采用X射线衍射解析人鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RaIGDS)Ras结合结构域的空间结构 |
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引用本文: | 黄雪英,雷明,沈阳,张巍,刘艳丽,刘珂,赵浩斌,祁超. 采用X射线衍射解析人鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RaIGDS)Ras结合结构域的空间结构[J]. 分析化学, 2015, 43(6) |
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作者姓名: | 黄雪英 雷明 沈阳 张巍 刘艳丽 刘珂 赵浩斌 祁超 |
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作者单位: | 1. 华中师范大学化学学院,武汉,430079 2. 华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室,武汉,430079 3. 多伦多大学结构生物学中心,加拿大M5G 1L7 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,教育部中央高校自主项目(No.CCNU14F01006)资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China |
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摘 要: | Ras结合结构域(RBD)是鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS)家族成员C-端的高保守区,通过它连接Ras和Ras相关蛋白.利用Red Wings和SGC-1 screens相关的悬滴法设盘结晶,按体积比1∶1加蛋白液到含1∶100胞内蛋白酶Glu-C(w/w)的结晶溶液(2 mol/L(NH4)2 SO4,0.2 mol/L NaAc,0.1 mol/L HEPES,5% MPD,pH 7.5)中,晶体3天长成可组装大小.利用X-射线晶体衍射技术解析了人RalGDS的Ras结合域(RalGDS-RBD)的晶体结构,对比鼠和人RalGDS-RBD,主要是Ras结合区的C-端不同.人RalGDS-RBD通过Glu838和Glu840在RalGDS和Ras蛋白间形成氢键,而在同一位点,鼠RalGDS-RBD通过Asp820和Asp822形成氢键.人RalGDS-RBD结构中含ββαββαβ-型三维结构的泛素样构象,一个单体的C-端残基与相邻单体的β折叠形成平行βββββ结构.
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关 键 词: | 鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS) Ras结合结构域(RBD) Ras蛋白 |
Determination of Human Ral Guanine Nucleotide Dissociation Stimulator Ras Binding Domain by X-ray Diffraction |
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Abstract: | |
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Keywords: | Ral guanine nucleotide dissociation stimulator Ras binding domain Ras protein |
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