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普通生酮基古龙酸菌S2基因文库的构建和筛选
引用本文:谢莉,窦燕峰,张铎,张丽萍,赵宝华.普通生酮基古龙酸菌S2基因文库的构建和筛选[J].河北师范大学学报(自然科学版),2008,32(1):109-112.
作者姓名:谢莉  窦燕峰  张铎  张丽萍  赵宝华
作者单位:1. 河北师范大学,生命科学学院,河北,石家庄,050016
2. 石家庄制药集团,发展部,河北,石家庄,050051
3. 河北省生物研究所,河北,石家庄,050081
基金项目:河北省教育厅自然科学基金
摘    要:在Vc生产的第2步发酵中,普通生酮基古龙酸菌S2能利用醇醛脱氢酶,将L-山梨糖转化为Vc的前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG).对普通生酮基古龙酸菌S2基因组DNA进行部分酶切,与黏粒载体pKC505连接后,用包装蛋白进行包装,转染大肠杆菌DH5α,构建成普通生酮基古龙酸菌S2基因组文库,得到12 000余个转化子.再利用纯化的醇醛脱氢酶免疫家兔制备出合格抗血清,应用免疫酶斑点技术(Dot-ELISA)对文库进行筛选,获得1个阳性克隆K719#.通过检测此基因工程菌的活性,表明在添加辅酶PQQ后,K719#具有使L-山梨糖转化为2-KLG的功能,从而使醇醛脱氢酶在大肠杆菌中得到了表达,这为简化Vc的生产工艺奠定了基础.

关 键 词:普通生酮基古龙酸菌S2  醇醛脱氢酶  免疫酶斑点技术  文库筛选
文章编号:1000-5854(2008)01-0109-04
收稿时间:2007-09-11
修稿时间:2007-10-21

Construction and Selection of Genomic Library for Ketogulonigenium vulgare
XIE Li,DOU Yan-feng,ZHANG Duo,ZHANG Li-ping,ZHAO Bao-hua.Construction and Selection of Genomic Library for Ketogulonigenium vulgare[J].Journal of Hebei Normal University,2008,32(1):109-112.
Authors:XIE Li  DOU Yan-feng  ZHANG Duo  ZHANG Li-ping  ZHAO Bao-hua
Abstract:
Keywords:Ketogulonigenium vulgare  L sorbose/Lsorbosne dehydrogenase  Dot-ELISA  gene library and selection
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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