| 利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258检测特定序列核酸 |
| |
| 引用本文： | 向东山,翟琨,向文军,王联芝.利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258检测特定序列核酸[J].分析化学,2014(8):1210-1214. |
| |
| 作者姓名： | 向东山 翟琨 向文军 王联芝 |
| |
| 作者单位： | 湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室;湖北民族学院化学与环境工程学院;四川文理学院化学化工学院; |
| |
| 基金项目： | 湖北省教育厅重点项目(Nos.D20131905,D20131906);国家自然科学基金项目(No.21267009);生物资源保护与利用湖北省重点实验室开放基金(No.PKLHB1316);湖北民族学院团队项目(No.MY2013T003);湖北省林学一级学科资助~~ |
| |
| 摘 要： | 利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258建立了一种高灵敏、高选择性的特定序列核酸检测方法,并以野生型乙型肝炎病毒的一段寡核苷酸序列为目标DNA,对这种方法进行了验证。在此体系中,分子信标的茎完全设计成C/G碱基对。在没有目标DNA时,Hoechst 33258与分子信标作用较弱,其荧光信号很弱;当有目标DNA存在时,分子信标与目标DNA杂交形成双链,Hoechst 33258与双链DNA作用后荧光信号显著增强。在优化条件下,目标DNA浓度在2×10-10~2×10-8mol/L范围内时,Hoechst 33258的荧光强度(ΔI)与目标DNA的浓度(C)之间具有良好的线性关系,回归方程为ΔI=3.3439C+18.6949(R2=0.9982),方法检出限(3σ)为9×10-11mol/L。此方法操作简单、检测速度快、灵敏度高、重现性好、检出限低。
|
| 关 键 词： | 无标记分子信标 Hoechst 33258 单链核酸 荧光 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
