λ-DNA/Hind Ⅲ,pBR322质粒DNA及变性DNA与酶复合物AFM研究 |
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引用本文: | 汪新文,白春礼,李清,王乃新,曹恩华.λ-DNA/Hind Ⅲ,pBR322质粒DNA及变性DNA与酶复合物AFM研究[J].中国科学B辑,1996(2). |
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作者姓名: | 汪新文 白春礼 李清 王乃新 曹恩华 |
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作者单位: | 中国科学院化学研究所,中国科学院化学研究所,中国科学院化学研究所,中国科学院化学研究所,中国科学院生物物理研究所 北京 100080,北京 100080,北京 100080,北京 100080,北京 100101 |
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基金项目: | 中国科学院“八五”重大科研项目,国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 探索了DNA在云母表面的展层方法。采用低分子量的阳离子去垢剂苯二甲基苄基溴化胺(BAB)和甲酰胺混合溶液,建立了无蛋白微量展层技术,不仅可重复获得适合于原子力显微镜(AFM)观察的DNA样品,而且该方法适合于蛋白质-DNA相互作用的AFM研究。研究发现将)~-DNA/Hind Ⅲ,PBR322质粒DNA在35℃水浴中保温30min以上,再用BAB展层,可使盘绕在一起的DNA链在云母表面完全展开;采用AFM获得了双链DNA和质粒DNA的高分辨图象,并首次观察到了体外变性后的DNA与核酸酶(DNase Ⅰ)所形成复合物的结构。
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关 键 词: | 原子力显微镜 Lambda DNA/HindⅢ PBR322 BAB展层 |
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