest levels of osteocalcin (28.8 +/- 10.9 ng/ml) were observed in subjects bearing no copies. These results suggest that the 66G/524C haplotype of the MTRR gene affect bone turn over rate.     

Association of Paraoxonase 1 (PON1) polymorphisms with osteoporotic fracture risk in postmenopausal Korean women

There is increasing evidence of a biochemical link between lipid oxidation and bone metabolism. Paraoxonase 1 (PON1) prevents the oxidation of low-density lipoprotein (LDL) and metabolizes biologically active phospholipids in oxidized LDLs. Here, we performed association analyses of genetic variation in PON1 to ascertain its contribution to osteoporotic fractures (OFs) and bone mineral density (BMD). We directly sequenced the PON1 gene in 24 Korean individuals and identified 26 sequence variants. A large population of Korean postmenopausal women (n=1,329) was then genotyped for eight selected PON1 polymorphisms. BMD at the lumbar spine and femoral neck was measured using dual-energy X-ray absorptiometry. Lateral thoracolumbar (T4-L4) radiographs were obtained for vertebral fracture assessment, and the occurrence of non-vertebral fractures (i.e., wrist, hip, forearm, humerus, rib, and pelvis) was examined using self-reported data. Multivariate analyses showed that none of the polymorphisms was associated with BMD at either site. However, +5989A>G and +26080T>C polymorphisms were significantly associated with non-vertebral and vertebral fractures, respectively, after adjustment for covariates. Specifically, the minor allele of +5989A>G exerted a highly protective effect against non-vertebral fractures (OR=0.59, P=0.036), whereas the minor allele of +26080T>C was associated with increased susceptibility to vertebral fractures (OR=1.73, P=0.020). When the risk for any OFs (i.e., vertebral or non-vertebral) was considered, the statistical significance of both polymorphisms persisted (P=0.002-0.010). These results suggest that PON1 polymorphisms could be one of useful genetic markers for OF risk in postmenopausal women.     

髋部骨折治疗效果的影响因素研究及分析

目的分析髋部骨折治疗效果,探究其影响因素。方法选取2014年4月至2015年9月期间珠海市人民医院收治的82例髋骨骨折患者的临床资料进行回顾性分析,将其分为手术组(n=65)和非手术组(n=17),观察两组患者的治疗效果,探究其影响因素。结果非手术组患者的优良率为70.6%,手术组患者的优良率为96.9%,两组患者的优良率比较差异有统计学意义(P0.05),对本次研究中患者的年龄、性别、骨折类型、抗骨折疏松治疗等相关因素进行分析,除了性别因素外,患者的年龄、骨折类型、抗骨折疏松治疗等因素均影响治疗效果。结论手术治疗髋部骨折治疗效果明显,治疗效果与患者的年龄、骨折类型、抗骨折疏松治疗等因素均有明显的关系。     

Synthesis of 2-phenylbenzofuran derivatives and selective binding activities on estrogen receptor

An improved chemical reaction protocol with short time and easy work-up was described here for 2-phenylbenzofuran derivatives. The final purified products, 2-phenylbenzofuran derivatives 5a-g and the intermediate diols 4a-g, were evaluated for their estrogen receptor (ER) binding affinity and selective activity in vitro. Among these fourteen tested compounds, 4g and 5g showed higher binding affinity on ER subtypes, ERα and ERβ. Compound 4g exhibited preferable ERα binding, while 5g was more estrogen selective for ERβ. The molecular docking was also performed to explore the detailed interactive interface between ER and the compounds.     

骨质疏松与微量元素

骨质疏松与某些矿物质的饮食摄取不足、过量或不平衡有关，但微量元素在骨质疏松的病理、诊断和治疗中也起着十分重要的作用。适量的Ｂ、Ｆ、Ｓｉ、Ｍｎ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｇｅ、Ｓｒ和Ｖ、Ｉ、Ｍｏ对骨骼的发育和代谢是必需的，但Ｐｂ、Ｃｄ、Ａｌ则可能是骨质疏松的危险因子。高尿锌可被用作骨质疏松的生物化学标记物，锶可代替钙用作骨矿化的标记物。临床实践表明，氟可明显增加骨质疏松患者的长轴骨密度和显著降低脊椎骨新骨折的发生     

基于启发式变量筛选方法研究与雌激素β受体结合的化合物结构与活性之间的关系

雌激素类化合物由于其对人和野生动物健康的负面影响而受到广泛关注.雌激素受体存在两种亚型(ERα和ERβ),化合物与两种受体亚型在结合活性和化合物结构特征方面存在差异.以31种与雌激素β受体亚型(ERβ)结合的化合物为研究对象,采用启发式变量筛选方法,从1524个变量中筛选出5个与化合物活性(lgRBA)最相关的变量,然后采用多元线性回归(MLR)建立最佳预测模型.模型相关性显著,而且具有良好的稳健性和预测能力(r2=0.829,q2LOO=0.742,r2pred=0.772,q2ext=0.724,RMSEE=0.395).同时揭示了影响化合物与ERβ受体结合的配体化合物分子的结构特征,并对模型的应用域进行了研究.     

氢质子MR波谱及双回波同反相位成像评价腰椎骨质疏松的研究

为探究氢质子MR波谱(MRS)的脂肪分数(FF)、脂水比(LWR)及双回波同反相位信号比值(SIR)与腰椎定量CT(QCT)骨矿物质密度(BMD)的相关性,并评估MRS、双回波同反相位成像对腰椎骨质减低及骨质疏松的诊断价值,本研究对因腰腿痛就诊的120名患者资料进行了回顾性分析,根据QCT分类标准将患者分为正常组、骨量减少组和骨质疏松组。所行MRI检查包括MRS和双回波同反相位成像,测量腰2~4椎体FF、LWR及双回波同反相位SIR。结果发现,FF、LWR、SIR与BMD呈负相关;FF、LWR与SIR呈正相关。FF、LWR、SIR、BMD在骨量正常组、骨量减少组和骨质疏松组任意两组间差异均有显著性(P<0.001)。本研究表明MRS及双回波同反相位成像可通过无创无辐射检测骨髓脂肪组织而间接反映骨代谢情况。