小白鼠脑及肝细胞中RNA连接酶的研究

本文利用小白鼠脑或肝全细胞抽提液为酶源,Oligo A为底物,对真核哺乳动物细胞中的RNA连接酶进行研究.经测定,其抗碱性磷酸单醋酶的活性为16—49mU标准/ml.另外,还利用小白鼠脑或肝细胞核抽提液为酶源,人工合成的UpCpU和~(32)pNp为底物,用同系层析和放射自显影技术进行检测,得到清晰的连接产物自显影点.使用 DEAE-Sephadex A_(25)柱将连接产物进行了分离,并用同系层析法对连接产物做了进一步鉴定.用KOH或碱性磷酸单酯酶水解法,证明了连接方式为:3′-P→5′-OH.实验初步发现:在小白鼠脑或肝细胞核中有一与 T_4RNA连接酶不同的新酶。