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镍离子亲和层析介质的制备及其用于组氨酸标记蛋白质的纯化
引用本文:夏海锋,张显,金雄华,刘婷婷,郑志永,饶志明.镍离子亲和层析介质的制备及其用于组氨酸标记蛋白质的纯化[J].江南大学学报(自然科学版),2010,9(6).
作者姓名:夏海锋  张显  金雄华  刘婷婷  郑志永  饶志明
基金项目:国家自然科学基金,国家863计划项目,江苏省自然科学基金,江南大学自主科研基金
摘    要:以交联琼脂糖微球为基质,通过环氧氯丙烷活化,偶联亚胺二乙酸并螯合Ni2+,制备得到一种镍离子亲和层析介质.结果发现,在强碱条件下环氧活化率达到了38.0 μmol/mL,最终Ni2+配基密度达到了30.9 μmol/mL,偶联效率为81.3%.利用得到的镍离子亲和介质对基因工程大肠杆菌表达的组氨酸标记3-羟基丁酮还原酶进行了一步层析纯化,酶活回收率达到了58.8%,纯化倍数为2.1,蛋白纯度在85%左右,纯化效果与常用商品介质基本相当.

关 键 词:琼脂糖微球  镍离子亲和层析  组氨酸标记  克隆表达  纯化

Preparation of Ni Affinity Chromatographic Adsorbent and Its Application on Purification of His-Tagged Protein
XIA Hai-feng,ZHANG Xian,JIN Xiong-hua,LIU Ting-ting,ZHENG Zhi-yong,RAO Zhi-ming.Preparation of Ni Affinity Chromatographic Adsorbent and Its Application on Purification of His-Tagged Protein[J].Journal of Southern Yangtze University:Natural Science Edition,2010,9(6).
Authors:XIA Hai-feng  ZHANG Xian  JIN Xiong-hua  LIU Ting-ting  ZHENG Zhi-yong  RAO Zhi-ming
Abstract:
Keywords:
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