金银花U6启动子的克隆及转录活性分析 |
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引用本文: | 金银花U启动子的克隆及转录活性分析.金银花U6启动子的克隆及转录活性分析[J].山东科学,2022,35(2):11-17. |
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作者姓名: | 金银花U启动子的克隆及转录活性分析 |
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作者单位: | 1.山东中医药大学,山东 济南 2503552.山东省中药质量控制与全产业链建设协同创新中心,山东 济南 250355 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81872963);中央本级重大增减支项目(2060302);山东省高等学校优秀青年创新团队支持计划(2019 KJE004);山东省重大科技创新工程(2019JZZY011020) |
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摘 要: | U6启动子是构建CRISPR/Cas9体系中驱动sgRNA转录的重要元件。利用聚合酶链式反应方法,从华金6号金银花中克隆到3种U6启动子,并分别构建5个不同长度的启动子驱动GUS的植物融合表达载体。以CaMV35S作为阳性对照实验,农杆菌作为阴性对照实验,采用农杆菌瞬时转化法对烟草原生质体进行转染,GUS染色后置于显微镜下观察原生质体的染色数量和效率。根据染色结果,成功筛选出Chr01 U6-F1这一高效转录的启动子,为后期开展金银花的基因编辑奠定了基础。
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关 键 词: | 金银花 U6启动子 克隆 基因编辑 |
收稿时间: | 2021-07-10 |
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