| 曼氏无针乌贼墨囊蛋白质提取及双向电泳条件优化 |
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| 引用本文： | 詹萍萍,王春琳,宋微微,母昌考,李荣华.曼氏无针乌贼墨囊蛋白质提取及双向电泳条件优化[J].宁波大学学报(理工版),2013(2):1-6. |
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| 作者姓名： | 詹萍萍 王春琳 宋微微 母昌考 李荣华 |
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| 作者单位： | 宁波大学海洋学院;宁波大学应用海洋生物教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(41176124,41206114);教育部博士点基金(20103305110003) |
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| 摘 要： | 应用TCA/丙酮沉淀法、裂解液法、裂解液-超速离心法以及层析法4种蛋白质样品制备方法,比较了曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)墨囊蛋白质双向电泳的样品制备效果.在此基础上,比较了不同样品处理方法、不同胶条范围以及不同上样量等对电泳结果的影响,筛选出一套较优的分离墨囊蛋白质的双向电泳条件.研究结果表明:TCA/丙酮沉淀法较适合曼氏无针乌贼墨囊蛋白质双向电泳的样品制备.该方法制备的曼氏无针乌贼墨囊蛋白质样品经双向电泳分离,用固相pH 5~8梯度胶条进行等点聚焦,上样量300μg,电泳结束后硝酸银染色,最终获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱.经过初步图像分析,检测到(389±19)个蛋白点,背景清晰且蛋白质得率较高.
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| 关 键 词： | 墨囊 蛋白质 双向电泳 |
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