| 腺病毒介导的mIL-12基因转染H22细胞及对其生长的影响 |
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| 引用本文： | 严林,潘运龙,覃莉,王华曦.腺病毒介导的mIL-12基因转染H22细胞及对其生长的影响[J].暨南大学学报,2004,25(6):675-680. |
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| 作者姓名： | 严林 潘运龙 覃莉 王华曦 |
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| 作者单位： | 1. 暨南大学,附属第一医院普外科,广东,广州,510630
2. 暨南大学,医学院组织胚胎学教研室,广东,广州,510630 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目(010367)，广东省卫生厅科研项目(A1999294) |
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| 摘 要： | 目的:研究重组小鼠白介素-12腺病毒(AdvmIL-12)和携带增强型荧光蛋白腺病毒(Adv-EGFP)在小鼠肝癌细胞H22中的转染及对其生长的影响。方法:将mIL-12基因p35、p40的cDNA分别插入5型腺病毒的E1和E3区构建成AdvmIL-12,分离纯化后进行鉴定、病毒滴度检测;同法构建含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的重组腺病毒(Adv-EGFP)。在不同的感染复数(MOI)、感染时间(TOI)条件下用Adv-EGFP转染H22细胞,观察Adv-EGFP的转染率。用AdvmIL-12、Adv-EGFP分别转染H22细胞,ELISA法检测上清液中mIL-12的含量。改良MTT法检测AdvmIL-12、Adv-EGFP在体外对H22细胞生长的影响。结果:得到AdvmIL-12和Adv-EGFP,每毫升空斑形成单位(PFU/mL)分别为1×108、1×109。TOI为1、2、4、24h时,转染效率分别为87 67%、96 38%、96 43%和96 32%;MOI为0、50、100、200、500时,转染效率分别为0、89 29%、96 41%、96 72%和98 37%。106个AdvmIL-12/H22细胞上清液中mIL-12(48h)为(89 71±22 05)ng。AdvmIL-12和Adv-EGFP对H22细胞生长无抑制。结论:本实验成功构建了AdvmIL-12和Adv-EGFP,它们在体外能够转染H22细胞,并能表达mIL-12和EGFP,但不能抑制H22细胞的生长。感染复数为100、感染时间为2h是重组腺病毒转染H22细胞的最适条件。
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| 关 键 词： | 白介素12 腺病毒 转染 H22细胞 |
| 文章编号： | 1000-9965(2004)06-0675-06 |
| 修稿时间： | 2004年6月9日 |
Transfection of mIL-12 gene mediated by adenoviral vector to H22 cells and its effect on the growth of H22 cells |
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| YAN Lin,PAN Yun-long,QIN Li,WANG Hua-xi.Transfection of mIL-12 gene mediated by adenoviral vector to H22 cells and its effect on the growth of H22 cells[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2004,25(6):675-680. |
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| Authors: | YAN Lin PAN Yun-long QIN Li WANG Hua-xi |
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| Institution: | YAN Lin~1,PAN Yun-long~1,QIN Li~2,WANG Hua-xi~1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | interleukin-12 adenovirus transfect H22 cell |
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